IFITM3蛋白相关物质在制备禽呼肠孤病毒所致疾病药物中的应用制造技术

本发明专利技术提高增强IFITM3蛋白的活性和/或提高IFITM3蛋白的基因的表达量和/或提高IFITM3蛋白的含量的物质的应用，所述应用为下述任一种：Y1在制备预防和/或治疗禽呼肠孤病毒所致疾病或禽呼肠孤病毒感染的药物中的应用；Y2在制备禽呼肠孤病毒抑制剂中的应用；Y3在抑制禽呼肠孤病毒复制中的应用；Y4在抑制ARVσC表达中的应用。本发明专利技术通过将编码IFITM3蛋白的基因转入鸡胚成纤维细胞(DF1)，发现了DF1细胞中过表达IFITM3后ARVσC的相对表达量极显著降低，抑制禽呼肠孤病毒病毒复制。本发明专利技术对感染禽呼肠孤病毒及类似病毒的治疗具有应用价值。肠孤病毒及类似病毒的治疗具有应用价值。肠孤病毒及类似病毒的治疗具有应用价值。

【技术实现步骤摘要】
IFITM3蛋白相关物质在制备禽呼肠孤病毒所致疾病药物中的应用


[0001]本专利技术涉及生物
，具体涉及IFITM3蛋白相关物质在制备禽呼肠孤病毒所致疾病药物中的应用。

技术介绍

[0002]禽呼肠孤病毒(Avian reovirus,ARV)属于正呼肠孤病毒科，正呼肠孤病毒属，是一种不含囊膜的双链RNA病毒。ARV是一种重要禽类免疫抑制性疾病，其对环境的抵抗力强，既可水平传播又可垂直传播，在我国鸡群中普遍存在，能够引起病毒性关节炎/腱鞘炎、矮小综合征等，尤为严重的是诱发免疫抑制，造成机体对疫苗免疫应答能力和多种病原体抵抗能力的降低，并发或继发其它疾病，给养禽业者造成了巨大的经济损失。目前还没有有效的治疗措施，主要通过疫苗接种进行有效的防治；市面上已有多种弱毒疫苗和灭活疫苗，其中应用较多的疫苗主要是S1133和VM0207这两个疫苗株。

