二价靶向缀合物制造技术

本发明专利技术提供了包含二价靶向部分、核酸和任选的连接基团的缀合物，以及可用于制备所述缀合物的合成中间体和合成方法，包含双齿靶向配体和所述缀合物的组合物，以及用双齿缀合物靶向治疗性核酸的方法。所述缀合物可用于靶向治疗性核酸。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】二价靶向缀合物相关申请的交叉引用本专利要求2018年11月2日提交的美国申请号62/755,179的优先权益，所述申请以引用的方式并入文本中。
技术介绍
自从Ashwell和Morell的开创性论文阐明去唾液酸糖蛋白受体(ASGPr)在循环糖蛋白的识别和转运中的作用以来，这种受体已经成为深入研究的重点(D'Souza等,2015,J.ControlRelease,203,126-139)。肝细胞表面上的高水平表达使这种受体成为肝特异性递送剂的诱人靶标。所述受体具有选择性结合N-乙酰半乳糖胺的三价碳水化合物结合结构域。一般公认的规则是，对靶向配体的结合亲和力按以下顺序随着GalNac单元数的增加而增加：六个GalNac单元大于四个GalNac单元，四个GalNac单元大于三个GalNac单元，三个GalNac单元大于两个GalNac单元，两个GalNac单元大于一个GalNAc单元(Meier等,2000,JMolBiol,300,857-865；SpiessM,1990,Biochemistry,29,43,10009-10018；GrewalP.,2010,MethodsinEnzymology,479,223-241；Lee等,1983,JBiolChem,258,1,199-202；以及Valentijn等,1997,Tetrahedron,53,2,759-770)。在大多数情况下，可能涉及多齿靶向配体的化学合成，这需要多个合成步骤(有时在20个到30个之间)。这会影响制造要求和商品成本。此外，GalNAc/siRNA缀合物的合成通常在固定的可控孔度玻璃(CPG)支撑物上进行。接近支撑物上的反应性位点与孔径有关，因此受到接近位点的分子大小的不利影响。靶向配体大小(单糖单元数、分子量、分子半径等)的增加会对支撑物上的负载效率产生不利影响。因此，目前需要具有有用的递送特性，但较易制备，制备较便宜，分子量较低，和/或负载效率较高的靶向配体。
技术实现思路
已经鉴定了含有两个糖基(例如，N-乙酰半乳糖胺部分)的双齿GalNac靶向配体，所述靶向配体的靶向活性与已知的三触角和四触角配体一样好或优于三触角和四触角配体。这些双齿靶向配体一般具有较短的合成途径，使得总合成效率较高。另外，双齿靶向配体的较小分子大小允许较多渗透至CPG上，使得与一些三触角和四触角配体相比，负载水平约高30-50％。另外，与三触角和四触角配体相比，双齿靶向配体具有简化的分析，这可加快ADME毒性研究和相关研究活动。本专利技术提供了双齿靶向配体、这些双齿靶向配体的核酸缀合物、包含双齿靶向配体和缀合物的组合物，以及用双齿缀合物靶向治疗性核酸的方法。在一个实施方案中，本专利技术提供了式(I)缀合物：其中：R1是糖；L1是具有0至20个碳原子的二价、支链或无支链、饱和或不饱和烃链，其中所述烃链中的一个或多个碳原子任选地被-O-、-NRX-、-NRX-C(＝O)-、-C(＝O)-NRX-或-S-置换，并且其中RX是氢或(C1-C6)烷基，并且其中所述烃链任选地被一个或多个选自氧代基(＝O)和卤基的取代基取代；B是5-10元芳基或5-10元杂芳基，所述5-10元芳基或5-10元杂芳基任选地被一个或多个独立地选自由卤基、羟基、氰基、三氟甲基、三氟甲氧基、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷氧基羰基、(C1-C6)烷酰氧基、(C3-C6)环烷基和(C3-C6)环烷基(C1-C6)烷基组成的组的基团取代；L2是具有0至20个碳原子的二价、支链或无支链、饱和或不饱和烃链，其中所述烃链中的一个或多个碳原子任选地被-O-、-NRX-、-NRX-C(＝O)-、-C(＝O)-NRX-或-S-置换，并且其中RX是氢或(C1-C6)烷基，并且其中所述烃链任选地被一个或多个选自氧代基(＝O)和卤基的取代基取代；R2是糖；L3不存在或是连接基团；A不存在，是3-20元环烷基、5-20元芳基、5-20元杂芳基或3-20元杂环烷基；每个RA独立地选自由氢、羟基、CN、F、Cl、Br、I、-C1-2烷基-ORa、C1-10烷基C2-10烯基和C2-10炔基组成的组；其中所述C1-10烷基C2-10烯基和C2-10炔基任选地被一个或多个独立地选自卤基、羟基和C1-3烷氧基的基团取代；n是0、1、2、3、4、5、6、7、8、9或10；L4不存在或是连接基团；R3是核酸；Ra是氢、保护基、与固体支撑物的共价键或与结合至固体支撑物的连接基团L5的键；并且L5是连接基团；或所述缀合物的盐。本专利技术还提供了包含如本文所描述的式I缀合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体的药物组合物。本专利技术还提供了可用于制备式I缀合物的本文所公开的合成中间体和方法。本专利技术的其它目的、特征和优点将由本领域技术人员从以下详述和图式中显而易见。具体实施方式除非另外指明，否则如本文所用的以下术语具有赋予它们的含义。术语“烷氧基”和“烷硫基”以其常规含义使用，并且是指经由氧原子(“氧基”)或硫基与分子的其余部分连接的那些烷基，并且进一步包括其单卤化和多卤化变体。除非另外规定，否则本身或作为另一个取代基的一部分的术语“烷基”意指具有指定碳原子数的直链或支链烃基(即，C1-8意指一个至八个碳)。烷基的实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基、仲丁基、正戊基、正己基、正庚基、正辛基等。术语“烯基”是指具有一个或多个双键的不饱和烷基。类似地，术语“炔基”是指具有一个或多个三键的不饱和烷基。此类不饱和烷基的实例包括乙烯基、2-丙烯基、巴豆基、2-异戊烯基、2-(丁二烯基)、2,4-戊二烯基、3-(1,4-戊二烯基)、乙炔基、1-丙炔基和3-丙炔基、3-丁炔基以及高级同系物和异构体。术语“动物”包括哺乳动物物种，例如人类、小鼠、大鼠、狗、猫、仓鼠、豚鼠、兔、家畜等。如本文所用的术语“芳基”是指单个全碳芳环或多个稠合全碳环系统，其中至少一个环是芳香族的。举例来说，在某些实施方案中，芳基具有6至20个碳原子、6至14个碳原子、6至12个碳原子或6至10个碳原子。芳基包括苯基。芳基还包括具有约9至20个碳原子的多个稠合碳环系统(例如，包含2、3或4个环的环系统)，其中至少一个环是芳香族的并且其中其它环可以是芳香族的或非芳香族的(例如，环烷基)。当价数要求允许时，多个稠环系统的环可以经由稠合键、螺键和桥键相互连接。应了解，如上文所定义的多个稠环系统的连接点可以在环系统的任何位置，包括环的芳香族或碳环部分。芳基的非限制性实例包括但不限于苯基、茚基、茚满基、萘基、1,2,3,4-四氢萘基、蒽基等。术语“环烷基”是指具有3至8个碳原子的饱和或部分不饱和(非芳香族)全碳环(即，(C3-C8)碳环)。这个术语还包括多个稠合、饱和全碳环系统(例如，包含2、3或4个碳环的环系统)。因此，碳环包括多环碳环，例如双环碳环(例如本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种式(I)缀合物：/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20181102 US 62/755,1791.一种式(I)缀合物：



