与分子缀合相关的组合物和方法技术

本发明专利技术涉及活化的迈克尔受体(AMA)化合物，其可以与含有迈克尔供体部分的生物分子进行缀合，从而提供血浆稳定的抗体

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】与分子缀合相关的组合物和方法
[0001]相关申请
[0002]本申请要求2019年12月2日提交的美国临时专利申请号62/942,482的优先权权益。这一申请的全部内容以引用的方式并入本文。

技术介绍

[0003]抗体
‑
药物缀合物(ADC)正在成为一类强大的抗肿瘤剂，对一系列癌症具有疗效。ADC通常包括三个不同的特征结构：细胞结合剂或靶向部分(抗体)；接头；和细胞毒性剂(药物)(图1)。因此，抗体生物缀合物在开发用于生物学和医学应用的新型生物活性缀合物中具有至关重要的作用。化学选择性和温和的过程是在不干扰抗体结构、功能和活性的情况下精确安装修饰的关键。氨基酸侧链的反应性、可达性和丰度是实现某一残基对所有其他蛋白氨基酸进行选择性修饰所需的关键方面。其中，半胱氨酸(Cys)由于其低丰度及其巯基侧链的高亲核性，仍然是首选氨基酸。
[0004]尽管抗体生物缀合领域取得了发展，但马来酰亚胺仍然是最常用的试剂，这主要是由于马来酰亚胺试剂的快动力学和易于合成。然而，由此试剂形成的硫代琥珀酰亚胺缀合物与血浆中存在的硫醇发生交换反应，从而导致马来酰亚胺的释放。就ADC而言，这可能会导致毒性，因为硫醇交换反应的产物是一种高效的细胞毒性药物。因此，迫切需要以这样的方式构建蛋白质和抗体缀合物的方法，所述方式允许探针和药物在其序列内的特定位点进行位点选择性和不可逆的安装，从而得到在预期目标位点可靠地释放药物的血浆稳定的ADC。
[0005]单克隆抗体中链间半胱氨酸残基的硫醇可用作药物分子的连接位点。在人IgG1中，有四个链间二硫键可用作缀合位点。所述四个链间二硫键可以被三(2
‑
羧乙基)膦(TCEP)或二硫苏糖醇(DTT)还原，从而产生八个可用于缀合药物分子的硫醇基团。通过这种方法，可以获得不同药物抗体比(DAR)的缀合物。
[0006]经典地，半胱氨酸残基可以通过将硫醇添加到亲电子试剂诸如马来酰亚胺中来修饰。因此可以通过还原抗体的二硫键然后与马来酰亚胺反应来制备缀合物。然而，已发现基于马来酰亚胺的抗体
‑
药物缀合物在血液循环中的稳定性有限。因此，需要一种将半胱氨酸残基缀合到活性部分的替代方法，这将导致ADC不易受逆迈克尔反应影响。

