使用结合MET的抗-MET抗体和双特异性抗原结合分子治疗眼癌的方法技术

本文提供了使用结合MET的抗体和双特异性抗原结合分子或包含所述抗体或双特异性抗原结合分子的抗体

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】使用结合MET的抗
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MET抗体和双特异性抗原结合分子治疗眼癌的方法


[0001]本专利技术涉及特异性地结合肝细胞生长因子受体(c
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Met或MET)并调节MET信号转导的抗体、双特异性抗体、及其抗原结合片段、以及这样的抗体的抗体
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药物缀合物用于治疗眼癌(包括葡萄膜黑素瘤)的用途。
[0002]序列表
[0003]序列表的正式副本作为ASCII格式的序列表通过EFS
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Web与说明书并行地以电子方式提交，文件名称为10548WO01_SEQ_LIST_ST25.TXT，创建日期为2020年2月20日，且大小为约140千字节。包含在该ASCII格式文档中的序列表是说明书的一部分，并通过引用整体并入本文。

技术介绍

[0004]葡萄膜黑素瘤是成人最常见的原发性眼内恶性肿瘤，占眼黑素瘤的79
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81％。在美国的发病率估计为5人/百万人，而在欧洲的发病率为2至8人/百万人，取决于从北到南发病率下降的纬度。葡萄膜黑素瘤具有高转移倾向，从而导致差的长期预后，死亡发生在超过50％的病例中。
[0005]肝细胞生长因子(HGF)(又名散射因子[SF])是通过与HGF受体(HGFR)相互作用而发挥其活性的异源二聚体旁分泌生长因子。HGFR是c
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Met癌基因的产物，且也被称作MET。MET是由通过二硫键连接到细胞外α链的跨膜β链组成的受体酪氨酸激酶。HGF与MET的结合会激活MET的激酶催化活性，从而导致β链的Tyr 1234和Tyr 1235的磷酸化以及随后下游信号传递途径的激活。
[0006]具有MET基因扩增的肿瘤细胞系的生长和存活高度依赖于MET。用于治疗各种癌症的各种单价MET阻断抗体正在临床开发中(参见美国专利号5,686,292；5,646,036；6,099,841；7,476,724；9,260,531；和9,328,173；和美国专利申请公开号2014/0349310和2005/0233960)。那些抗体包括奥那妥组单抗(MetMab)和依玛妥珠单抗(Xiang等人,Clin.Cancer Res.19(18):5068
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78,2013,和Rosen等人,Clin.Cancer Res.,2016年10月10日公布,doi:10.1158/1078
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0432.CCR
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1418)。这些抗体中的一些会阻断配体依赖性的MET信号传递，但在阻断配体非依赖性的MET激活方面效果不佳。
[0007]葡萄膜黑素瘤肿瘤的特征在于G
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蛋白(GNAQ和GNA11)中的突变和c
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Met的高表达。在葡萄膜黑素瘤中靶向c
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Met会导致细胞侵袭和转移的抑制，但是不会遏制肿瘤生长。随着时间的推移，局部肿瘤控制和总体补救率有所提高，但存活率保持相对不变。抗体
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药物缀合物(ADC)在过去几年取得了进展，其中一些已被FDA批准使用，但迄今为止还没有开发用于葡萄膜黑素瘤。对于用于治疗眼癌(包括葡萄膜黑素瘤)的改进的抗癌药物仍然存在显着未满足的医学需求，所述药物有效地阻断配体依赖性的和配体非依赖性的MET信号传递。

