一种从赛拉菌素结晶母液中回收赛拉菌素的方法技术

本发明专利技术公开了一种从赛拉菌素结晶母液中回收赛拉菌素的方法，其工艺步骤为：首先取赛拉菌素结晶母液减压浓缩，收集浓缩液，再溶于有机溶剂，加入层析硅胶减压浓缩，然后用石油醚混合均匀配成湿法上柱样进行柱层析，收集纯度≥65％的组分，然后减压浓缩结晶，得到赛拉菌素。本发明专利技术以采用工业生产中难以回收利用的赛拉菌素结晶母液为起始物料，采用硅胶层析的工艺回收赛拉菌素，操作简单，溶剂可回收套用，以层析硅胶为吸附剂，成本低，适合工业化生产，进一步节省工业化成本，减少对人体和环境的影响，降低资源浪费，实现了资源的充分利用。实现了资源的充分利用。

【技术实现步骤摘要】
一种从赛拉菌素结晶母液中回收赛拉菌素的方法


[0001]本专利技术涉及生物医药提纯
，具体地说，涉及一种从赛拉菌素结晶母液中回收赛拉菌素的方法。

技术介绍

[0002]赛拉菌素是一种抗寄生虫剂和驱虫剂，是半合成的大环内酯，是多拉菌素的衍生物，呈白色或淡黄色结晶粉末，其化学名为25
‑
环已烷基
‑
25
‑
去(1
‑
甲丙基)
‑5‑
脱氧
‑
22,23
‑
二氢
‑5‑
(肟基)
‑
阿维菌素B1单糖，分子式为C
43
H
63
NO
11
，分子769。赛拉菌素是由基因重组的阿维链霉菌新菌株发酵而成的一种阿维菌素类抗生素，其对很多寄生虫都有广泛的抑制和杀灭作用，包括蚤类、疥螨、蜱、钩虫、虱、线虫和犬恶丝虫等，有使用方便、疗效较好、毒性小等优点。该药治疗犬和猫的蚤(猫栉首蚤和犬栉头蚤)、螨、蜱及一些体内线虫(蛔虫和钩虫)感染有着优于其他阿维菌素类药物的效果，并且其在预防犬、猫的犬恶丝虫感染上有着非常良好的效果。因此，赛拉菌素在宠物界很受欢迎，是一种值得推广应用的宠物抗寄生虫药物。
[0003]赛拉菌素结晶母液来源为肟化后的结晶步骤，第一步反应为氢化反应，以多拉菌素与氢气为原料，在溶剂下反应得到氢化物。第二步反应为氧化反应，氢化物用溶剂溶解，氧化镁为氧化剂，氧化得到氧化物。第三步为肟化反应，氧化物用乙酸甲酯溶解，肟化剂肟化后得到赛拉菌素，反应完毕加入二氯甲烷萃取，再加入水进行水洗，静置，分出有机相浓干，加入乙酸甲酯进行结晶，过滤得到赛拉菌素(纯度94％)以及赛拉菌素结晶母液(纯度23％)。
[0004]赛拉菌素结晶母液回收方法难点在于结晶母液含量低、纯度低、呈黏稠状，因此，为了进一步提高对结晶母液的回收利用，降低工业化成本，减少对人体和环境的影响，降低资源浪费，需要开发出有效的纯化提取方案。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于克服现有技术的至少一个不足，提供一种从赛拉菌素结晶母液中回收赛拉菌素的方法。
[0006]本专利技术所采取的技术方案是：
[0007]本专利技术提供一种从赛拉菌素结晶母液中回收赛拉菌素的方法包括以下步骤：
[0008]1)母液的预处理：取赛拉菌素结晶母液减压浓缩，收集得到浓缩液；
[0009]2)配置上柱样：向浓缩液溶解于有机溶剂中，加入层析硅胶，搅拌均匀，再减压浓缩，用石油醚混合均匀配成湿法上柱样；
[0010]3)上柱层析：在层析柱中加入硅胶与石油醚的混合物，将湿法上柱样缓慢加进层析柱，然后加入洗脱剂洗脱，收集纯度≥65％的组分，然后减压浓缩结晶，得到赛拉菌素。
[0011]在一些实例中，所述步骤2)中的有机溶剂选自二氯甲烷、丙酮、乙酸乙酯中的任意一种。
[0012]在一些实例中，所述有机溶剂用量为浓缩液质量的3.5～4.5倍。
[0013]在一些实例中，所述步骤2)和步骤3)中硅胶的目数为200～300目，所述步骤2)中配成上柱样所需的硅胶量为浓缩液的0.9～1.1倍质量。
[0014]在一些实例中，所述步骤3)中的层析柱中加入的硅胶总量为浓缩液的9.5～10.5倍质量。
[0015]在一些实例中，所述步骤3)中的层析柱的径高比为1：(7～9)。
[0016]在一些实例中，所述的步骤3)中的洗脱剂为丙酮与石油醚的混合溶液，
[0017]在一些实例中，所述洗脱剂中丙酮与石油醚的体积比为(1：1)～(1：5)。
[0018]在一些实例中，所述洗脱剂用量为硅胶柱体积的12～14BV，洗脱液的流速为硅胶柱体积0.07～0.09BV/min。
[0019]在一些实例中，所述洗脱过程条件为：所述层析柱中硅胶总量为浓缩液的9.5～10.5倍质量，层析柱的径高比为1：(7～9)，洗脱剂为(1：1)～(1：5)体积比例混合的丙酮与石油醚，洗脱剂用量为硅胶柱体积的12～14BV，洗脱液的流速为硅胶柱体积0.07～0.09BV/min。