其中：
R1是糖；
L1是具有0至20个碳原子的二价、支链或无支链、饱和或不饱和烃链，其中所述烃链中的一个或多个碳原子任选地被-O-、-NRX-、-NRX-C(＝O)-、-C(＝O)-NRX-或-S-置换，并且其中RX是氢或(C1-C6)烷基，并且其中所述烃链任选地被一个或多个选自氧代基(＝O)和卤基的取代基取代；
B是5-10元芳基或5-10元杂芳基，所述5-10元芳基或5-10元杂芳基任选地被一个或多个独立地选自由卤基、羟基、氰基、三氟甲基、三氟甲氧基、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷氧基羰基、(C1-C6)烷酰氧基、(C3-C6)环烷基和(C3-C6)环烷基(C1-C6)烷基组成的组的基团取代；
L2是具有0至20个碳原子的二价、支链或无支链、饱和或不饱和烃链，其中所述烃链中的一个或多个碳原子任选地被-O-、-NRX-、-NRX-C(＝O)-、-C(＝O)-NRX-或-S-置换，并且其中RX是氢或(C1-C6)烷基，并且其中所述烃链任选地被一个或多个选自氧代基(＝O)和卤基的取代基取代；
R2是糖；
L3不存在或是连接基团；
A不存在，是3-20元环烷基、5-20元芳基、5-20元杂芳基或3-20元杂环烷基；
每个RA独立地选自由氢、羟基、CN、F、Cl、Br、I、-C1-2烷基-ORa、C1-10烷基C2-10烯基和C2-10炔基组成的组；其中所述C1-10烷基C2-10烯基和C2-10炔基任选地被一个或多个独立地选自卤基、羟基和C1-3烷氧基的基团取代；
n是0、1、2、3、4、5、6、7、8、9或10；
L4不存在或是连接基团；
R3是核酸；
Ra是氢、保护基、与固体支撑物的共价键或与结合至固体支撑物的连接基团L5的键；并且
L5是连接基团；
或其盐。


