【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于药品原料制备，具体涉及一种支化程度可控的艾考糊精及其制备方法。
技术介绍
1、淀粉作为生物大分子多糖混合物，天然淀粉一般含有两种组分：直链淀粉(amylose)和支链淀粉(amylopectin)，支链淀粉线性段以α-1，4连接，分支点以α-1，6连接。
2、艾考糊精(icodextrin)是艾考糊精腹膜透析液中的主要活性成分。艾考糊精作为渗透压调节剂，是由淀粉水解后得到的一种葡聚糖混合物，即通过α-1,4和少于10％的α-1,6糖苷键连接的水溶性葡萄糖聚合物。
3、根据美国百特公司在fda注册资料中公开的信息，艾考糊精在化学结构具备两个显著特征：其一是分子量与分子量分布，重均分子量应为13000～19000，数均分子量：5000～6500。其中小于1638的不得过6％，1638～5000之间应为12～26％，5000～20000之间应为45～66％，20000～45000之间应为13～23％，1638～45000之间应不低于85％；其二为支化度水平，用来控制原料药中α-1,6-糖苷键应小于10％。这两大特征中，分子量与分布确保其形成合理的超滤梯度，而支化度的水平则影响进入体内循环部分产品的代谢动力学特征，并保证药品进入人体内的安全性。
4、随着葡萄糖聚合物中1，6-连接产物的增加，容易在其体内蓄积而造成伤害，因此美国fda批准的艾考葡萄糖聚合物的说明书的“描述项”明确指出支链1，6-连接物不得超过10％。美国专利us6077836中公开了一种艾考葡萄糖聚合物的制备方法，其所用原
5、专利cn106397616b公开了一种制备艾考糊精的方法，所制备的艾考糊精重均分子量和数均分子量均符合要求，分子量分布范围更窄，更集中，且α-1，6糖苷键的比例也严格符合产品要求，但其制备产品收率还是不够高。
6、因而，需要设计一种新的合成方法以合成出具有高度可控支化程度的艾考糊精原料药，以保证临床用药的安全性，且生产收率得到进一步提升，以减低生产成本。
技术实现思路
1、本专利技术目的在于，针对现有技术的缺陷，提供了一种艾考糊精及其制备方法。通过对制备工艺流程及工艺参数严格控制，显著提高了艾考糊精的生产收率，收率达到80％以上。通过采用两种脱支酶普鲁兰酶和异淀粉酶进行组合，并控制两者用量比例，在降低了脱支酶用量的同时还显著降低了产品的支化度，并保证产品的分子量及其分布达到药品质量标准的要求，特别对小分子量部分占比的控制效果更优，有利于进一步提升产品质量，保证临床用药安全性。
2、为实现本专利技术目的，采用以下技术方案：
3、本专利技术的一个目的是提供一种艾考糊精的制备方法，包括如下步骤：
4、(1)将一定量的淀粉加入到水中，配置为底物浓度为30％-40％的溶液，高温加热搅拌糊化后，冷却至45℃～55℃，加入脱支酶，其用量为每克干淀粉加入脱支酶1-5u，酶解反应1-3小时后，使酶灭活，得到脱支酶解液；
5、(2)将脱支酶解液冷却至65℃～75℃，加入α-淀粉酶，其用量为每克干淀粉加入α-淀粉酶1-6u，酶解反应1-2小时，使酶灭活，得到淀粉酶解液；
6、(3)将淀粉酶解液降温至50℃-60℃，加入活性炭，脱色，过滤，得滤液；
7、(4)将滤液用乙醇溶液醇沉，静置，离心分离，得沉淀物；
8、(5)将沉淀物配成水溶液，进行超滤，分子量检测合格后停止超滤，重均分子量为13000～19000da，数量平均分子量为5000～6500da，得超滤液；
9、(6)将超滤液喷雾干燥，即得艾考糊精。
10、步骤(1)中，所述糊化的温度是95℃～100℃，糊化的时间是15-25分钟。
11、步骤(1)中，所述脱支酶为普鲁兰酶和异淀粉酶的组合，普鲁兰酶和异淀粉酶的用量比例为2：1-3：1。
12、步骤(1)中，所述酶灭活的条件是加热至97℃-100℃，并保持6-9分钟，使酶灭活。
13、步骤(2)中，所述酶灭活的条件是调节ph值至2.0～3.0，并保持7-9分钟，使酶灭活。
14、步骤(3)中，所述活性炭的加入量为占淀粉重量3％-5％。
15、步骤(3)中，所述脱色时间为0.5-1.5小时。
16、步骤(4)中，所述乙醇溶液的体积分数是80％-95％。
17、步骤(5)中，所述超滤是分别用孔径100kda和5kda超滤膜进行超滤。
18、步骤(5)中，所述超滤的压力为360kpa-450kpa。
19、步骤(6)中，所述喷雾干燥的条件是进料温度为70-79℃，出风温度为100-105℃，进风温度为170-180℃。
20、本专利技术的另一个目的是提供上述艾考糊精制备方法所制得的艾考糊精。
21、与现有专利技术相比，本专利技术的有益效果如下：
