一种喜树碱衍生物及其手性异构体的分析方法及其应用技术

本发明专利技术提供了一种喜树碱衍生物及其手性异构体的分析方法及其应用，所述分析可采用反相色谱硅胶基质填料色谱柱并使用反相色谱法进行分析；且，该分析方法分析的同时，可以参照喜树碱衍生物对照品保留时间，接收相应主峰，收集馏分浓缩，干燥，完成对喜树碱衍生物及其手性异构体的制备。该分析方法中所述反相色谱硅胶基质填料为硅胶基质键合C18、硅胶基质键合C8或硅胶基质键合氰基；所述反相色谱法的流动相为水相-有机相混合溶剂。本发明专利技术应用反相色谱硅胶基质常规固定相的液相色谱方法对喜树碱衍生物两种手性异构体进行分析分离，进而实现对其进行质量控制及单一手性异构体的制备。备。备。

【技术实现步骤摘要】
一种喜树碱衍生物及其手性异构体的分析方法及其应用


[0001]本专利技术属于化学分析
，具体涉及一种喜树碱衍生物及其手性异构体的分析方法及其应用。

技术介绍

[0002]喜树碱衍生物(化合物A)是一种DNA拓扑酶抑制剂，常被用于肿瘤治疗之中。Enhertμ是2020年上市的一种治疗HER2阳性乳腺癌的ADC药物，其中的有效载药(payload)就是化合物A。目前仍然有许多含有该类化合物的药物处于研究和开发中。因此，如何分析及制备喜树碱衍生物及其手性异构体，进而控制喜树碱衍生物的质量，显得尤为重要。喜树碱衍生物及其手性异构体结构如下所示：
[0003][0004]其中A为喜树碱衍生物；(B)为化合物A的手性异构体；
[0005]近年来，随着硅胶色谱填料的多样化，以反相色谱硅胶基质固定相的液相色谱法应用日益广泛，然而，利用以反相色谱硅胶基质固定相分析及制备喜树碱衍生物及其手性异构体的方法未见相关报道。因此，如何建立一种能够简单、快速、高效的分析及分离喜树碱衍生物及其手性异构体的方法，进而实现对其质量的控制，是目前需要解决的技术问题。