2.如权利要求1所述的缀合物或盐，其中A不存在。


3.如权利要求1所述的缀合物或盐，其中A是3-20元环烷基、5-20元芳基、5-20元杂芳基或3-20元杂环烷基。


4.如权利要求1-3中任一项所述的缀合物或盐，其中B是5-10元芳基。


5.如权利要求1-3中任一项所述的缀合物或盐，其中B是萘基或苯基。


6.如权利要求1-3中任一项所述的缀合物或盐，其中B是苯基。


7.如权利要求1-3中任一项所述的缀合物或盐，其中所述基团：



是：





8.如权利要求1-3中任一项所述的缀合物或盐，其中B是5-10元杂芳基。


9.如权利要求1-3中任一项所述的缀合物或盐，其中B是吡啶基、嘧啶基、喹啉基、异喹啉基、咪唑基、噻唑基、二恶唑基或恶唑基。


10.如权利要求1-3中任一项所述的缀合物或盐，其中所述基团：



是：





11.如权利要求1-3中任一项所述的缀合物或盐，其中所述基团：



是：





12.如权利要求1-11中任一项所述的缀合物或盐，其中L1是具有0至20个碳原子的二价、无支链、饱和烃链，其中所述烃链中的一个或多个(例如，1、2、3或4个)碳原子任选地被-O-、-NRX-、-NRX-C(＝O)-、-C(＝O)-NRX-或-S-置换，并且其中RX是氢或(C1-C6)烷基，并且其中所述烃链任选地被一个或多个选自氧代基(＝O)和卤基的取代基取代。


13.如权利要求1-11中任一项所述的缀合物或盐，其中L1是具有0至12个碳原子的二价、无支链、饱和烃链，其中所述烃链中的一个或多个(例如，1、2、3或4个)碳原子任选地被-O-、-NRX-C(＝O)-或-C(＝O)-NRX-置换，并且其中RX是氢或(C1-C6)烷基。


