一种（2R,4R）-4-甲基-2-哌啶甲酸乙酯异构体的检测方法技术

本发明专利技术涉及药物分析技术领域，具体公开一种(2R,4R)

A detection method of (2R, 4R) - 4-methyl-2-piperidine carboxylic acid ethyl ester isomer

【技术实现步骤摘要】
一种(2R,4R)
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甲基
‑2‑
哌啶甲酸乙酯异构体的检测方法


[0001]本专利技术涉及药物分析
，尤其涉及一种(2R,4R)
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甲基
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哌啶甲酸乙酯异构体的检测方法。

技术介绍

[0002]自1978年日本Mitsubishi公司首次报导阿加曲班的抗凝血活性以来，众多科研工作者对其化学合成、生物活性以及临床应用进行了深入的研究。阿加曲班于1990年首次在日本上市，2000年经美国FDA批准上市，2002年在我国上市。阿加曲班为左旋精氨酸的哌啶羧酸衍生物，具有高选择性，能可逆性直接抑制凝血酶的活性，迅速和循环中游离的血凝块中的凝血酶结合，产生抗凝作用；还能用于与肝素引起血小板减少有关的血栓形成。
[0003](2R,4R)
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甲基
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哌啶甲酸乙酯是合成阿加曲班的重要起始物料，因此，其质量控制对合成阿加曲班的有很大影响。(2R,4R)
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甲基
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哌啶甲酸乙酯还存在其他三个手性异构体，(2R,4S)
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甲基
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哌啶甲酸乙酯、(2S,4R)
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甲基
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哌啶甲酸乙酯和(2S,4S)
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甲基
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哌啶甲酸乙酯，上述异构体均有可能成为合成阿加曲班时的杂质，且目前并没有相关文献报道上述异构体的检测方法，因此，亟需研发一种可以对(2R,4R)
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甲基
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哌啶甲酸乙酯的质量进行有效控制的检测方法，进而保证对阿加曲班质量的效控制，以完善行业标准。

