一种汉防己甲素类物质的检测方法技术

本发明专利技术公开了一种汉防己甲素类物质的检测方法，涉及仪器分析技术领域。提供一种针对汉防己甲素类物质的含量的测试方法，采用高效液相色谱进行测试，利用自身稀释对照法对供试品进行定量分析，通过对色谱柱、流动相和波长进行控制能够显著提升检测的精确度，提供了一种能够简便、准确、高效地研究汉防己甲素有关物质的检测方法，同时满足专属性、准确性、精密度(包括重复性、日间差、人员操作误差)、线性与范围、灵敏度及耐用性等方面的要求。灵敏度及耐用性等方面的要求。灵敏度及耐用性等方面的要求。

【技术实现步骤摘要】
一种汉防己甲素类物质的检测方法


[0001]本专利技术涉及仪器分析
，具体而言，涉及一种汉防己甲素类物质的检测方法。

技术介绍

[0002]汉防己是防己科植物粉防己提取的生物碱，主要成分为汉防己甲素和汉防己乙素。目前临床应用主要是汉防己甲素，汉防己甲素有抗心肌缺血、抑制血小板聚集、解痉、镇痛、镇静、抗炎、抗溃疡、保肝、调节免疫力等作用，可用于支气管肺癌、肺泡细胞癌合并治疗，还可以用于一期、二期和三期的硅肺、尘肺的治疗。
[0003]汉防己甲素的质量控制对药物疗效和用要安全具有重要意义，高效液相色谱检测法是药物质量研究及控制的重要分析手段，该类方法必须通过方法验证，满足专属性、精密度、准确度、线性与范围、灵敏度及耐用性等方法验证方面的要求，这样才能保证有关物质检测结果的可靠性，才能用于指导药物的质量研究及控制。而目前各国药典均未收载其质量标准，汉防己甲素原料药仅收入于《化学药品地方标准上升国家标准》，批准号：WS
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10001
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(HD
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1101)
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2002，含量采用容量分析法检测，有关物质不检测；汉防己甲素片仅收入于《化学药品地方标准上升国家标准》，批准号：WS
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10001
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(HD
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0700)
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2002，含量采用紫外吸收系数法检测，有关物质不检测。
[0004]目前，两种含量检测方法灵敏度弱，且缺乏对检测体系专属性、精密度、准确度、线性与范围、灵敏度及耐用性等方面的方法验证与评价，难易确保检测结果的准确性与可靠性；有关物质的研究与控制缺失，无法保障药物疗效和用药安全。
[0005]鉴于此，特提出本专利技术。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于提供一种汉防己甲素类物质的检测方法，旨在提供一种能够简便、准确、高效地研究汉防己甲素有关物质的检测方法。
[0007]本专利技术是这样实现的：
[0008]第一方面，本专利技术提供一种汉防己甲素类物质的检测方法，包括：
[0009]分别配置系统适用性溶液、供试品溶液和由供试品溶液稀释得到的对照品溶液，将系统适用性溶液、供试品溶液和对照品溶液分别注入高效液相色谱仪，采用自身稀释对照法对供试品进行定量分析；
[0010]其中，采用的色谱柱填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶，检测波长为260
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290nm；
[0011]采用线性梯度洗脱的方式，采用的流动相包括流动相A和流动相B，流动相B是由乙腈和甲醇形成的混合溶液，并控制乙腈和甲醇的体积比为300:40
‑
60；流动相A包括水、流动相B和三乙胺，并控制水、流动相B和三乙胺的体积比为700
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900:150
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250:3。
[0012]在可选的实施方式中，流动相B中，乙腈和甲醇的体积比为300:45
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55，并调节pH值为1.8
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2.2；优选为300:48
‑
52；
[0013]优选地，用于调节pH值的酸选自高氯酸、三氟乙酸、甲酸、磷酸和冰醋酸中的任意一种。
[0014]在可选的实施方式中，流动相A中，水、流动相B和三乙胺的体积比为750
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850:180
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220:3；优选为790
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810:190
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210:3。
[0015]在可选的实施方式中，梯度洗脱的程度为：0min时，流动相A 90
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100％，流动相B 0
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10％；28min时，流动相A 80
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90％，流动相B10
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20％；60min时，流动相A 40
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60％，流动相B 40
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60％；
[0016]优选地，梯度洗脱的程度为：0min时，流动相A 100％，流动相B 0％；28min时，流动相A 85％，流动相B15％；60min时，流动相A 50％，流动相B 50％。
[0017]在可选的实施方式中，控制流速为0.8
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1.2mL/min，柱温为33