技术实现思路

[0007]在某些实施方案中，本公开涉及一种式(I)的化合物：
[0008][0009]或其盐，其中：
[0010]A是A是
[0011]M是N、CR
30
或C(
‑
L
‑
Q)；
[0012]每个L独立地选自间隔基部分；
[0013]每个Q独立地选自活性部分或反应性基团；
[0014]X选自
‑
Cl、
‑
Br和
‑
I；
[0015]J是靶向部分；
[0016]R
30
和R
31
各自独立地选自吸电子基团、氢、烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基、碳环基、杂环基和卤代烷基；
[0017]R
46
选自烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基、碳环基、杂环基和卤代烷基；
[0018]R
42
和R
43
各自独立地选自
‑
OH、烷氧基、
‑
NR
44
R
45
、烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基、碳环基和杂环基，其中R
44
和R
45
与它们所连接的氮原子一起可形成5至8元环，任选地与芳基或杂芳基环稠合；
[0019]R
32
、R
44
和R
45
各自独立地选自氢、烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基、碳环基、杂环基和卤代烷基；
[0020]R
47
是O
‑
、烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基、碳环基、杂环基；并且
[0021]n为1至4。
[0022]在某些实施方案中，本公开涉及一种制备缀合物的方法，所述方法包括使式(I)的化合物与包含共价结合到迈克尔供体的靶向部分的试剂反应，从而产生迈克尔加合物。
[0023]在某些实施方案中，本公开涉及一种药物组合物，所述药物组合物包含式(I)的化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的赋形剂。
[0024]在某些实施方案中，本公开涉及一种用于治疗有需要的受试者的方法，所述方法包括施用式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，或施用包含式(I)的化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的赋形剂的组合物。
附图说明
[0025]图1是抗体
‑
药物缀合物(ADC)的示意图。
[0026]图2示出了证明AMA
‑
9c在水性环境中随时间的稳定性的高效液相色谱(HPLC)图。
[0027]图3说明了N
‑
Ac
‑
半胱氨酸与化合物AMA
‑
1、AMA
‑
2、AMA
‑
3、AMA
‑
4、AMA
‑
8、AMA
‑
9c、AMA
‑
10、mMPS
‑
4和PyrMPS
‑
1的相对反应速率。
[0028]图4显示了化合物N
‑
Ac
‑
Cys
‑
AMA
‑
10与化合物14相比的相对稳定性。
[0029]图5是示出AMA
‑
9c与人血清白蛋白(1)和Thio
‑
mAb(2)的缀合反应的反应方案。
[0030]图6是示出AMA
‑
9c与Thio
‑
mAb的缀合反应的分析的疏水相互作用色谱
‑
HPLC(HIC
‑
HPLC)图。
[0031]图7是示出迈克尔受体前体参比A相比于AMA前体pryMPS
‑
1和mMPS
‑
4与N
‑
Ac
‑
半胱氨酸的相对反应速率的方案。
具体实施方式
[0032]本公开的化合物
[0033]在某些方面，本公开涉及活化的迈克尔受体(AMA)化合物，其可以与含有迈克尔供体部分的生物分子进行缀合。AMA(诸如式(II)和(III)的乙烯基芳基酮)可以与迈克尔供体发生迈克尔加成反应，以得到式(IIa)和(IIIa)的缀合物(方案1)。在某些方面，本公开涉及生物分子与AMA的缀合物，诸如化合物(IIa)和(IIIa)。
[0034]方案1.
[0035][0036]在式(II)、(III)、(IIa)和(IIIa)的化合物中，L是间隔基部分；Q是活性部分(例如，其可以包含药本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种式(I)的化合物：或其盐，其中：A是A是M是N、CR
30
或C(
‑
L
‑
Q)；每个L独立地选自间隔基部分；每个Q独立地选自活性部分或反应性基团；X选自
‑
Cl、
‑
Br和
‑
I；J是靶向部分；R
30
和R
31
各自独立地选自吸电子基团、氢、烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基、碳环基、杂环基和卤代烷基；R
46
选自烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基、碳环基、杂环基和卤代烷基；R
42
和R
43