14.如权利要求1-11中任一项所述的缀合物或盐，其中L1是：
-C(＝O)N(H)-CH2CH2OCH2CH2OCH2CH2-，
-C(＝O)N(H)-CH2CH2OCH2CH2OCH2CH2OCH2CH2-，
-C(＝O)N(CH3)-CH2CH2OCH2CH2OCH2CH2-，或
-C(＝O)N(CH3)-CH2CH2OCH2CH2OCH2CH2OCH2CH2-。


15.如权利要求1-14中任一项所述的缀合物或盐，其中L2是具有0至20个碳原子的二价、无支链、饱和烃链，其中所述烃链中的一个或多个(例如，1、2、3或4个)碳原子任选地被-O-、-NRX-、-NRX-C(＝O)-、-C(＝O)-NRX-或-S-置换，并且其中RX是氢或(C1-C6)烷基，并且其中所述烃链任选地被一个或多个选自氧代基(＝O)和卤基的取代基取代。


16.如权利要求1-14中任一项所述的缀合物或盐，其中L2是具有0至12个碳原子的二价、无支链、饱和烃链，其中所述烃链中的一个或多个(例如，1、2、3或4个)碳原子任选地被-O-、-NRX-C(＝O)-或-C(＝O)-NRX-置换，并且其中RX是氢或(C1-C6)烷基。


17.如权利要求1-14中任一项所述的缀合物或盐，其中L2是：
-C(＝O)N(H)-CH2CH2OCH2CH2OCH2CH2-，
-C(＝O)N(H)-CH2CH2OCH2CH2OCH2CH2OCH2CH2-，
-C(＝O)N(CH3)-CH2CH2OCH2CH2OCH2CH2-，或
-C(＝O)N(CH3)-CH2CH2OCH2CH2OCH2CH2OCH2CH2-。


18.如权利要求1-17中任一项所述的缀合物或盐，其中R1是：



其中：
X是NR20并且Y选自-(C＝O)R21、-SO2R22和-(C＝O)NR23R24；或X是-(C＝O)-并且Y是NR25R26；或X是-NR37R38并且Y不存在
R20是氢或(C1-C4)烷基；
R21、R22、R23、R24、R25和R26各自独立地选自由氢、(C1-C8)烷基、(C1-C8)烷氧基和(C3-C6)环烷基组成的组，其中任何(C1-C8)烷基、(C1-C8)烷氧基和(C3-C6)环烷基任选地被一个或多个独立地选自由卤基、(C1-C4)烷基和(C1-C4)烷氧基组成的组的基团取代；
R27是-OH、-NR25R26或-F；
R28是-OH、-NR25R26或-F；
R29是-OH、-NR25R26、-F、-N3、-NR35R36或5元杂环，所述5元杂环任选地被一个或多个独立地选自由卤基、羟基、羧基、氨基、(C1-C4)烷基、芳基和(C1-C4)烷氧基组成的组的基团取代，其中任何(C1-C4)烷基和(C1-C4)烷氧基任选地被一个或多个独立地选自由卤基组成的组的基团取代，并且其中任何芳基任选地被一个或多个独立地选自由卤基、羟基、硝基、氰基、氨基、(C1-C8)烷基、C1-C8)烷氧基、(C1-C8)烷酰基、(C1-C8)烷氧基羰基、(C1-C8)烷酰氧基和(C3-C6)环烷基组成的组的基团取代，其中任何(C1-C8)烷基、(C1-C8)烷氧基、(C1-C8)烷酰基、(C1-C8)烷氧基羰基、(C1-C8)烷酰氧基和(C3-C6)环烷基任选地被一个或多个独立地选自由卤基、(C1-C4)烷基和(C1-C4)烷氧基组成的组的基团取代；
每个R35和R36独立地选自由氢、(C1-C8)烷基、(C1-C8)烷氧基和(C3-C6)环烷基组成的组，其中任何(C1-C8)烷基、(C1-C8)烷氧基和(C3-C6)环烷基任选地被一个或多个独立地选自由卤基和(C1-C4)烷氧基组成的组的基团取代；或R35和R36与它们所连接的氮一起形成5-6元杂芳基环，所述杂芳基环任选地被一个或多个独立地选自由(C1-C8)烷基、(C1-C8)烷氧基、芳基和(C3-C6)环烷基组成的组的基团取代，其中任何芳基和(C3-C6)环烷基任选地被一个或多个基团R39取代；
每个R37和R38独立地选自由氢、(C1-C8)烷基、(C1-C8)烷氧基、(C1-C8)烷酰基、(C1-C8)烷氧基羰基、(C1-C8)烷酰氧基和(C3-C6)环烷基组成的组，其中任何(C1-C8)烷基、(C1-C8)烷氧基、(C1-C8)烷酰基、(C1-C8)烷氧基羰基、(C1-C8)烷酰氧基和(C3-C6)环烷基任选地被一个或多个独立地选自由卤基、(C1-C4)烷基和(C1-C4)烷氧基组成的组的基团取代；或R37和R38与它们所连接的氮一起形成5-8元杂环，所述5-8元杂环任选地被一个或多个独立地选自由卤基、羟基、羧基、氨基、氧代基(＝O)、(C1-C4)烷基和(C1-C4)烷氧基组成的组的基团取代，其中任何(C1-C4)烷基和(C1-C4)烷氧基任选地被一个或多个独立地选自卤基的基团取代；并且
每个R39独立地选自由(C1-C8)烷基、(C1-C8)烷氧基和(C3-C6)环烷基组成的组，其中任何(C1-C8)烷基、(C1-C8)烷氧基和(C3-C6)环烷基任选地被一个或多个独立地选自卤基的基团取代。


