白介素-2突变体及其用途制造技术

公开了包含IL

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】白介素
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2突变体及其用途
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求2021年1月20日提交的美国临时申请号63/139,736和2021年11月19日提交的美国临时申请号63/281，397的权益。上述申请的内容通过引用的方式全文纳入本文。
[0003]序列表
[0004]本申请包含以ASCII格式电子提交的序列表并通过引用其全部内容纳入本文。在2022年1月14日创建的所述ASCII拷贝命名为P2029
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7043WO_SL.txt，大小为1,728,525字节。

技术介绍

[0005]白介素2(IL
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2)是一种调节免疫系统活动的细胞因子。它由白细胞(如T细胞、自然杀伤(NK)细胞、树突细胞和巨噬细胞)响应抗原或有丝分裂刺激而产生。IL
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2对T细胞增殖、B细胞刺激和与免疫和耐受相关的其它活动很重要。它是身体适应性免疫反应的一部分，可以区分外来抗原和宿主抗原。IL
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2通过与IL
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2受体结合来介导其作用，从而活化下游信号转导事件。
[0006]人IL
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2是FDA批准的用于治疗转移性肾癌和黑色素瘤等疾病的药物。归因于与IL
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2治疗相关的严重毒性，在符合条件的患者中使用IL
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2有时会受限，并且只有一小部分符合条件的患者能真正接受治疗。与IL
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2治疗相关的毒性可能包括严重发烧、恶心、呕吐、血管渗漏和严重的低血压。然而，尽管有这些毒性，IL
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2通常对其批准的适应症有效。
[0007]对于患有适合用IL
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2治疗的各种疾病和病症的患者，仍然需要具有足以开发安全有效治疗剂的特征的新型的基于IL
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2的药物。

