针对SARS-CoV-2突变株的抗体及其用途制造技术

本发明专利技术涉及免疫学领域和分子病毒学领域，特别是SARS

【技术实现步骤摘要】
针对SARS
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CoV
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2突变株的抗体及其用途


[0001]本专利技术涉及免疫学领域和分子病毒学领域，特别是SARS
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Cov
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2的诊断、预防和治疗领域。具体而言，本专利技术提供了可识别SARS
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Cov
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2突变株的单克隆抗体，以及包含所述抗体的组合物(例如，诊断剂和治疗剂)。此外，本专利技术还涉及所述抗体的用途。本专利技术的抗体可用于诊断、预防和/或治疗SARS
‑
Cov
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2感染和/或由所述感染引起的疾病(例如，COVID
‑
19)。

技术介绍

[0002]全球疫苗接种可能是结束SARS
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CoV
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2大流行不可避免的手段。目前的疫苗主要通过引发对源自早期分离株的刺突蛋白的中和抗体反应从而起到保护作用。然而，出现了具有多个突变的突变株，例如B.1.1.7、B.1.351、B.1.617.1和B.1.617.2等，现有疫苗的有效性可能会受到影响。因此需要寻找更为有效的、针对上述突变毒株的中和抗体，提供有效的诊断、预防和/或治疗突变株感染的手段，从而助力疫情的稳定与消除。

