帕立骨化醇的纯化方法技术

本发明专利技术涉及帕立骨化醇提纯技术领域，且公开了一种帕立骨化醇的纯化方法，先将帕立骨化醇粗品经硅胶柱色谱初步分离，得到帕立骨化醇含量高的组分，再经过高速逆流色谱分离，以乙酸乙酯

【技术实现步骤摘要】
帕立骨化醇的纯化方法


[0001]本专利技术涉及帕立骨化醇提纯
，具体为一种帕立骨化醇的纯化方法。

技术介绍

[0002]帕立骨化醇含有多种构型的异构体存在，其合成中间体片段会产生差向异构化，从而产生大量杂质。现有技术主要采用HPLC法来分离异构体和纯化最终化合物，但由于帕立骨化醇极性大，且反应产物中的异构体杂质的结构与帕立骨化醇的结构高度相似，而在使用HPLC进行纯化时难以有效去除结构高度相似的杂质。

技术实现思路

[0003]（一）解决的技术问题针对现有技术的不足，本专利技术旨在提供一种快速有效的帕立骨化醇的纯化方法。
[0004]（二）技术方案为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种帕立骨化醇的纯化方法，包括以下步骤：步骤S1，先将帕立骨化醇粗品经硅胶柱色谱初步分离，得到帕立骨化醇含量高的组分C1；步骤S2，将步骤S1制备的组分C1经过高速逆流色谱分离，以乙酸乙酯
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异丙醇
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水
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乙酸为两相溶剂系统，上相为固定相，下相为流动相，在检测波长254nm下，从样品中检测分离出纯化的目标产物帕立骨化醇；步骤S3，将步骤S2中纯化的帕立骨化醇在进一步重结晶，干燥，得到帕立骨化醇。
[0005]优选的，所述步骤S1，硅胶柱色谱以石油醚
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乙酸乙酯进行梯度洗脱，经HPLC检测合并相同馏分，经薄层色谱(TLC)显色反应和HPLC检测，将其冷冻干燥，得到组分C1。
[0006]优选的，所述步骤S2，乙酸乙酯
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异丙醇
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水
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乙酸两相溶剂系统的体积比为：5
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10：1
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2：5
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10：0.5
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1。
[0007]优选的，所述步骤S2，高速逆流色谱的检测波长为254nm。
[0008]优选的，所述步骤S3帕立骨化醇在异丙醇/水的混合溶液中进一步重结晶，干燥，得到帕立骨化醇。
[0009]（三）有益的技术效果与现有技术相比，本专利技术具备以下有益的技术效果：本专利技术：先将帕立骨化醇粗品经硅胶柱色谱初步分离，得到帕立骨化醇含量高的组分，再经过高速逆流色谱分离，以乙酸乙酯
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异丙醇
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水
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乙酸为两相溶剂系统，上相为固定相，下相为流动相，在检测波长254nm下，从样品中检测分离出纯化的目标产物帕立骨化醇，将该纯化的目标产物帕立骨化醇在异丙醇/水的混合溶液中进一步重结晶，干燥，得到帕立骨化醇，经高效液相色谱(HPLC)检测其纯度达到了95.8
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99.3%，并且杂质化合物P3
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1、杂质化合物P3
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2、杂质化合物P3
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3，均未检出。
附图说明
[0010]图1为化合物P1的化学结构式；图2为化合物P2的化学结构式；图3为化合物P3的化学结构式；图4为杂质化合物P3
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1的化学结构式；图5为杂质化合物P3
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2的化学结构式；图6为杂质化合物P3
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3的化学结构式；其中，R1为OTBS，R2为OTBS，TBS为叔丁基二甲基硅烷；R3为OTMS，TMS为三甲基硅基团。
具体实施方式
[0011]实施例1：帕立骨化醇的纯化方法，包括以下步骤：步骤S1，将制备得到的10g帕立骨化醇粗品经硅胶柱色谱初步分离，具体包括：以石油醚