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37℃，进样体积为8
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12μL。
[0018]在可选的实施方式中，色谱柱的长度为230
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270mm，内径为4.3
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5.0mm，填充剂的粒径为4
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6μm；
[0019]优选地，色谱柱的型号选用YMC
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Pack ODS
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A、Agilent
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ZORBAX和ACE
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Excel中的任意一种。
[0020]在可选的实施方式中，用于制备系统适用性溶液、供试品溶液和对照品溶液的溶剂是由流动相A和流动相B混合而得，控制流动相A和流动相B的体积比为1:0.8
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1.2。
[0021]在可选的实施方式中，系统适用性溶液的制备过程包括：将汉防己甲素对照品和汉防己乙素对照品用混合溶剂进行溶解稀释，控制汉防己甲素的浓度为0.8
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1.2mg/mL，汉防己乙素的浓度为8
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12μg/mL。
[0022]在可选的实施方式中，供试品溶液的制备过程包括：将供试品用混合溶剂进行溶解稀释，控制汉防己甲素的浓度为0.8
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1.2mg/mL。
[0023]在可选的实施方式中，对照品溶液的制备过程包括：取供试品溶液用混合溶剂定量稀释，控制汉防己甲素的浓度为8
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12μg/mL。
[0024]本专利技术具有以下有益效果：本专利技术提供一种针对汉防己甲素类物质的含量的测试方法，采用高效液相色谱进行测试，利用自身稀释对照法对供试品进行定量分析，通过对色谱柱、流动相和波长进行控制能够显著提升检测的精确度，提供了一种能够简便、准确、高效地研究汉防己甲素有关物质的检测方法，同时满足专属性、准确性、精密度(包括重复性、日间差、人员操作误差)、线性与范围、灵敏度及耐用性等方面的要求。
附图说明
[0025]为了更清楚地说明本专利技术实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本专利技术的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
[0026]图1为试验例1的测试对应的色谱图；
[0027]图2为试验例1的测试对应的色谱图。
具体实施方式
[0028]为使本专利技术实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种汉防己甲素类物质的检测方法，其特征在于，包括：分别配置系统适用性溶液、供试品溶液和由所述供试品溶液稀释得到的对照品溶液，将所述系统适用性溶液、所述供试品溶液和所述对照品溶液分别注入高效液相色谱仪，采用自身稀释对照法对供试品进行定量分析；其中，采用的色谱柱填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶，检测波长为260
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290nm；采用线性梯度洗脱的方式，采用的流动相包括流动相A和流动相B，所述流动相B是由乙腈和甲醇形成的混合溶液，并控制乙腈和甲醇的体积比为300:40
‑
60；所述流动相A包括水、流动相B和三乙胺，并控制水、所述流动相B和三乙胺的体积比为700
‑
900:150
‑
250:3。2.根据权利要求1所述的汉防己甲素类物质的检测方法，其特征在于，所述流动相B中，乙腈和甲醇的体积比为300:45
‑
55，并调节pH值为1.8
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2.2；优选为300:48
‑
52；优选地，用于调节pH值的酸选自高氯酸、三氟乙酸、甲酸、磷酸和冰醋酸中的任意一种。3.根据权利要求2所述的汉防己甲素类物质的检测方法，其特征在于，所述流动相A中，水、所述流动相B和三乙胺的体积比为750
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850:180
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220:3；优选为790
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810:190
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210:3。4.根据权利要求1
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3中任一项所述的汉防己甲素类物质的检测方法，其特征在于，梯度洗脱的程度为：0min时，流动相A 90
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100％，流动相B 0
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10％；28min时，流动相A 80
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90％，流动相B 10
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20％；60min时，流动相A 40
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60％，流动相B 40
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60％；优选...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈斌，金鑫，陆纪宏，陈丽萍，汤小丽，俞刚美，
申请(专利权)人：浙江金华康恩贝生物制药有限公司，
类型：发明
国别省市：