技术实现思路

[0003]本申请专利技术人经过大量的实验研究后发现了一种抗体，其能够特异性识别和靶向多种SARS
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CoV
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2突变株的S蛋白，特别是S蛋白的受体结合结构域(RBD)，并且显示出了高效的中和突变毒株的能力。因此，本专利技术的抗体特别适合用于诊断、预防和治疗SARS
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CoV
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2感染(特别是突变株感染)或与SARS
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CoV
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2感染相关的疾病(例如COVID
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19)。
[0004]本专利技术的抗体
[0005]在一个方面，本专利技术提供了一种抗体或其抗原结合片段，其包含：
[0006](a)包含下述3个互补决定区(CDRs)的重链可变区(VH)：序列为SEQ ID NO:1的VH CDR1、序列为SEQ ID NO:2的VH CDR2、序列为SEQ ID NO:3的VH CDR3；和/或，包含下述3个互补决定区(CDRs)的轻链可变区(VL)：序列为SEQ ID NO:4的VL CDR1、序列为SEQ ID NO:5的VL CDR2、序列为SEQ ID NO:6的VL CDR3；或
[0007](b)包含下述3个互补决定区(CDRs)的重链可变区(VH)：序列为SEQ ID NO:21的VH CDR1、序列为SEQ ID NO:22的VH CDR2、序列为SEQ ID NO:23的VH CDR3；和/或，包含下述3个互补决定区(CDRs)的轻链可变区(VL)：序列为SEQ ID NO:24的VL CDR1、序列为SEQ ID NO:25的VL CDR2、序列为SEQ ID NO:26的VL CDR3。
[0008]在某些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含：
[0009](a)重链可变区(VH)，其包含SEQ ID NO：7所示的序列或其变体；和/或，轻链可变区(VL)，其包含SEQ ID NO：8所示的序列或其变体；或，
[0010](b)重链可变区(VH)，其包含SEQ ID NO：27所示的序列或其变体；和/或，轻链可变区(VL)，其包含SEQ ID NO：28所示的序列或其变体；
[0011]其中，所述变体与其所源自的序列相比具有一个或几个氨基酸的置换、缺失或添加(例如1个，2个，3个，4个或5个氨基酸的置换、缺失或添加)，或具有至少80％、至少85％、
至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列同一性的序列；优选地，所述的置换是保守置换。
[0012]在某些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含：包含如SEQ ID NO:7所示的序列的VH和包含如SEQ ID NO:8所示的序列的VL。
[0013]在某些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含：包含如SEQ ID NO:27所示的序列的VH和包含如SEQ ID NO:28所示的序列的VL。
[0014]在某些实施方案中，本专利技术的抗体或其抗原结合片段可以进一步包含来源于哺乳动物(例如，人)免疫球蛋白的恒定区序列或其变体，所述变体与其所源自的序列相比具有一个或多个氨基酸的置换、缺失或添加。
[0015]在某些实施方案中，本专利技术的抗体或其抗原结合片段的重链包含人免疫球蛋白的重链恒定区(CH)或其变体，所述变体与其所源自的序列相比具有一个或多个氨基酸的置换、缺失或添加(例如，至多20个、至多15个、至多10个、或至多5个氨基酸的置换、缺失或添加；例如1个，2个，3个，4个或5个氨基酸的置换、缺失或添加)；和/或，
[0016]本专利技术的抗体或其抗原结合片段的轻链包含人免疫球蛋白的轻链恒定区(CL)或其变体，所述变体与其所源自的序列相比具有至多20个氨基酸的保守置换(例如至多15个、至多10个、或至多5个氨基酸的保守置换；例如1个，2个，3个，4个或5个氨基酸的保守置换)。
[0017]在一些实施方案中，所述重链恒定区(CH)的变体与其所源自的序列相比可以具有一个或多个氨基酸的保守置换。在此类实施方案中，所述重链恒定区(CH)的变体与其所源自的野生型序列相比可以具有相同或基本相同的效应子功能。
[0018]在另一些实施方案中，所述重链恒定区(CH)的变体可以包含一个或多个氨基酸突变以改变本专利技术抗体的下列中的一个或更多个特性：Fc受体结合、抗体糖基化、半胱氨酸残基的数目、效应细胞功能或补体功能等。可以通过将抗体恒定区中的至少一个氨基酸残基替换为不同残基，产生功能改变，例如，改变抗体对效应子配体(如FcR或补体C1q)的亲和力，从而改变效应子功能(例如降低)。抗体的Fc区介导几种重要的效应子功能，例如ADCC、吞噬作用、CDC等。
[0019]在某些实施方案中，所述重链恒定区是IgG重链恒定区，例如IgG1、IgG2、IgG3或IgG4重链恒定区。在某些实施方案中，所述重链恒定区是人IgG1、IgG2、IgG3或IgG4重链恒定区。
[0020]在某些实施方案中，所述轻链恒定区是κ轻链恒定区。在某些实施方案中，所述轻链恒定区是人κ轻链恒定区。
[0021]在某些示例性实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含如SEQ ID NO:9所示的重链恒定区(CH)和/或如SEQ ID NO:10所示的轻链恒定区(CL)。
