白介素-2制剂及其用途制造技术

公开了包含IL

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】白介素
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2制剂及其用途
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求2019年7月26日提交的美国临时申请号62/879,137和2020年2月28日提交的美国临时申请号62/983,061的权益。上述申请的内容通过引用的方式全文纳入本文。
[0003]序列表
[0004]本申请包含序列表，该序列表已经以ASCII格式电子提交，并且其全部内容通过引用并入本文。在2020年7月20日创建的所述ASCII拷贝被命名为P2029
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7028WO_SL.txt，大小为1,728,528字节。

技术介绍

[0005]白介素2(IL
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2)是一种调节免疫系统活动的细胞因子。它由白细胞(如T细胞、自然杀伤(NK)细胞、树突细胞和巨噬细胞)响应抗原或有丝分裂刺激而产生。IL
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2对T细胞增殖、B细胞刺激和与免疫和耐受相关的其它活动很重要。它是身体适应性免疫反应的一部分，可以区分外来抗原和宿主抗原。IL
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2通过与IL
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2受体结合来介导其作用，从而活化下游信号转导事件。
[0006]人IL
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2是FDA批准的用于治疗转移性肾癌和黑色素瘤等疾病的药物。归因于与IL
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2治疗相关的严重毒性，在符合条件的患者中使用IL
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2有时会受限，并且只有一小部分符合条件的患者能真正接受治疗。与IL
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2治疗相关的毒性可能包括严重发烧、恶心、呕吐、血管渗漏和严重的低血压。然而，尽管有这些毒性，IL
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2通常对其批准的适应症有效。
[0007]对于患有适合用IL
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2治疗的各种疾病和病症的患者，仍然需要具有足以开发安全有效治疗剂的特征的新型的基于IL
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2的药物。