技术实现思路

[0008]本文提供了治疗眼癌诸如葡萄膜黑素瘤、眼眶淋巴瘤、视网膜母细胞瘤和髓上皮瘤的方法。所述方法包括用抗体、抗体的抗原结合片段、二价单特异性抗体的组合或结合人c
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Met受体蛋白的双特异性抗体(MET x MET)进行治疗。抗
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MET抗体及其抗原结合部分可以以未修饰的形式单独使用，或者可以作为抗体
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药物缀合物(ADC)或双特异性抗体的一部分被包括在内。抗体和ADC尤其可用于靶向表达MET的肿瘤细胞，且因此可用于如本文公开的治疗眼癌的方法中。
[0009]通过阅读随后的详细描述，其它实施方案将变得显而易见。
附图说明
[0010]图1是示出本文公开的272种示例性MET x MET双特异性抗体的组分的矩阵。矩阵的每个编号单元表示包含“D1”抗原结合结构域和“D2”抗原结合结构域的独特双特异性抗体，其中所述D1抗原结合结构域包含来自沿Y轴列出的相应抗
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MET抗体的免疫球蛋白可变结构域(HCVR/LCVR氨基酸序列对)或CDR，并且其中所述D2抗原结合结构域包含来自沿X轴列出的相应抗
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MET抗体的免疫球蛋白可变结构域(HCVR/LCVR氨基酸序列对)或CDR。
[0011]图2是基于萤光素酶的报告分子测定的示意图，所述测定用于评估在含有SRE
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萤光素酶报告基因构建体的HEK293T细胞中，抗体诱导的MET途径激活或抗体对HGF诱导的途径激活的阻断。
[0012]图3是描绘相对光度单位(RLU)的线图，其表示随着抗体浓度(log摩尔/升)而改变的SRE
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萤光素酶表达。实心正方形(
■
)代表亲本二价单特异性抗体H4H13306P2，实心金字塔(
▲
)代表亲本二价单特异性抗体H4H13312P2，实心圆形(
●
)代表单价抗体，实心菱形(
◆
)代表同种型对照，实心倒金字塔代表无配体。图3A描绘了只有抗体而不含HGF配体的情况。图3B描绘了抗体+HGF配体。
[0013]图4是描绘相对光度单位(RLU)的线图，其表示随着抗体浓度(log摩尔/升)而改变的SRE
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萤光素酶表达。实心正方形(
■
)代表抗
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MET单价抗体，实心圆形(
●
)代表MET x MET双特异性抗体，实心菱形(
◆
)代表亲本抗体H4H13312P2。图4A描绘了只有抗体而不含HGF配体的情况。图4B描绘了抗体+HGF配体。
[0014]图5是条形图，其描绘了随着用人二价单特异性抗
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MET抗体1
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18、对照抗体和抗
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MET单价抗体处理而改变的MET扩增的胃癌SNU5细胞的相对细胞生长。为了对比目的，抗体8(横坐标)是亲本抗体H4H13306P2，且抗体11(横坐标)是亲本抗体H4H13312P2。
[0015]图6含有条形图，其描绘了随着用MET x MET双特异性抗体、对照抗体和抗
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MET单价抗体处理而改变的MET扩增的细胞的相对细胞生长。图6A描绘了SNU5细胞的相对生长，其随着用对照抗体、0.1、1和10μg/mL的单价抗体和0.1、1和10μg/mL的MET x MET双特异性抗体处理而改变。图6B描绘了EBC
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1细胞的相对生长，其随着用对照抗体和0.1和1μg/mL的MET x MET双特异性抗体处理而改变。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种在受试者中治疗葡萄膜黑素瘤、减少葡萄膜黑素瘤肿瘤生长和/或引起葡萄膜黑素瘤的消退的方法，所述方法包括给有此需要的受试者施用包含双特异性抗原结合分子和细胞毒素的抗体