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乙酸乙酯(60:1，40:1，20:1，10:1，3:1)进行梯度洗脱，经HPLC检测合并相同馏分，经薄层色谱(TLC)显色反应和HPLC检测，将其冷冻干燥，得到组分C1;步骤S2，将步骤S1制备的组分C1经高速逆流色谱进行分离，具体步骤包括：配制1000mL的乙酸乙酯
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异丙醇
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水
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乙酸(体积比5:1:5:0.5)溶剂，置于分液漏斗中，剧烈振荡使其充分混合后静置分层，平衡后将上下两相分开，上相为固定相，下相为流动相，分别超声脱气30min，得到两相溶剂体系TPSS；称取150mg组分C1，加入上下相各5mL，振荡使其完全溶解，得到C1样品；取2mg组分C1置于10mL试管中，加入上下相各2mL，剧烈振荡1min，使样品充分溶解，静置分层，取上下相各5μL，用HPLC分别进行检测，上相峰面积为A1，下相峰面积为A2，分配系数K
D
=A1/A2；将两相溶剂体系TPSS中已超声脱气的上相以20mL/min的流速泵入高速逆流色谱仪的分离管中，待上相充满整个分离管后，调节主机转速达800r/min，顺时针旋转，待转速稳定后，以2mL/min流速泵入下相，检测波长为254nm，当流动相从主机口流出时，说明体系已达到流体动力学平衡，此时将已准备好的10mLC1样品注入高速逆流色谱仪，同时开始采集数据，根据逆流色谱收集得到64mg纯化的目标产物帕立骨化醇；步骤S3，将步骤S2中纯化的帕立骨化醇在异丙醇/水(体积比5:1)的混合溶液中进一步重结晶，干燥，得到帕立骨化醇；步骤S4，采用高效液相色谱(HPLC)检测步骤S3中制备的帕立骨化醇的纯度，其纯度为99.3%，并且杂质化合物P3
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1、杂质化合物P3
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2、杂质化合物P3
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3，均未检出；实施例2：帕立骨化醇的纯化方法，包括以下步骤：步骤S1，将制备得到的10g帕立骨化醇粗品经硅胶柱色谱初步分离，具体包括：以石油醚
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乙酸乙酯(100:1，60:1，10:1，5:1，3:1)进行梯度洗脱，经HPLC检测合并相同馏分，经薄层色谱(TLC)显色反应和HPLC检测，将其冷冻干燥，得到组分C1;步骤S2，将步骤S1制备的组分C1经高速逆流色谱进行分离，具体步骤包括：
配制1000mL的乙酸乙酯
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异丙醇
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水
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乙酸(体积比10:2:5:1)溶剂，置于分液漏斗中，剧烈振荡使其充分混合后静置分层，平衡后将上下两相分开，上相为固定相，下相为流动相，分别超声脱气30min，得到两相溶剂体系TPSS；称取150mg组分C1，加入上下相各10mL，振荡使其完全溶解，得到C1样品；取2mg组分C1置于10mL试管中，加入上下相各5mL，剧烈振荡2min，使样品充分溶解，静置分层，取上下相各5μL，用HPLC分别进行检测，上相峰面积为A1，下相峰面积为A2，分配系数K
D
=A1/A2；将两相溶剂体系TPSS中已超声脱气的上相以50mL/min的流速泵入高速逆流色谱仪的分离管中，待上相充满整个分离管后，调节主机转速达600r/min，顺时针旋转，待转速稳定后，以5mL/min流速泵入下相，检测波长为254nm，当流动相从主机口流出时，说明体系已达到流体动力学平衡，此时将已准备好的10mLC1样品注入高速逆流色谱仪，同时开始采集数据，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种帕立骨化醇的纯化方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤S1，先将帕立骨化醇粗品经硅胶柱色谱初步分离，得到帕立骨化醇含量高的组分C1；步骤S2，将步骤S1制备的组分C1经过高速逆流色谱分离，以乙酸乙酯
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异丙醇
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水
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乙酸为两相溶剂系统，上相为固定相，下相为流动相，在检测波长254nm下，从样品中检测分离出纯化的目标产物帕立骨化醇；步骤S3，将步骤S2中纯化的帕立骨化醇在进一步重结晶，干燥，得到帕立骨化醇。2.根据权利要求1所述的一种帕立骨化醇的纯化方法，其特征在于：所述步骤S1，硅胶柱色谱以石油醚
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乙酸乙酯进行梯度洗脱，经HPLC检测合并相同馏分，经薄层色谱(TLC...

【专利技术属性】
技术研发人员：臧云龙，孙桂玉，陈阳生，刘晓霞，王明刚，杜昌余，刘振玉，王清亭，朱锐，吕义强，
申请(专利权)人：正大制药青岛有限公司，
类型：发明
国别省市：