一种检测氟雷拉纳含量的方法技术

本发明专利技术属于本发明专利技术涉及药物分析领域，公开了一种检测氟雷拉纳含量的方法。本发明专利技术的一些实施例，利用反相高效液相色谱仪测定溶液的色谱图，并依照标准品溶液的色谱图和供试品溶液的色谱图，通过外标法确定供试品溶液中氟雷拉纳的含量。本发明专利技术能够准确测定氟雷拉纳制剂中氟雷拉纳的含量，检测无干扰方法可靠稳定，重复性好、准确度高、精密度高，该检测方法的氟雷拉纳的回收率大于98%。拉纳的回收率大于98%。

【技术实现步骤摘要】
一种检测氟雷拉纳含量的方法


[0001]本专利技术涉及药物分析领域，特别涉及一种检测氟雷拉纳含量的方法。

技术介绍

[0002]氟雷拉纳是一种新型的异噁唑啉化合物，其通过干扰寄生虫的γ
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氨基丁酸(GABA)门控氯离子通道发挥作用导致神经系统过度兴奋而死亡。一剂局部用溶液可提供广谱和持久的保护，在2小时内开始杀死跳蚤，8小时内杀死100％的跳蚤，并控制4种蜱虫(黑腿蜱，美洲犬蜱，棕色犬蜱和孤星蜱)，消除了已有的跳蚤感染，控制着跳蚤产卵、幼虫发育和繁殖等，持续效果长达12周。氟雷拉纳上市的品种包括氟雷拉纳咀嚼片、氟雷拉纳局部外用溶液，氟雷拉纳莫昔克丁局部外用溶液。其中2016年7月20日美国FDA批准氟雷拉纳局部外用溶液用于预防与治疗猫、狗的跳蚤、蜱虫等感染，该产品为进入中国，但氟雷拉纳咀嚼片于2019.04.23获得中国农业农村部颁发的兽药进口批件。
[0003]为了保证氟雷拉纳后续的研发和生产质量，需要对氟雷拉纳制剂的质量进行控制。虽然氟雷拉纳中间体有相关的专利文献报道，如中国专利“一种氟雷拉纳中间体及其杂质的检测方法”(公开号：CN114113390A)检测的氟雷拉纳中间体及其杂质的含量。但目前尚未有关于氟雷拉纳制剂中氟雷拉纳检测方法的专利文献报道，提供一种氟雷拉纳制剂氟雷拉纳含量的检测方法，有助于控制氟雷拉纳制剂质量。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于克服现有技术的至少一个不足，提供一种检测氟雷拉纳含量的方法。
[0005]本专利技术所采取的技术方案是：
[0006]一种检测氟雷拉纳含量的方法，包括如下步骤：
[0007]1)配制氟雷拉纳的标准品溶液；
[0008]2)配制供试品溶液；
[0009]3)使用反相高效液相色谱仪测定标准品溶液中的氟雷拉纳，使得色谱图中氟雷拉纳与其相邻峰之间的分离度≥1.5；
[0010]4)使用反相高效液相色谱仪测定供试品溶液；
[0011]5)依照标准品溶液的色谱图和供试品溶液的色谱图，利用外标法确定供试品溶液中氟雷拉纳的含量。
[0012]在一些方法的实例中，所述反相高效液相色谱仪的条件为：流动相为乙腈水溶液，所述乙腈水溶液体积浓度为40％～60％，进行梯度洗脱。
[0013]在一些方法的实例中，所述高效液相色谱中的流速为0.9～1.1mL/min。
[0014]在一些方法的实例中，所述高效液相色谱中的色谱柱温为25～40℃。
[0015]在一些方法的实例中，所述供试样品溶液中氟雷拉纳的浓度为0.3～1mg/mL。
[0016]在一些方法的实例中，所述标准品溶液中氟雷拉纳的浓度为0.3～1mg/mL。
[0017]在一些方法的实例中，所述反相高效液相色谱中的进样量为5～20ul。
[0018]在一些方法的实例中，所述标准品溶液和供试品溶液的溶剂为体积分数为60％～70％乙腈水溶液。
[0019]在一些方法的实例中，所述高效液相色谱的仪的色谱柱为Waters XTerra RP 8色谱柱：4.6
×
250mm，5μm。
[0020]在一些方法的实例中，所述反相高效液相色谱的紫外检测波长为245nm～255nm。
[0021]在一些方法的实例中，包括如下步骤：
[0022]1)使用体积分数为60％～70％乙腈水溶液配制氟雷拉纳的标准品溶液，所述标准品溶液中氟雷拉纳的浓度为0.3～1mg/mL；
[0023]2)使用体积分数为60％～70％乙腈水溶液配制供试品溶液，所述供试样品溶液中氟雷拉纳的浓度为0.3～1mg/mL；
[0024]3)使用反相高效液相色谱仪测定标准品溶液中的氟雷拉纳，使得色谱图中氟雷拉纳与其相邻峰之间的分离度≥1.5，