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药物缀合物(ADC)，其中所述双特异性抗原结合分子包含：第一抗原结合结构域(D1)；和第二抗原结合结构域(D2)；其中D1特异性地结合人MET的第一表位；并且其中D2特异性地结合人MET的第二表位。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述葡萄膜黑素瘤表达MET。3.根据权利要求1所述的方法，其中D1包含：在包含SEQ ID NO:58的氨基酸序列的重链可变区(HCVR)内的三个重链互补性决定区(HCDR1、HCDR2和HCDR3)，和在包含SEQ ID NO:138的氨基酸序列的轻链可变区(LCVR)内的三个轻链互补性决定区(LCDR1、LCDR2和LCDR3)。4.根据权利要求1所述的方法，其中D2包含：在包含SEQ ID NO:82的氨基酸序列的重链可变区(HCVR)内的三个重链互补性决定区(HCDR1、HCDR2和HCDR3)，和在包含SEQ ID NO:138的氨基酸序列的轻链可变区(LCVR)内的三个轻链互补性决定区(LCDR1、LCDR2和LCDR3)。5.根据权利要求1所述的方法，其中所述双特异性抗原结合分子包含在SEQ ID NO:58的D1
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HCVR氨基酸序列内的CDR和在SEQ ID NO:82的D2
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HCVR氨基酸序列内的CDR。6.根据权利要求1所述的方法，其中人MET的第一表位包含SEQ ID NO:155的氨基酸192
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204。7.根据权利要求1所述的方法，其中人MET的第二表位包含SEQ ID NO:155的氨基酸305
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315和421
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455。8.根据权利要求1所述的方法，其中人MET的第一表位包含SEQ ID NO:155的氨基酸192
‑
204；并且其中人MET的第二表位包含SEQ ID NO:155的氨基酸305
‑
315和421
‑
455。9.根据权利要求1所述的方法，其中所述细胞毒素选自生物毒素、化学治疗剂和放射性同位素。10.根据权利要求1所述的方法，其中所述细胞毒素选自拟美坦辛类、耳他汀类、托马霉素类、多卡米星类、
225
Ac、
227
Th、及其任何衍生物。11.根据权利要求1所述的方法，其中所述细胞毒素通过接头缀合至所述双特异性抗原结合分子，并且其中所述细胞毒素是：
其中是与接头的键。12.根据权利要求11所述的方法，其中所述接头是：其中用表示的键代表与所述双特异性抗原结合分子的键，并且用表示的键代表与所述细胞毒素的键。13.根据权利要求1所述的方法，其中所述细胞毒素通过接头缀合至所述双特异性抗原结合分子，并且其中所述细胞毒素是：其中是与所述接头的键。14.根据权利要求13所述的方法，其中所述接头是其中用表示的键代表与所述双特异性抗原结合分子的键，并且用表示的键代表与所述细胞毒素的键。15.一种抑制葡萄膜黑素瘤细胞的增殖、抑制其侵袭、引起其细胞凋亡和/或降低其存活率的方法，所述方法包括使所述细胞与包含双特异性抗原结合分子和细胞毒素的抗体
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药物缀合物(ADC)接触，其中所述双特异性抗原结合分子包含：第一抗原结合结构域(D1)；和第二抗原结合结构域(D2)；其中D1特异性地结合人MET的第一表位；并且其中D2特异性地结合人MET的第二表位。
16.根据权利要求15所述的方法，其中D1包含：在包含SEQ ID NO:58的氨基酸序列的重链可变区(HCVR)内的三个重链互补性决定区(HCDR1、HCDR2和HCDR3)，和在包含SEQ ID NO:138的氨基酸序列的轻链可变区(LCVR)内的三个轻链互补性决定区(LCDR1、LCDR2和LCDR3)。17.根据权利要求15所述的方法，其中D2包含：在包含SEQ ID NO:82的氨基酸序列的重链可变区(HCVR)内的三个重链互补性决定区(HCDR1、HCDR2和HCDR3)，和在包含SEQ ID NO:138的氨基酸序列的轻链可变区(LCVR)内的三个轻链互补性决定区(LCDR1、LCDR2和LCDR3)。18.根据权利要求15所述的方法，其中所述细胞毒素通过接头缀合至所述双特异性抗原结合分子，并且其中所述细胞毒素是：其中是与接头的键。19.根据权利要求18所述的方法，其中所述接头是：其中用表示的键代表与所述双特异性抗原结合分子的键，并且用表示的键代表与所述细胞毒素的键。20.根据权利要求15所述的方法，其中所述细胞毒素通过接头缀合至所述双特异性抗原结合分子，并且其中所述细胞毒素是：
其中是与所述接头的键。21.根据权利要求20所述的方法，其中所述接头是其中用表示的键代表与所述双特异性抗原结合分子的键，并且用表示的键代表与所述细胞毒素的键。22.一种诱导葡萄膜黑素瘤细胞的有丝分裂停止的方法，所述方法包括使体内所述细胞与包含双特异性抗原结合分子和细胞毒素的抗体
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药物缀合物(A...

【专利技术属性】
技术研发人员：G，
申请(专利权)人：瑞泽恩制药公司，
类型：发明
国别省市：