【技术实现步骤摘要】
一种PKEK融合蛋白及制备方法与应用
本专利技术属于基因工程领域，特别涉及一种PKEK融合蛋白及制备方法与应用。
技术介绍
专利申请W0/2008/08M94和W0/2009/068351中描述了一种新型的美白多肽PKEK，体外细胞实验证实人角质细胞在紫外线UVB照射下，PKEK可有效减少白介素-6、白介素-8和TNF-a的表达，并显著降低色素沉淀调控子(α-MSH)的表达。在另外一组随机双盲人体皮肤功效测试试验中，10名健康受试者每天一次连续使用PKEK四周后，与对照组相比，紫外线UVB照射下PKEK受试组皮肤白介素-1α、白介素-6、白介素-8、肿瘤坏死因子-α以及酪氨酸酶表达显著下调；39名高加索地区女性将PKEK与维他命C磷酸钠合用6周后，面部斑点明显褪去，而单独使用PKEK或维他命C磷酸钠斑点褪去均不显著；由此可见，上述体内和体外实验均可证实PKEK能够有效减少因户外紫外线导致的面部色素沉淀。目前PKEK主要采用液相合成或固相合成方法(SPPS)生产，由于化学合成所用的原料赖氨酸和谷氨酸侧链均要进行保护，转...
【技术保护点】
1.一种PKEK融合蛋白，其特征在于：包括将若干美白多肽PKEK与柔性连接肽依次串联构成的蛋白，其结构式如下：(PKEK-B)n；B为柔性连接肽；n为1～30的整数。/n
【技术特征摘要】
1.一种PKEK融合蛋白，其特征在于：包括将若干美白多肽PKEK与柔性连接肽依次串联构成的蛋白，其结构式如下：(PKEK-B)n；B为柔性连接肽；n为1～30的整数。
2.根据权利要求1所述的PKEK融合蛋白，其特征在于：所述的PKEK融合蛋白的结构式如下：A–Dd-(PKEK-B)n；其中：A为伴侣蛋白；D为蛋白酶酶切位点；B为柔性连接肽；n为1～30的整数；d为0～10的整数。
3.根据权利要求2所述的PKEK融合蛋白，其特征在于：
所述的柔性连接肽为如Xm---X2-X1所示的肽序列，X1为蛋白酶酶切位点，X2至Xm为柔性片段，m为0～10的整数；
所述的伴侣蛋白为KSI、PagP、PaP3.30、TAF12、GDF15、GYGB、mKSI、mPagP、mPaP3.30、mGDF15、mGYGB和mTAF12中的一种或两种以上形成的组合，m表示突变体。
4.根据权利要求3所述的PKEK融合蛋白，其特征在于：
所述的蛋白酶酶切位点为Arg或Lys；
所述的m为0时，所述的d不能为0或是所述的n不能为1；
所述的柔性片段中的氨基酸不能为Pro、Thr或Trp。
5.根据权利要求4所述的PKEK融合蛋白，其特征在于：
所述的n为10～30；
所述的m为2～9的整数；
所述的柔性片段中的氨基酸为Gly、Ala或Ser；
所述的d为1～5。
6.根据权利要求1～5任一项所述的PKEK融合蛋白，其特征在于：
所述的柔性连接肽为AK、GK、AAK、AAGK、AAGGK、GGAAK、GGSASK或AAGGSGAGK。
7.根据权利要求6所述的PKEK融合蛋白，其特征在于：
所述的伴侣蛋白为TAF12或是TAF12与其他伴侣蛋白融合形成的伴侣蛋白时，所述的柔性连接肽为AK、GK、AAK、AAGK、AAGGK或GGAAK；
所述的伴侣蛋白为KSI或是KSI与其他伴侣蛋白融合形成的伴侣蛋白时，所述的柔性连接肽为AK、GK、AAK、AAGK、AAGGK或GGAAK；
所述的伴侣蛋白为PagP或是PagP与其他伴侣蛋白融合形成的伴侣蛋白时，所述的柔性连接肽为AK、GK、AAK、AAGK、AAGGK、GGAAK或GGSASK。
8.一种编码权利要求1～7任一项所述的PKEK融合蛋白的基因。
9.一种重组载体，其特征在于：含有权利要求8所述的基因；是将权利要求要求8所述的基因克隆入表达载体得到。
10.一种重组表达菌株，其特征在于：含有权利要求9所述的重组载体。
11.权利要求1～5任一项所述...
【专利技术属性】
技术研发人员：杨晓纯，曹春来，刘合栋，李素雯，李张万金，梁雄基，樊昌，梁芷瑜，周翠，何秀仪，黄国周，郭凤羽，张鹏，
申请(专利权)人：珠海联邦制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44
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