技术实现思路

[0003]本专利技术所要解决的技术问题是如何制备预防和/或治疗禽呼肠孤病毒所致疾病或禽呼肠孤病毒感染的药物，和/或如何制备禽呼肠孤病毒抑制剂。
[0004]为了解决以上技术问题，本专利技术提供了增强IFITM3蛋白的活性和/或提高IFITM3蛋白的基因的表达量和/或提高IFITM3蛋白的含量的物质的如下应用：
[0005]U1在制备预防和/或治疗禽呼肠孤病毒所致疾病或禽呼肠孤病毒感染的药物中的应用；
[0006]U2在制备禽呼肠孤病毒抑制剂中的应用；
[0007]U3在抑制ARVσC表达中的应用；
[0008]所述IFITM3蛋白是如下A1)、A2)或A3)的蛋白质：
[0009]A1)氨基酸序列是序列表中序列1的蛋白质；
[0010]A2)将A1)的蛋白质经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的与A1)所示的蛋白质具有80％以上的同一性且具有相同活性的蛋白质；
[0011]A3)在A1)或A2)的N末端或/和C末端连接蛋白质标签得到的融合蛋白质。
[0012]其中，序列表中的序列1由113个氨基酸残基组成。
[0013]上述应用中，所述蛋白质可人工合成，也可先合成其编码基因，再进行生物表达得到。
[0014]上述应用中，所述蛋白质标签(protein
‑
tag)是指利用DNA体外重组技术，与目的蛋白质一起融合表达的一种多肽或者蛋白质，以便于目的蛋白质的表达、检测、示踪和/或纯化。所述蛋白质标签可为Flag标签、His标签、MBP标签、HA标签、myc标签、GST标签和/或SUMO标签等。
[0015]上述应用中，所述同一性是指氨基酸序列的同一性。可使用国际互联网上的同源
性检索站点测定氨基酸序列的同一性，如NCBI主页网站的BLAST网页。例如，可在高级BLAST2.1中，通过使用blastp作为程序，将Expect值设置为10，将所有Filter设置为OFF，使用BLOSUM62作为Matrix，将Gap existence cost，Perresidue gap cost和Lambda ratio分别设置为11，1和0.85(缺省值)并进行检索一对氨基酸序列的同一性进行计算，然后即可获得同一性的值(％)。
[0016]上述应用中，所述80％以上的同一性可为至少80％、90％、91％、92％、95％、96％、98％、99％或100％的同一性。
[0017]上述应用中，所述禽呼肠孤病毒抑制剂具有抑制禽呼肠孤病毒复制的功能。
[0018]上述应用中，所述增强IFITM3蛋白的活性和/或提高IFITM3蛋白的基因的表达量和/或提高IFITM3蛋白的含量的物质为与IFITM3蛋白相关的生物材料，为下述B1)至B5)中的任一种：
[0019]B1)编码所述IFITM3的核酸分子；
[0020]B2)含有B1)所述核酸分子的表达盒；
[0021]B3)含有B1)所述核酸分子的重组载体、或含有B1)所述表达盒的重组载体；
[0022]B4)含有B1)所述核酸分子的重组微生物、或含有B2)所述表达盒的重组微生物、或含有B3)所述重组载体的重组微生物；
[0023]B5)含有B1)所述核酸分子的转基因动物细胞系、或含有B2)所述表达盒的转基因动物细胞系、或含有B3)所述重组载体的转基因动物细胞系。
[0024]其中，所述核酸分子可以是DNA，如cDNA、基因组DNA或重组DNA；所述核酸分子也可以是RNA，如mRNA或hnRNA等。
[0025]上述应用中，B1)所述核酸分子为如下b1)或b2)所示的基因：
[0026]b1)编码链的编码序列是序列表中序列2的核苷酸的cDNA分子或DNA分子；
[0027]b2)编码链的核苷酸是序列表中序列2的cDNA分子或DNA分子。
[0028]其中，序列表中的序列2由342个核苷酸组成，编码序列表中的序列1所示的蛋白质。
[0029]上述应用中，B2)所述的含有所述核酸分子的表达盒(IFITM3基因表达盒)，是指能够在宿主细胞中表达IFITM3的核酸分子，该核酸分子不但可包括启动IFITM3基因转录的启动子，还可包括终止IFITM3转录的终止子。进一步，所述表达盒还可包括增强子序列。可用于本专利技术的启动子包括但不限于：组成型启动子，组织、器官和发育特异的启动子，和诱导型启动子。
[0030]可用现有的真核表达载体构建含有所述IFITM3基因表达盒的重组表达载体。所述真核表达载体可为pEF1α
‑
Myc、pcDNA3.1
‑
HA、pEGFP等。
[0031]上述应用中，所述动物细胞系具体可为鸡胚成纤维细胞(DF1)。
[0032]上述应用中，所述禽呼肠孤病毒所致疾病可为禽类的病毒性关节炎、矮小综合征、呼吸道疾病、肠道疾病和吸收不良综合征等。
[0033]本专利技术还保护禽呼肠孤病毒抑制剂。
[0034]所述抑制剂可只为增强IFITM3蛋白的活性和/或提高IFITM3蛋白的基因的表达量和/或提高IFITM3蛋白的含量的物质，也可还含有载体或赋形剂。
[0035]上述禽呼肠孤病毒抑制剂中，所述增强IFITM3蛋白的活性和/或提高IFITM3蛋白
的基因的表达量和/或提高IFITM3蛋白的含量的物质为与IFITM3蛋白相关的生物材料，为下述B1)至B5)中的任一种：
[0036]B1)编码IFITM3的核酸分子；
[0037]B2)含有B1)所述核酸分子的表达盒；
[0038]B3)含有B1)所述核酸分子的重组载体、或含有B1)所述表达盒的重组载体；
[0039]B4)含有B1)所述核酸分子的重组微生物、或含有B2)所述表达盒的重组微生物、或含有B3)所述重组载体的重组微生物；
[0040]B5)含有B1)所述核酸分子的转基因动物细胞系、或含有B2)所述表达盒的转基因动物细胞系、或含有B3)所述重组载本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.增强IFITM3蛋白的活性和/或提高IFITM3蛋白的基因的表达量和/或提高IFITM3蛋白的含量的物质的应用，所述应用为下述任一种：U1在制备预防和/或治疗禽呼肠孤病毒所致疾病或禽呼肠孤病毒感染的药物中的应用；U2在制备禽呼肠孤病毒抑制剂中的应用；U3在抑制ARVσC表达中的应用；所述IFITM3蛋白是如下A1)、A2)或A3)的蛋白质：A1)氨基酸序列是序列表中序列1的蛋白质；A2)将A1)的蛋白质经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的与A1)所示的蛋白质具有80％以上的同一性且具有相同活性的蛋白质；A3)在A1)或A2)的N末端或/和C末端连接蛋白质标签得到的融合蛋白质。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述禽呼肠孤病毒抑制剂具有抑制禽呼肠孤病毒复制的功能。3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于：所述增强IFITM3蛋白的活性和/或提高IFITM3蛋白的基因的表达量和/或提高IFITM3蛋白的含量的物质为与IFITM3蛋白相关的生物材料，为下述B1)至B5)中的任一种：B1)编码所述IFITM3的核酸分子；B2)含有B1)所述核酸分子的表达盒；B3)含有B1)所述核酸分子的重组载体、或含有B1)所述表达盒的重组载体；B4)含有B1)所述核酸分子的重组微生物、或含有B2)所述表达盒的重组微生物、或含有B3)所述重组载体的重组微生物；B5)含有B1)所述核酸分子的转基因动物细胞系、或含有B2)所述表达盒的转基因动物细胞系、或含有B3)所述重组载体的...

【专利技术属性】
技术研发人员：谢芝勋，任红玉，万丽军，王盛，谢丽基，谢志勤，邓显文，范晴，罗思思，张艳芳，黄娇玲，曾婷婷，张民秀，
申请(专利权)人：广西壮族自治区兽医研究所，
类型：发明
国别省市：