[0022]在某些示例性实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含如SEQ ID NO:29所示的重链恒定区(CH)和/或如SEQ ID NO:30所示的轻链恒定区(CL)。
[0023]在某些示例性实施方案中，本专利技术的抗体或其抗原结合本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.抗体或其抗原结合片段，其包含：(a)包含下述3个互补决定区(CDRs)的重链可变区(VH)：序列为SEQ ID NO:1的VH CDR1、序列为SEQ ID NO:2的VH CDR2、序列为SEQ ID NO:3的VH CDR3；和/或，包含下述3个互补决定区(CDRs)的轻链可变区(VL)：序列为SEQ ID NO:4的VL CDR1、序列为SEQ ID NO:5的VL CDR2、序列为SEQ ID NO:6的VL CDR3；或(b)包含下述3个互补决定区(CDRs)的重链可变区(VH)：序列为SEQ ID NO:21的VH CDR1、序列为SEQ ID NO:22的VH CDR2、序列为SEQ ID NO:23的VH CDR3；和/或，包含下述3个互补决定区(CDRs)的轻链可变区(VL)：序列为SEQ ID NO:24的VL CDR1、序列为SEQ ID NO:25的VL CDR2、序列为SEQ ID NO:26的VL CDR3。2.权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其包含：(a)重链可变区(VH)，其包含SEQ ID NO：7所示的序列或其变体；和/或，轻链可变区(VL)，其包含SEQ ID NO：8所示的序列或其变体；或，(b)重链可变区(VH)，其包含SEQ ID NO：27所示的序列或其变体；和/或，轻链可变区(VL)，其包含SEQ ID NO：28所示的序列或其变体；其中，所述变体与其所源自的序列相比具有一个或几个氨基酸的置换、缺失或添加(例如1个，2个，3个，4个或5个氨基酸的置换、缺失或添加)，或具有至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列同一性的序列；优选地，所述的置换是保守置换；优选地，所述抗体或其抗原结合片段包含：包含如SEQ ID NO:7所示的序列的VH和包含如SEQ ID NO:8所示的序列的VL；优选地，所述抗体或其抗原结合片段包含：包含如SEQ ID NO:27所示的序列的VH和包含如SEQ ID NO:28所示的序列的VL。3.权利要求1或2所述的抗体或其抗原结合片段，其进一步包含来源于人免疫球蛋白的恒定区；优选地，所述抗体或其抗原结合片段的重链包含来源于人免疫球蛋白(例如IgG1、IgG2、IgG3或IgG4)的重链恒定区，所述抗体或其抗原结合片段的轻链包含来源于人免疫球蛋白(例如κ或λ)的轻链恒定区；优选地，所述抗体或其抗原结合片段包含如SEQ ID NO:9所示的重链恒定区(CH)和/或如SEQ ID NO:10所示的轻链恒定区(CL)；优选地，所述抗体或其抗原结合片段包含如SEQ ID NO:29所示的重链恒定区(CH)和/或如SEQ ID NO:30所示的轻链恒定区(CL)。4.权利要求1
‑
3任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中，所述抗原结合片段选自Fab、Fab
’
、(Fab
’
)2、Fv、二硫键连接的Fv、scFv、双抗体(diabody)、单域抗体(sdAb)、嵌合抗体、双特异性抗体或多特异性抗体。5.分离的核酸分子，其编码权利要求1
‑
4任一项所述的抗体或其抗原结合片段，或其重链可变区和/或轻链可变区；优选地，所述分离的核酸分子包含编码权利要求1
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4任一项所述的抗体或其抗原结合片段的重链或重链可变区的第一核苷酸序列和编码所述抗体或其抗原结合片段的轻链或轻链可变区的第二核苷酸序列，其中所述第一核苷酸序列和所述第二核苷酸序列存在于相
同或不同的分离的核酸分子上；优选地，所述第一核苷酸序列包含SEQ ID NOs:11
‑
13所示的序列，例如包含SEQ ID NO:17所示的序列；和/或，所述第二核苷酸序列包含SEQ ID NOs:14
‑
16所示的序列，例如包含SEQ ID NO:18所示的序列；或优选地，所述第一核苷酸序列包含SEQ ID NOs:31
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33所示的序列，例如包含SEQ ID NO:37所示的序列；和/或，所述第二核苷酸序列包含SEQ ID NOs:34
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36所示的序列，例如包含SEQ ID NO:38所示的序列。6.载体，其包含权利要求5所述的核酸分子；优选地，所述载体包含编码权利要求1
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4任一项所述的抗体或其抗原结合片段的重链或重链可变区的第一核苷酸序列和编码所述抗体或其抗原结合片段的轻链或轻链可变区的第二核苷酸序列，其中所述第一核苷酸序列和所述第二核苷酸序列存在于相同或不同的载体上。7.宿主细胞，其包含权利要求5所述的核酸分子或权利要求6所述的载体。8.制备权利要求1
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4任一项所述的抗体或其抗原结合片段的方法，其包括，在允许所述抗体或其抗原结合片段表达的条件下，培养权利要求7所述的宿主细胞，和从培养...

【专利技术属性】
技术研发人员：曹云龙，谢晓亮，
申请(专利权)人：北京大学，
类型：发明
国别省市：