技术实现思路

[0008]本公开至少部分地提供了IL
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2制剂(例如，IL
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2变体、IL
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2融合蛋白、IL
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2复合物和IL
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2偶联物)，其包含IL
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2中的一个或多个氨基酸变化(例如，取代)，并且包含本文公开的一种或多种结构或功能性质。在一个实施方式中，还提供了编码所述IL
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2制剂的核酸分子、表达载体、宿主细胞、组合物(例如药物组合物)、试剂盒、容器和制备所述IL
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2制剂的方法。本文公开的IL
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2制剂可用于(单独或与其它制剂或治疗方式组合)治疗、预防和/或诊断疾病，例如本文公开的疾病和病症。
[0009]本公开至少部分基于以下发现：使蛋白质稳定、降低其对CD122(例如CD122/CD132异二聚体)的亲和性和/或使其对CD25的亲和性降低或不多于最小作用的IL
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2中突变的组合，可用于通过IL
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2通路选择性地增强调节性T细胞(Treg)活性，从而在治疗疾病和病症(例如自身免疫性疾病)方面取得有利的治疗作用。包含此类突变的IL
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2制剂适用于治疗由异常免疫反应引起的病症，例如自身免疫疾病。
[0010]因此，在一些方面，本公开提供了一种IL
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2制剂，例如，具有以下性质a)
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x)中的一项或多项(例如，1，2，3，4，5，6，7，8，9，10，11，12，13，14，15，16，17，18，19，20，21，22，23，或
全部)的IL
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2制剂：
[0011]a)在体外和/或体内以更高或增加的水平表达，例如增加约1％，约2％，约3％，约4％，约5％，约10％，约15％，约20％，约25％，约30％，约35％，约40％，约45％，约50％，约55％，约60％，约65％，约70％，约75％，约80％，约85％，约90％，约95％，约100％，或更多，或增加约0.5倍，约1倍，约1.5倍，约2倍，约2.5倍，约3倍，约3.5倍，约4倍，约4.5倍，约5倍，约5.5倍，约6倍，约6.5倍，约7倍，约7.5倍，约8倍，约8.5倍，约9倍，约9.5倍，约10倍，或更多，例如，相对于包含野生型IL
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2的IL
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2制剂或包含参考IL
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2变体的IL
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2制剂，例如通过蛋白质浓度测定；
[0012]b)在体外和/或体内以较低或降低的水平聚集，例如降低约1％，约2％，约3％，约4％，约5％，约10％，约15％，约20％，约25％，约30％，约35％，约40％，约45％，约50％，约55％，约60％，约65％，约70％，约75％，约80％，约85％，约90％，约95％，约100％，或更多，或降低约0.5倍，约1倍，约1.5倍，约2倍，约2.5倍，约3倍，约3.5倍，约4倍，约4.5倍，约5倍，约5.5倍，约6倍，约6.5倍，约7倍，约7.5倍，约8倍，约8.5倍，约9倍，约9.5倍，约10倍，或更多，例如，相对于包含野生型IL
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2的IL
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2制剂或包含参考IL
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2变体的IL
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2制剂，例如通过解链温度分析(例如，使用荧光测定法)、动态光散射和/或尺寸排阻色谱法测定；
[0013]c)在体外和/或体内具有增强或增加的稳定性，例如增加约1％，约2％，约3％，约4％，约5％，约10％，约15％，约20％，约25％，约30％，约35％，约40％，约45％，约50％，约55％，约60％，约65％，约70％，约75％，约80％，约85％，约90％，约95％，约100％，或更多，或增加约0.5倍，约1倍，约1.5倍，约2倍，约2.5倍，约3倍，约3.5倍，约4倍，约4.5倍，约5倍，约5.5倍，约6倍，约6.5倍，约7倍，约7.5倍，约8倍，约8.5倍，约9倍，约9.5倍，约10倍，或更多，例如，相对于包含野生型IL
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2的IL
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2制剂或包含参考IL
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2变体的IL
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2制剂，例如通过酵母表面展示中的表达、哺乳动物细胞中的表达、色谱法、圆二色性测定或相关的光谱技术和/或解链温度分析(例如，使用荧光法)；
[0014]d)在体外和/或体内具有增强或增加的半衰期，例如增加约1％，约2％，约3％，约4％，约5％，约10％，约15％，约20％，约25％，约30％，约35％，约40％，约45％，约50％，约55％，约60％，约65％，约70％，约75％，约80％，约85％，约90％，约95％，约100％，或更多，或大于约0.5倍，约1倍，约1.5倍，约2倍，约2.5倍，约3倍，约3.5倍，约4倍，约4.5倍，约5倍，约5.5倍，约6倍，约6.5倍，约7倍，约7.5倍，约8倍，约8.5倍，约9倍，约9.5倍，约10倍，或更多，例如，相本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种白介素2(IL
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2)变体，包括：(i)氨基酸取代H16L或H16N，和/或氨基酸取代I92S，和(ii)氨基酸取代V69A、Q74P和C125S，对应于人IL
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2(SEQ ID NO:1031)。2.如权利要求1所述的IL
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2变体，其还包含氨基酸取代T3A。3.如权利要求1或2所述的IL
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2变体，其包含SEQ ID NO:4、5、11、1000、1001或1002中任一个的氨基酸序列，与其具有至少95％同一性的氨基酸序列或与其相差不多于1、2、3、4或5个氨基酸的氨基酸序列，或其功能性片段。4.如权利要求1
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3中任一项所述的IL
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2变体，其选择性地刺激调节性T细胞(Treg)。5.一种IL
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2融合蛋白，其包含如权利要求1
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4中任一项所述的IL
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2变体。6.如权利要求5所述的IL
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2融合蛋白，其还包含Fc区。7.如权利要求6所述的IL
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2融合蛋白，其中所述Fc区包含IgG1同种异型m3的Fc区，其包含根据EU编号法的N297G取代。8.如权利要求6或7所述的IL
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2融合蛋白，其中所述Fc区包含SEQ ID NO:1003的氨基酸序列，或与其具有至少95％的同一性的氨基酸序列，或与其相差不多于1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个氨基酸的氨基酸序列，或其功能性片段。9.如权利要求6
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8中任一项所述的IL
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2融合蛋白，其中所述Fc区与所述IL
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2变体的C端融合。10.如权利要求6