22、1)本专利技术酶解前先对淀粉液进行糊化，冷却至合适温度下，首先加入脱支酶进行酶解反应，酶解结束高热使酶灭活，再冷却至合适温度下，加入α-淀粉酶进行酶解，活性炭脱色，醇沉，超滤，喷雾干燥，得艾考糊精，通过工艺流程及工艺参数控制，如优化超滤工艺，更有效的进行分子量筛选等，最终显著提高了艾考糊精的产品质量及生产收率，收率达到80％以上。
23、2)脱支酶普鲁兰酶和异淀粉酶的酶解作用范围不同。普鲁兰酶作用底物是普鲁兰和β-极限糊精，也能作用于支链淀粉，但对糖原的作用极弱。而异淀粉酶是切断支链淀粉、糖原及某些分支糊精的α-1,6糖苷键的酶，对普鲁兰则完全没有作用。本专利技术通过两种脱支酶普鲁兰酶和异淀粉酶进行组合使用，并将两者的用量比例控制在2：1-3：1，扩大了酶解的作用范围，从而降低了脱支酶用量，其用量为每克干淀粉加入脱支酶1-5u，同时还显著减低了支化度，α-1,6糖苷键比例均低于4.0％，明显低于药品质量标准中要求的10％。同时还保证在下一步加入α-淀粉酶进行酶解反应时，可以有效控制产物的分子量及其分布满足后续制备艾考糊精能达到药品质量标准的要求，特别是对分子量分布中低分子量部分占比的控制更优，如小于1638部分占比更低，低于3.7％，明显低于质量标准中要求的低于6％，这样可以保证产品质量以及产品在长期放置过程中的质量稳定性。特别注意，由于脱支酶用量低，需要尤其控制好两种脱支酶的用量比例，才能实现较好的支化度水平。
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1.一种艾考糊精的制备方法，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的艾考糊精的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述糊化的温度是95℃～100℃，糊化的时间是15-25分钟。
3.根据权利要求1所述的艾考糊精的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述脱支酶为普鲁兰酶和异淀粉酶的组合，普鲁兰酶和异淀粉酶的酶活力比为2：1-3：1。
4.根据权利要求1所述的艾考糊精的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述酶灭活的条件是加热至97℃-100℃，并保持6-9分钟，使酶灭活。
5.根据权利要求1所述的艾考糊精的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述酶灭活的条件是调节pH值至2.0～3.0，并保持7-9分钟，使酶灭活。
6.根据权利要求1所述的艾考糊精的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，所述活性炭的加入量为淀粉重量的3％-5％，所述脱色的时间为0.5-1.5小时。
7.根据权利要求1所述的艾考糊精的制备方法，其特征在于，步骤(4)中，所述乙醇溶液的体积分数是80％-95％。
8.根据权利要求1所述的艾
9.根据权利要求1所述的艾考糊精的制备方法，其特征在于，步骤(6)中，所述喷雾干燥的条件是进料温度为70-79℃，出风温度为100-105℃，进风温度为170-180℃。
10.根据权利要求1-9任一项所述的艾考糊精制备方法所制得的艾考糊精。
...【技术特征摘要】
1.一种艾考糊精的制备方法，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的艾考糊精的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述糊化的温度是95℃～100℃，糊化的时间是15-25分钟。
3.根据权利要求1所述的艾考糊精的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述脱支酶为普鲁兰酶和异淀粉酶的组合，普鲁兰酶和异淀粉酶的酶活力比为2：1-3：1。
4.根据权利要求1所述的艾考糊精的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述酶灭活的条件是加热至97℃-100℃，并保持6-9分钟，使酶灭活。
5.根据权利要求1所述的艾考糊精的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述酶灭活的条件是调节ph值至2.0～3.0，并保持7-9分钟，使酶灭活。
6.根据权利要求1所述...
【专利技术属性】
技术研发人员：孙立杰，魏赛丽，魏文亮，刘杰，印杰，仝巧林，
申请(专利权)人：石家庄四药有限公司，
类型：发明
国别省市：
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