[0025]4)使用反相高效液相色谱仪测定供试品溶液；
[0026]5)依照标准品溶液的色谱图和供试品溶液的色谱图，利用外标法确定供试品溶液中氟雷拉纳的含量；
[0027]所述反相高效液相色谱仪的条件为：流动相为乙腈水溶液，所述乙腈水溶液体积浓度为40％～60％，进行梯度洗脱，进样量为5～20ul，色谱柱为Waters XTerra RP 8色谱柱：4.6
×
250mm，5μm。紫外检测波长为245nm～255nm。
[0028]本专利技术的有益效果是：
[0029]本专利技术能够准确测定氟雷拉纳制剂中氟雷拉纳的含量，检测无干扰方法可靠稳定，重复性好、准确度高、精密度高，该检测方法的氟雷拉纳的回收率大于98％。
附图说明
[0030]图1是本专利技术实施例1中空白辅料的反相高效液相色谱图。
[0031]图2是本专利技术实施例1中供试品溶液的反相高效液相色谱。
[0032]图3是本专利技术实施例2中标准品溶液的反相高效液相色谱。
[0033]图4是本专利技术实施例3中标准品溶液的线性图。
[0034]图5是本专利技术实施例中供试品溶液的反相高效液相色谱。
具体实施方式
[0035]实施例1：空白辅料对氟雷拉纳含量检测的干扰试验
[0036]包括如下步骤：
[0037]1)配制氟雷拉纳的空白辅料溶液
[0038]取空白辅料160mg，精密称定至100ml容量瓶中，用乙腈溶剂稀释1000ml，摇匀，作为空白辅料溶液。
[0039]2)配制供试品溶液
[0040]取氟雷拉纳制剂适量(含氟雷拉纳100mg)，用乙腈溶剂稀释制成每1ml含氟雷拉纳500μg供试品溶液。
[0041]3)反相高效液相色谱测定
[0042]使用反相高效液相色谱仪测定空白辅料溶液的色谱图和供试品溶液的色谱图，分别如图1和图2。
[0043]测定条件：色谱柱为Waters XTerraRP8，4.6
×
250mm，5μm，流动相的为乙腈水溶液，进行梯度洗脱，其中，乙腈：水＝(53：47)，流速为1.0mL/min，色谱柱柱温为35℃，紫外检测器检测波长为251nm，进样量为10ul。
[0044]由图1和图2可知，氟雷拉纳制剂的高效液相色谱图中氟雷拉纳的峰型良好，空白辅料并不干扰氟雷拉纳含量检测，氟雷拉纳主峰与前后杂质达到基线分离，分离度大于1.5。
[0045]实施例2：
[0046]包括如下步骤：
[0047]1)配制氟雷拉纳的空白辅料溶液
[0048]取空白辅料160mg，精密称定至100ml容量瓶中，用乙腈溶剂稀释1000ml，摇匀，作为空白辅料溶液。
[0049]2)配制供试品溶液
[0050]取氟雷拉纳制剂适量(含氟雷拉纳100mg)，用乙腈溶剂稀释制成每1ml含氟雷拉纳500μg供试品溶液。
[0051]3)反相高效液相色谱测定
[0052]使用反相高效液相色谱仪测定空白辅料溶液的色谱图和供试品溶液的色谱图。
[0053]测定条件：色本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种检测氟雷拉纳含量的方法，其特征在于：包括如下步骤：1）配制氟雷拉纳的标准品溶液；2）配制供试品溶液；3）使用反相高效液相色谱仪测定标准品溶液中的氟雷拉纳，使得色谱图中氟雷拉纳与其相邻峰之间的分离度≥1.5；4）使用反相高效液相色谱仪测定供试品溶液；5）依照标准品溶液的色谱图和供试品溶液的色谱图，利用外标法确定供试品溶液中氟雷拉纳的含量。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：其中，所述反相高效液相色谱仪的条件为：流动相为乙腈水溶液，所述乙腈水溶液体积浓度为40%～60%，进行梯度洗脱。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述高效液相色谱中的流速为0.9～1.1mL/min。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述高效液相色谱中的色谱柱温为25～40℃。5.根据权...

【专利技术属性】
技术研发人员：潘洁桃，温军贤，王龙书，廖春晓，何采芸，郭秀丽，黄婉，
申请(专利权)人：丽珠集团新北江制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：