技术实现思路

[0006]为了解决现有技术的不足，本专利技术提供了一种喜树碱衍生物及其手性构体的分析方法及其应用。
[0007]本专利技术通过以下技术手段实现：
[0008]一种喜树碱衍生物及其手性异构体的分析方法，采用反相色谱硅胶基质填料色谱柱并使用反相色谱法进行分析；所述反相色谱硅胶基质填料为硅胶基质键合C18、硅胶基质键合C8或硅胶基质键合氰基；所述反相色谱法的流动相为水相-有机相混合溶剂。
[0009]优选地，所述分析方法包括以下步骤：
[0010]S1、喜树碱衍生物及其手性异构体对照品均分别用水：乙腈：三氟乙酸＝70～90：10～20：0.05～0.2，配置成浓度为0.1mg/mL的对照品溶液；
[0011]S2、喜树碱衍生物及其手性异构体按质量百分比1:1混合后的供试品用水：乙腈：三氟乙酸＝70～90：10～20：0.05～0.2，配制成浓度为0.1～2mg/mL的供试品溶液，进样量
为5～10uL；
[0012]S3、设置反相色谱法的条件为，流动相比例为80：20～60：40，流速为0.5～1.5mL/min；液相色谱柱温箱温度为20～40℃；检测波长为220nm；
[0013]S4、精密吸取对照品及供试品溶液分别注入液相色谱柱，参照两份喜树碱衍生物的对照品保留时间，从而完成对喜树碱衍生物及其手性异构体的分析。
[0014]所述分析方法对流动相、进样量及波长等都做了较佳的选择，从而确保了喜树碱衍生物的稳定性，提高了色谱峰的对称性，从而实现较好的分离效果。
[0015]优选地，所述S1及S2中水：乙腈：三氟乙酸＝85：15：0.1。
[0016]优选地，所述S3中水相流动相为含有三氟乙酸的水溶液，所述有机相流动相为含有三氟乙酸的乙腈溶液或含有三氟乙酸的甲醇溶液。
[0017]优选地，所述S3中有机相流动相是含有体积分数为0.05～0.5％三氟乙酸的乙腈溶液或含有体积分数为0.05～0.5％三氟乙酸的甲醇溶液。
[0018]优选地，以上所述的一种喜树碱衍生物及其手性异构体的分析方法的应用，所述方法可以用于喜树碱衍生物及其手性异构体的制备。
[0019]优选地，所述喜树碱衍生物及其手性异构体的制备包括以下步骤：
[0020]S1、喜树碱衍生物及其手性异构体对照品均分别用水：乙腈：三氟乙酸＝85：15：0.1，配置成浓度为1mg/mL的对照品溶液；
[0021]S2、取喜树碱衍生物及其手性异构体按质量百分比1:1的混合液为供试品，并用水：乙腈：三氟乙酸＝85：15：0.1，配制成浓度为5～10mg/mL的供试品溶液；进样量为1～10mL；
[0022]S3、设置流动相的比例为80：20～60：40；设置流速为5～40mL/min；检测波长为220nm；
[0023]S5、取对照品及供试品溶液分别注入液相色谱柱，参照喜树碱衍生物对照品保留时间，接收相应主峰，收集馏分浓缩，干燥，完成对喜树碱衍生物及其手性异构体的制备。
[0024]优选地，所述S3中水相流动相为含有三氟乙酸的水溶液，所述有机相流动相为含有三氟乙酸的乙腈溶液或含有三氟乙酸的甲醇溶液。
[0025]优选地，所述S3中有机相流动相是含有体积分数为0.05～0.5％三氟乙酸的乙腈溶液或含有体积分数为0.05～0.5％三氟乙酸的甲醇溶液。本专利技术使用的体积分数为0.05～0.5％三氟乙酸溶剂作为缓冲改性剂，能够明显改善分离度和峰形，又能保证在体积分数为0.05～0.5％三氟乙酸的pH值下不会对反相色谱硅胶基质填料色谱柱造成损伤。
[0026]本专利技术的有益效果体现在：本专利技术采用的以反相色谱硅胶基质固定相的液相色谱法对喜树碱衍生物及其手性异构体进行分析分离，其方法操作简单，准确和高效，能够有效控制喜树碱衍生物的质量。
附图说明：
[0027]图1：实施例10制得的喜树碱衍生物的液相色谱图。
[0028]图2：实施例10制得的喜树碱衍生物手性异构体的液相色谱图。
具体实施方式
[0029]本专利技术提供了一种高效液相色谱法分析及制备喜树碱衍生物及其手性构体，通过采用反相色谱硅胶基质填料色谱柱，并使用反相色谱法进行分析分离；所述反相色谱硅胶基质填料为反相色谱硅胶基质固定相，具体为硅胶基质键合C18、硅胶基质键合C8或硅胶基质键合CN(氰基)；所述反相色谱法的流动相为水相-有机相混合溶剂；所述有机相溶剂为含有体积分数为0.05～0.5％三氟乙酸的乙腈溶液或含有体积分数为0.05～0.5％三氟乙酸的甲醇溶液。在上述条件相互配合试用下，喜树碱衍生物及其手性异构体能够有效分离，分离度≥2.5。
[0030]以下通过具体实施方式的描述对本专利技术作进一步说明，但本专利技术的保护范围并不局限于具体实施例。
[0031]实施例1：喜树碱衍生物和喜树碱衍生物手性异构体的分析分离
[0032]仪器：Thermo U3000高效液相色谱仪
[0033]色谱柱：C18(150
×
4.6mm,3μm)
[0034]流动相：水-乙腈-三氟乙酸(80:20：0.1)
[0035]柱温：40℃
[0036]流速：1.0mL/min
[0037]进样体积：5μL
[0038]样品浓度：1mg/mL
[0039]检测波长：220nm
[0040]实验步骤:
[0041]分别精密量取喜树碱衍生物、喜树碱衍生物手性异构体各1mg，置于10mL容量瓶中，以水：乙腈：三氟乙酸＝85：15：0.1稀释到刻度，摇匀，作为对照品溶液。精密称量质量百分比1:1的喜树碱衍生物和喜树碱衍生物手性异构体共10mg,置于10mL容量瓶中，以水：乙腈：三氟乙酸＝85：15：0.1并稀释到刻度，摇匀，作为本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种喜树碱衍生物及其手性异构体的分析方法，其特征在于，采用反相色谱硅胶基质填料色谱柱并使用反相色谱法进行分析；所述反相色谱硅胶基质填料为硅胶基质键合C18、硅胶基质键合C8或硅胶基质键合氰基；所述反相色谱法的流动相为水相-有机相混合溶剂。2.如权利要求1所述的一种喜树碱衍生物及其手性异构体的分析方法，其特征在于，所述分析方法包括以下步骤：S1、将喜树碱衍生物及其手性异构体对照品均分别用水：乙腈：三氟乙酸＝70～90：10～20：0.05～0.2，配置成浓度为0.1mg/mL的对照品溶液；S2、喜树碱衍生物及其手性异构体按质量百分比1:1混合后的供试品用水：乙腈：三氟乙酸＝70～90：10～20：0.05～0.2，配制成浓度为0.1～2mg/mL的供试品溶液，进样量为5～10uL；S3、设置反相色谱法的条件为，流动相比例为80：20～60：40，流速为0.5～1.5mL/min；液相色谱柱温箱温度为20～40℃；检测波长为220nm；S4、精密吸取对照品及供试品溶液分别注入液相色谱柱，参照两份喜树碱衍生物的对照品保留时间，从而完成对喜树碱衍生物及其手性异构体的分析。3.如权利要求2所述的一种喜树碱衍生物及其手性异构体的分析方法，其特征在于，所述S1及S2中水：乙腈：三氟乙酸＝85：15：0.1。4.如权利要求2所述的一种喜树碱衍生物及其手性异构体的分析方法，其特征在于，所述S3中水相流动相为含有三氟乙酸的水溶液，所述有机相流动相为含有三氟乙酸的乙腈溶液或含有三氟乙酸的甲醇溶液。5.如权利要求4所述的一种喜树碱衍生物及其手性异构体的分析方法，其特...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄保华，胡新礼，刘晓栋，戴建，
申请(专利权)人：苏州宜百奥生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：