19.如权利要求1-17中任一项所述的缀合物或盐，其中R1是：





20.如权利要求1-17中任一项所述的缀合物或盐，其中R1是：





21.如权利要求1-17中任一项所述的缀合物或盐，其中R1是：








22.如权利要求1-15中任一项所述的缀合物或盐，其中R1是：





23.如权利要求1-22中任一项所述的缀合物或盐，其中R2是：



其中：
X是NR20并且Y选自-(C＝O)R21、-SO2R22和-(C＝O)NR23R24；或X是-(C＝O)-并且Y是NR25R26；或X是-NR37R38并且Y不存在
R20是氢或(C1-C4)烷基；
R21、R22、R23、R24、R25和R26各自独立地选自由氢、(C1-C8)烷基、(C1-C8)烷氧基和(C3-C6)环烷基组成的组，其中任何(C1-C8)烷基、(C1-C8)烷氧基和(C3-C6)环烷基任选地被一个或多个独立地选自由卤基、(C1-C4)烷基和(C1-C4)烷氧基组成的组的基团取代；
R27是-OH、-NR25R26或-F；
R28是-OH、-NR25R26或-F；
R29是-OH、-NR25R26、-F、-N3、-NR35R36或5元杂环，所述5元杂环任选地被一个或多个独立地选自由卤基、羟基、羧基、氨基、(C1-C4)烷基、芳基和(C1-C4)烷氧基组成的组的基团取代，其中任何(C1-C4)烷基和(C1-C4)烷氧基任选地被一个或多个独立地选自由卤基组成的组的基团取代，并且其中任何芳基任选地被一个或多个独立地选自由卤基、羟基、硝基、氰基、氨基、(C1-C8)烷基、C1-C8)烷氧基、(C1-C8)烷酰基、(C1-C8)烷氧基羰基、(C1-C8)烷酰氧基和(C3-C6)环烷基组成的组的基团取代，其中任何(C1-C8)烷基、(C1-C8)烷氧基、(C1-C8)烷酰基、(C1-C8)烷氧基羰基、(C1-C8)烷酰氧基和(C3-C6)环烷基任选地被一个或多个独立地选...

【专利技术属性】
技术研发人员：詹姆斯·海斯，理查德·J·霍兰德，洛恩·拉尔夫·帕尔默，马克·伍德，
申请(专利权)人：阿布特斯生物制药公司，
类型：发明
国别省市：加拿大;CA