技术实现思路

[0004]鉴于此，本专利技术提供一种(2R,4R)
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甲基
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哌啶甲酸乙酯异构体的检测方法，专属性强、准确度高，并具有优异的线性关系，能够满足(2R,4R)
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甲基
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哌啶甲酸乙酯中其他三个手性异构体的检测要求。
[0005]为达到上述专利技术目的，本专利技术实施例采用了如下的技术方案：
[0006]一种(2R,4R)
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甲基
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哌啶甲酸乙酯异构体的检测方法，所述检测方法包括以下步骤：
[0007]步骤一、配制对照品溶液和供试品溶液：
[0008]对照品溶液的配制：取(2S,4S)
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甲基
‑2‑
哌啶甲酸乙酯对照品、(2R,4S)
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甲基
‑2‑
哌啶甲酸乙酯对照品和(2S,4R)
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甲基
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哌啶甲酸乙酯对照品，用溶剂配成对照品溶液；
[0009]供试品溶液的配制：取(2R,4R)
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甲基
‑2‑
哌啶甲酸乙酯样品，用溶剂配制成供试品溶液；
[0010]步骤二、采用气相色谱对所述对照品溶液和供试品溶液进行检测，所述气相色谱的色谱条件为：
[0011]采用以14％氰丙基苯基
‑
86％二甲基聚硅烷中加入30％七
‑
(2,3
‑
二
‑
O
‑
甲基
‑6‑
O
‑
叔丁基二甲基硅基)
‑
β
‑
环糊精为固定液的毛细管柱；进样口温度为215℃～225℃；程序升温为：起始温度为78℃～82℃，以9℃/min～11℃/min的速率升温至115℃～125℃，维持
10min～20min，再以9℃/min～11℃/min的速率升温至195℃～205℃，维持1min～10min；采用氢火焰离子化检测器，所述检测器温度为245℃～255℃。
[0012]相对于现有技术，本申请提供的(2R,4R)
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甲基
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哌啶甲酸乙酯异构体的检测方法，具有以下优势：
[0013]本申请提供的(2R,4R)
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甲基
‑2‑
哌啶甲酸乙酯异构体的检测方法，实现了对(2R,4R)
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甲基
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哌啶甲酸乙酯及其三个手性异构体的定量和定性分析，该方法专属性强，线性关系良好，标准曲线的线性范围内的相关系数都大于0.99，并具有优异的准确度、灵敏度和重复性，满足(2R,4R)
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甲基
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哌啶甲酸乙酯及其三个手性异构体的检测要求，实现了对(2R,4R)
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甲基
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哌啶甲酸乙酯质量的有效控制；此外，该检测方法还能够快速、准确地对(2R,4R)
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甲基
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哌啶甲酸乙酯原料药中其他三个手性异构体进行检测，整个操作过程可靠、可控，适于实际应用和推广，具有广阔的应用前景。
[0014]可选的，所述程序升温为：起始温度为80℃，以10℃/min的速率升温至120℃，维持15min，再以10℃/min的速率升温至200℃，维持5min。
[0015]升温程序是影响气相色谱柱性能的重要因素，初始温度、升温速率以及最终温度决定着各组分的洗脱能力，因此本申请优选上述初始温度、升温速率和最终温度，能够将(2R,4R)
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甲基
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哌啶甲酸乙酯及其三个手性异构体进行快速分离，且各组分还具有优异的分离度。
[0016]可选的，所述进样口温度为220℃。
[0017]可选的，所述检测器温度为250℃。
[0018]优选的进样口温度和检测器温度有利于将(2R,4R)
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甲基
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哌啶甲酸乙酯中存在的异构体从主成分中分离出来，且保证峰型较好，分离度较高。
[0019]可选的，载气为氮气，分流比为5～20:1。
[0020]可选的，所述分流比为10:1。
[0021]优选的分流比使得色谱峰的峰形较好，避免峰变形拖尾等情况的发生。
[0022]可选的，流速为0.8ml/min～1.2ml/min，进样体积为1μL。
[0023]进一步可选的，流速为1ml/min。
[0024]可选的，所述毛细管柱的型号为CYCLOSIL
‑
B。
[0025]可选的，所述毛细管柱的规格为30m
×
0.32mm
×
0.25μm。
[0026]不同的色谱柱对化合物的保留性能差别较大，因此本申请采用型号为CYCLOSIL
‑
B，规格为30m
×
0.32mm
×
0.25μm的毛细管柱，能够实现目标物的快速有效的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种(2R,4R)
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甲基
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哌啶甲酸乙酯异构体的检测方法，其特征在于：所述检测方法包括以下步骤：步骤一、配制对照品溶液和供试品溶液：对照品溶液的配制：取(2S,4S)
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甲基
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哌啶甲酸乙酯对照品、(2R,4S)
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甲基
‑2‑
哌啶甲酸乙酯对照品和(2S,4R)
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甲基
‑2‑
哌啶甲酸乙酯对照品，用溶剂配成对照品溶液；供试品溶液的配制：取(2R,4R)
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甲基
‑2‑
哌啶甲酸乙酯样品，用溶剂配制成供试品溶液；步骤二、采用气相色谱对所述对照品溶液和供试品溶液进行检测，所述气相色谱的色谱条件为：采用以14％氰丙基苯基
‑
86％二甲基聚硅烷中加入30％七
‑
(2,3
‑
二
‑
O
‑
甲基
‑6‑
O
‑
叔丁基二甲基硅基)
‑
β
‑
环糊精为固定液的毛细管柱；进样口温度为215℃～225℃；程序升温为：起始温度为78℃～82℃，以9℃/min～11℃/min的速率升温至115℃～125℃，维持10min～20min，再以9℃/min～11℃/min的速率升温至195℃～205℃，维持1min～10min；采用氢火焰离子化检测器，所述检测器温度为245℃～255℃。2.如权利要求1所述的(2R,4R)
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甲基
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哌啶甲酸乙酯异构体的检测方法，其特征在于：所述程序升温为：起始温度为80℃，以10℃/min...

【专利技术属性】
技术研发人员：宗莹莹，马宏思，杨俊免，孙朝利，马明卓，陈碧楚，王亚静，相雅婷，祝春英，韩倩茹，骆会茹，刘瑶，
申请(专利权)人：石家庄四药有限公司，
类型：发明
国别省市：