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9中任一项所述的IL
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2融合蛋白，其还包含接头。11.如权利要求10所述的IL
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2融合蛋白，其中所述接头包含(G4S)4(SEQ ID NO:48)。12.如权利要求6
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11中任一项所述的IL
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2融合蛋白，其包含SEQ ID NO:1004、1005、1006、1007、1008或1009中任一项的氨基酸序列，与其具有至少95％同一性的氨基酸序列，或与其相差不多于1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个氨基酸的氨基酸序列，或其功能性片段。13.如权利要求6
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12中任一项所述的IL
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2融合蛋白，其形成二聚体。14.一种IL
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2复合物，其包含如权利要求1
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4中任一项所述的IL
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2变体和抗IL
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2抗体分子。15.一种IL
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2偶联物，其包含如权利要求1
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4中任一项所述的IL
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2变体和非IL
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2部分。16.一种药物组合物，包含如权利要求1
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4中任一项所述的IL
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2变体和药学上可接受的运载体。17.一种药物组合物，其包含如权利要求5
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13中任一项所述的IL
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2融合蛋白和药学上可接受的运载体。18.一种药物组合物，其包含如权利要求14所述的IL
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2复合物和药学上可接受的运载体。19.一种药物组合物，其包含如权利要求15所述的IL
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2偶联物和药学上可接受的运载体。20.一种核酸，其编码如权利要求1
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4中任一项所述的IL
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2变体。21.一种核酸，其编码如权利要求5
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13中任一项所述的IL
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2融合蛋白。22.一种核酸，其编码如权利要求14所述的IL
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2复合物。23.一种核酸，其编码如权利要求15所述的IL
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2偶联物。
24.一种载体，其包含如权利要求20所述的核酸。25.一种载体，其包含如权利要求21所述的核酸。26.一种载体，其包含如权利要求22所述的核酸。27.一种载体，其包含如权利要求23所述的核酸。28.一种细胞，其包含如权利要求20所述的核酸。29.一种细胞，其包含如权利要求21所述的核酸。30.一种细胞，其包含如权利要求22所述的核酸。31.一种细胞，其包含如权利要求23所述的核酸。32.一种产生IL
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2变体的方法，其包括在允许IL
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2变体表达的条件下培养权利要求28所述的细胞。33.一种产生IL
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2融合蛋白的方法，其包括在允许IL
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2融合蛋白表达的条件下培养权利要求29所述的细胞。34.一种产生IL
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2复合物的方法，其包括在允许IL
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2复合物表达的条件下培养权利要求30所述的细胞。35.一种产生IL
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2偶联物的方法，其包括在允许IL
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2偶联物表达的条件下培养权利要求31所述的细胞。36.一种增强调节性T细胞(Treg)扩增、活性、存活和/或增殖的方法，其包括使Treg细胞或Treg细胞群在体外、离体或体内接触如权利要求1
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4中任一项所述的IL
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2变体，或给予有此需要的对象有效量的如权利要求1
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4中任一项所述的IL
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2变体。37.一种增强调节性T细胞(Treg)扩增、活性、存活和/或增殖的方法，其包括使Treg细胞或Treg细胞群在体外、离体或体内接触如权利要求5
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13中任一项所述的IL
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2融合蛋白，或给予有此需要的对象有效量的如权利要求5
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13中任一项所述的IL
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2融合蛋白。38.一种增强调节性T细胞(Treg)扩增、活性、存活和/或增殖的方法，其包括使Treg细胞或Treg细胞群在体外、离体或体内接触如权利要求14所述的IL
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2复合物，或给予有此需要的对象有效量的如权利要求14所述的IL
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2复合物。39.一种增强调节性T细胞(Treg)扩增、活性、存活和/或增殖的方法，其包括使Treg细胞或Treg细胞群在体外、离体或体内接触如权利要求15所述的IL
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2偶联物，或给予有此需要的对象有效量的如权利要求15所述的IL
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2偶联物。40.一种选择性活化调节性T细胞(Treg)中的IL
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2信号转导通路的方法，其包括使Treg细胞或Treg细胞群在体外、离体或体内接触如权利要求1
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4中任一项所述的IL
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2变体，或给予有此需要的对象有效量的权利要求1
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4中任一项所述的IL
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2变体。41.一种选择性活化调节性T细胞(Treg)中的IL
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2信号转导通路的方法，其包括使Treg细胞或Treg细胞群在体外、离体或体内接触如权利要求5
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13中任一项所述的IL
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2融合蛋白，或给予有此...

【专利技术属性】
技术研发人员：S，
申请(专利权)人：威特拉公司，
类型：发明
国别省市：