技术实现思路

[0008]本公开至少部分地提供了IL
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2制剂(例如，IL
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2变体、IL
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2融合蛋白、IL
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2复合物和IL
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2偶联物)，其包含IL
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2中的一个或多个氨基酸变化(例如，取代)，并且包含本文公开的一种或多种结构或功能性质。在一个实施方式中，还提供了编码所述IL
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2制剂的核酸分子、表达载体、宿主细胞、组合物(例如药物组合物)、试剂盒、容器和制备所述IL
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2制剂的方法。本文公开的IL
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2制剂可用于(单独或与其它制剂或治疗方式组合)治疗、预防和/或诊断疾病，例如本文公开的疾病和病症。
[0009]在一个方面中，本公开的特征是治疗疾病的方法，包括向需要的对象给予有效量的本文所述的IL
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2制剂，使得来自对象的Treg细胞中磷酸
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STAT5(p
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STAT5)信号转导的水平增加，从而治疗所述疾病。
[0010]在一个实施方式中，Treg细胞中p
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STAT5信号转导的水平增加至少2、3、4、5、6、7、8、9或10倍。
[0011]在一个实施方式中，来自对象的NK细胞和/或细胞毒性T细胞中p
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STAT5信号转导的水平没有显著增加。在一个实施方式中，NK细胞和/或细胞毒性T细胞中p
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STAT5信号转导
的水平增加不超过50％、40％、30％、20％或10％。
[0012]在一个实施方式中，所述疾病是本文所述的疾病，或所述对象具有本文所述的疾病。在一个实施方式中，所述疾病是狼疮性肾炎，或所述对象具有狼疮性肾炎。在一个实施方式中，所述疾病是银屑病，或所述对象具有银屑病。在一个实施方式中，所述疾病是自身免疫疾病，或所述对象具有自身免疫疾病，例如，本文所述的自身免疫疾病。在一个实施方式中，所述疾病是以下疾病，或所述对象具有以下疾病：系统性红斑狼疮(SLE)、自身免疫性肝炎(AIH)、免疫相关的局灶节段性肾小球硬化(IM
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FSGS)或斑秃(AA)。
[0013]在一个实施方式中，该方法还包括确定来自对象的免疫细胞中(例如，Treg细胞，NK细胞和/或细胞毒性T细胞)p
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STAT5信号转导水平。在一个实施方式中，该方法还包括从对象分离血细胞(例如，PBMC)。
[0014]在一个实施方式中，在接触或给药步骤之前、期间和/或之后进行确定步骤。在一个实施方式中，使用基于流式细胞术的p
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STAT5测定(例如，实施例13所述)来确定p
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STAT5信号转导水平。
[0015]在一个实施方式中，IL
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2制剂包含IL
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2变体，其中所述IL
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2变体包含：对应于人IL
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2(SEQ ID NO：1031)：(i)氨基酸取代H16L或H16N，和/或氨基酸取代I92S，和(ii)氨基酸取代V69A、Q74P和C125S。在一个实施方式中，IL
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2变体包含氨基酸取代T3A。在一个实施方式中，IL
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2变体包含SEQ ID NO：4、5、11、1000、1001或1002中任一个的氨基酸序列，与其具有至少95％同一性的氨基酸序列或与其相差不多于1、2、3、4或5个氨基酸的氨基酸序列，或其功能性片段。
[0016]在一个实施方式中，IL
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2制剂包含IL
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2融合蛋白，其包含IL
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2变体。在一个实施方式中，IL
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2融合蛋白还包含Fc区。在一个实施方式中，Fc区包含IgG1同种异型m3的Fc区，其包含根据EU编号的N297G取代。如一个实施方式中，IL
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2融合蛋白包含SEQ ID NO：1003的氨基酸序列，或与其具有至少95％的同一性的氨基酸序列，或与其相差不多于1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个氨基酸的氨基酸序列，或其功能性片段。在一个实施方式中，Fc区与IL
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2变体的C
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末端融合。在一个实施方式中，IL
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2融合蛋白还包含接头。在一个实施方式中，接头包括(G4S)4(SEQ ID NO：48)。如一个实施方式中，融合蛋白包含SEQ ID NO：1004、1005、1006、1007、1008或1009中任一的氨基酸序列，与其具有至少95％同一性的氨基酸序列，或与其相差不多于1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个氨基酸的氨基酸序列，或其功能性片段。在一个实施方式中，融合蛋白形成二聚体。
[0017]在一个方面，本公开的特征在于一种增加p
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STAT5信号转导的方法，包括使来自具有疾病的对象的Treg细胞与足以使所述Treg细胞中p
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ST本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种IL
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2制剂，用于选择性增加p
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STAT5信号转导的方法，其中来自对象的Treg细胞的p
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STAT5信号转导水平增加，并且来自对象的NK细胞和/或细胞毒性T细胞的p
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STAT5信号转导水平没有显著增加，其中所述IL
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2制剂是IL
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2变体或包含IL
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2变体的IL
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2融合蛋白，并且其中所述IL
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2变体包含：(i)氨基酸取代H16L或H16N，和/或氨基酸取代I92S，和(ii)氨基酸取代V69A、Q74P和C125S，其对应于人IL
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2(SEQ ID NO：1031)。2.一种增加p
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STAT5信号转导的方法，包括：将来自患有疾病的对象的Treg与有效量的IL
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2制剂接触，与p
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STAT5信号转导的参考水平相比，所述量足以增加Treg细胞中p
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STAT5信号转导的水平，其中参考量是来自没有患有所述疾病的对象的Treg细胞中p
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STAT5信号转导的水平，并且其中来自没有患有所述疾病的对象的Treg细胞已与相同量的IL
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2制剂接触，并且其中所述IL
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2制剂是IL
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2变体或包含IL
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2变体的IL
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2融合蛋白，并且其中所述IL
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2变体包含：(i)氨基酸取代H16L或H16N，和/或氨基酸取代I92S，和(ii)氨基酸取代V69A、Q74P和C125S，其对应于人IL
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2(SEQ ID NO：1031)，从而增加p
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STAT5信号转导。3.一种IL
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2制剂，用于治疗对象中疾病的方法，其中来自对象的Treg细胞的磷酸
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STAT5(p
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STAT5)信号转导水平增加，其中所述IL
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2制剂是IL
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2变体或包含IL
‑
2变体的IL
‑
2融合蛋白，并且其中所述IL
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2变体包含：(i)氨基酸取代H16L或H16N，和/或氨基酸取代I92S，和(ii)氨基酸取代V69A、Q74P和C125S，其对应于人IL
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2(SEQ ID NO：1031)。4.如权利要求3所述用途的IL
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2制剂，其中来自对象的NK细胞和/或细胞毒性T细胞中p
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STAT5信号转导的水平没有显著增加。5.如权利要求1或3
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4中任一项所述用途的IL
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2制剂或如权利要求3所述的方法，其中Treg细胞中p
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STAT5信号转导的水平增加至少2、3、4、5、6、7、8、9或10倍。6.如权利要求1或3
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5中任一项所述用途的IL
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2制剂，其中NK细胞和/或细胞毒性T细胞中p
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STAT5信号转导的水平增加不超过50％、40％、30％、20％或10％。7.如权利要求1或3
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6中任一项所述用途的IL
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2制剂或如权利要求2或5所述的方法，其中所述疾病是狼疮性肾炎或所述对象具有狼疮性肾炎。8.如权利要求1或3
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6中任一项所述用途的IL
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2制剂或如权利要求2或5
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6所述的方法，其中所述疾病是银屑病或所述对象具有银屑病。9.如权利要求1或3
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6中任一项所述用途的IL
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2制剂或如权利要求2或5
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6所述的方法，其中所述疾病是自身免疫疾病或所述对象具有自身免疫疾病。10.如权利要求1或3
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6中任一项所述用途的IL
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2制剂或如权利要求2或5
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6所述的方法，其中所述疾病是以下疾病，或对象具有以下疾病：系统性红斑狼疮(SLE)、自身免疫性肝
炎(AIH)、免疫相关的局灶节段性肾小球硬化(IM
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FSGS)或斑秃(AA)。11.如权利要求1或3
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10中任...

【专利技术属性】
技术研发人员：S，
申请(专利权)人：威特拉公司，
类型：发明
国别省市：