各自独立地选自
‑
OH、烷氧基、
‑
NR
44
R
45
、烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基、碳环基和杂环基，其中R
44
和R
45
与它们所连接的氮原子一起可形成5至8元环，任选地与芳基或杂芳基环稠合；R
32
、R
44
和R
45
各自独立地选自氢、烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基、碳环基、杂环基和卤代烷基；R
47
是O
‑
、烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基、碳环基、杂环基；并且n为1至4。2.如权利要求1所述的化合物，其中M是N。3.如前述权利要求中任一项所述的化合物，其中M是CR
30
，并且其中R
30
是吸电子基团。4.如前述权利要求中任一项所述的化合物，其中A选自并且其中R
31
是吸电子基团。5.如前述权利要求中任一项所述的化合物，其中M是C(
‑
L
‑
Q)，并且其中L通过吸电子基
团与C偶联，优选地其中L通过选自酰胺或酯的吸电子基团与C偶联。6.如前述权利要求中任一项所述的化合物，其中R
30
是
‑
CONR
33
R
34
或
‑
CO2R
35
，并且R
33
、R
34
和R
35
各自独立地选自氢、烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基、碳环基、杂环基和卤代烷基。7.如前述权利要求中任一项所述的化合物，其中：每个吸电子基团独立地选自
‑
NO2、
‑
CN、
‑
卤代烷基、
‑
CONR
33
R
34
、
‑
CO2R
35
、
‑
C(＝O)R
36
、
‑
S(＝O)R
37
、
‑
S(＝O)2OR
38
和
‑
NR
39
R
40
R
41
；并且R
36
、R
37
、R
38
、R
39
、R
40
和R
41
各自独立地选自氢、烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基、碳环基、杂环基和卤代烷基。8.如权利要求7所述的化合物，其中每个吸电子基团独立地选自
‑
CN、
‑
CONR
33
R
34
和
‑
CO2R
35
。9.如权利要求8所述的化合物，其中每个吸电子基团独立地选自
‑
CN、
‑
CONH2和
‑
CO2Me。10.如前述权利要求中任一项所述的化合物，其中Q是活性部分。11.如前述权利要求中任一项所述的化合物，其中Q包含L'和Q'，其中L'是接头并且Q'是活性剂。12.如前述权利要求中任一项所述的化合物，其中L'包含偶联基团，其中所述偶联基团偶联至L。13.如权利要求12所述的化合物，其中所述偶联基团选自
‑
C(＝O)NR
32
‑
、
‑
C(＝O)O
‑
、
‑
C(＝NR
32
)
‑
、
‑
C＝NO
‑
、
‑
NR
32
‑
C(＝O)
‑
NR
32
‑
、
‑
OC(＝O)O
‑
、
‑
S
‑
S
‑
、
‑
NR
32
S(＝O)2O
‑
和
‑
OS(＝O)2O
‑
。14.如权利要求12所述的化合物，其中所述偶联基团选自15.如前述权利要求中任一项所述的化合物，其中L'还包含可裂解基团，其中所述可裂解基团偶联至Q'。16.如权利要求15所述的化合物，其中偶联至Q'的所述可裂解基团选自
其中R
49
是氢或
‑
C(＝O)R
50
；并且R
50
是低级烷基。17.如前述权利要求中任一项所述的化合物，其中L'还包含C6‑
C
100
亚烷基，所述亚烷基包含至少一个选自
‑
NH
‑
、
‑
C(＝O)
‑
、
‑
O
‑
、
‑
S
‑
、
‑
S(O)
‑
和
‑
S(＝O)2‑
的基团。18.如前述权利要求中任一项所述的化合物，其中L包含C6–
C
100
亚烷基，所述亚烷基包含至少一个选自
‑
NH
‑
、
‑
C(＝O)
‑
、
‑
O
‑
、
‑
S
‑
、
‑
S(O)
‑
和
‑
S(＝O)2‑
的基团。19.如前述权利要求中任一项所述的化合物，其中L包含19.如前述权利要求中任一项所述的化合物，其中L包含其中a是连接至含M芳族环的键，且b是连接至L
’
的键；并且n为2至20。20.如前述权利要求中任一项所述的化合物，其中Q'是激素、寡核苷酸、毒素、亲和配体、用于检测的探针或其组合。21.如前述权利要求中任一项所述的化合物，其中Q'选自细胞因子、免疫调节化合物、抗癌剂、抗病毒剂、抗细菌剂、抗真菌剂、驱虫剂或其组合。22.如权利要求1至9中任一项所述的化合物，其中Q是反应性基团。23.如权利要求22所述的化合物，其中所述反应性基团选自
‑
N3、
‑
C≡CH、
‑
S(O)2Hal、
‑
NH2、
‑
CO2Hal、
‑
OH、<...

【专利技术属性】
技术研发人员：朴泰教，金璇暎，朴秀浩，丁头焕，徐东勋，李相光，尹尚铉，河智贤，李享俶，朴沃龟，徐范硕，金世娜，薛旻娥，宋真我，
申请(专利权)人：尹图赛利有限公司，
类型：发明
国别省市：