[0020]本专利技术的有益效果是：本专利技术以赛拉菌素结晶母液为起始物料，采用硅胶层析的工艺回收赛拉菌素，操作简单，溶剂可回收套用，以层析硅胶为吸附剂，成本低，适合工业化生产。
具体实施方式
[0021]下文的公开提供了许多不同的实施方式或例子用来实现本专利技术的不同方案。
[0022]实施例1
[0023]1)母液的预处理：取100ml赛拉菌素结晶母液，减压浓缩至无液体蒸出，浓缩温度80℃，取赛拉菌素母液浓缩物8g，赛拉菌素纯度23％；
[0024]2)硅胶柱层析：用32g二氯甲烷搅拌溶解，加入8g硅胶(200
‑
300目)搅拌均匀，减压浓缩至无液体蒸出，此时硅胶呈黄色流沙状，流动性好。加入石油醚混合均匀配成湿法上柱样。称取72g硅胶用石油醚混合均匀，倒入径高比为1：8的层析柱，用蠕动泵压实硅胶柱，将湿法上柱样缓慢倒入硅胶柱上方，塞入一团棉花缓冲。加入洗脱剂(丙酮：石油醚的体积比为1：1)，流速控制0.09BV/min，分别收集前组分、成品组分和后组分；
[0025]3)组分收集：收得前组分1.05L，减压浓缩干燥得3.81g固体，赛拉菌素纯度2.1％，，赛拉菌素纯度过低，前组分回收溶剂后舍弃；收得成品组分1.2L，减压浓缩干燥，得到2.86g固体，赛拉菌素纯度72.32％，赛拉菌素纯度合格，成品组分浓缩回收溶剂后进行结晶，成品组分收率85.8％；收得后组分0.51L，减压浓缩干燥，得到1.21g固体，赛拉菌素纯度8.0％，赛拉菌素纯度过低，后组分回收溶剂后舍弃。
[0026]实施例2
[0027]1)母液的预处理：取400ml赛拉菌素结晶母液，减压浓缩至无液体蒸出，浓缩温度80℃，取赛拉菌素母液浓缩物32g，赛拉菌素纯度23％；
[0028]2)硅胶柱层析：用128.5g乙酸乙酯搅拌溶解，加入32g硅胶(200
‑
300目)搅拌均匀，减压浓缩至无液体蒸出，此时硅胶呈黄色流沙状，流动性好。加入石油醚混合均匀配成湿法上柱样。称取288g硅胶用石油醚混合均匀，倒入径高比为1：8的层析柱，用蠕动泵压实硅胶
柱，将湿法上柱样缓慢倒入硅胶柱上方，塞入一团棉花缓冲。加入洗脱剂(丙酮：石油醚的体积比为1：3)，流速控制0.08BV/min，分别收集前组分、成品组分和后组分；
[0029]3)组分收集：收得前组分2.5L，减压浓缩干燥得11.4g固体，赛拉菌素纯度0.5％，赛拉菌素纯度过低，前组分回收溶剂后舍弃；成品组分1.6L，减压浓缩浓干，得到9.23g固体，赛拉菌素纯度83.57％，赛拉菌素纯度合格，成品组分浓缩回收溶剂后进行下一步结晶，成品组分收率60.71％；后组分1.51L，减压浓缩浓干，得到2.85g固体，赛拉菌素纯度10.04％，赛拉菌素纯度过低，后组本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种从赛拉菌素结晶母液中回收赛拉菌素的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)母液的预处理：取赛拉菌素结晶母液减压浓缩，收集得到浓缩液；2)配置上柱样：向浓缩液溶解于有机溶剂中，加入层析硅胶，搅拌均匀，再减压浓缩，用石油醚混合均匀配成湿法上柱样；3)上柱层析：在层析柱中加入硅胶与石油醚的混合物，将湿法上柱样缓慢加进层析柱，然后加入洗脱剂洗脱，收集纯度≥65％的组分，然后减压浓缩结晶，得到赛拉菌素。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤2)中的有机溶剂选自二氯甲烷、丙酮、乙酸乙酯中的任意一种。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述有机溶剂用量为浓缩液质量的3.5～4.5倍。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤2)和步骤3)中硅胶的目数为200～300目，所述步骤2)中配成上柱样所需的硅胶量为浓缩液的0.9～1.1倍质量。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤3...

【专利技术属性】
技术研发人员：翁宇轩，李锦华，潘学文，陈果，温军贤，
申请(专利权)人：丽珠集团新北江制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：