醇脱氢酶突变体及其在环状萜烯酮合成中的应用制造技术

本发明专利技术涉及醇脱氢酶突变体及其在环状萜烯酮合成中的应用。具体涉及一种催化性能明显提高的醇脱氢酶突变体、其编码核酸，含有该核酸序列的重组表达载体和重组表达转化体，以及利用该醇脱氢酶突变体或重组表达转化体催化羟基化合物脱氢反应，特别是催化羟基位于3‑和6‑位的环状萜烯醇的脱氢反应，以制备环状萜烯酮的应用。与野生型醇脱氢酶相比，本发明专利技术所述醇脱氢酶突变体对系列羟基化合物的脱氢反应活性均有一定幅度的提高，所述醇脱氢酶的突变体具有很好的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
醇脱氢酶突变体及其在环状萜烯酮合成中的应用
本专利技术属于生物工程
，具体涉及一种催化性能明显提高的醇脱氢酶突变体、其编码核酸，含有该核酸序列的重组表达载体和重组表达转化体，以及利用该醇脱氢酶突变体或重组表达转化体催化羟基化合物脱氢反应，特别是催化羟基位于3-和6-位的环状萜烯醇的脱氢反应，以制备环状萜烯酮的应用。
技术介绍
L-(-)-薄荷醇也叫左旋薄荷脑，常温下为液体，水溶性较差，具有清凉的风味和一定香气，常被用在酒类、调味品、口腔保健品、化妆品等产品加工中(Phytochemistry,2013,96:15-25)。在自然界中，(-)-薄荷醇存在于薄荷植物叶片的油腺分泌细胞中，可通过萃取、常压蒸馏等手段得到(Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A,1999,97:2934-2939)。近几年来薄荷醇消耗量逐年大幅度上升，至2018年(-)-薄荷醇年消耗量达到约4万吨(Anhui.Chem.Ind.,2018)，其中约70％的(-)-薄荷醇是从植物薄荷蒸馏所得，受天气、土地和人力等因素影响极大。约有30％的(-)-薄荷醇是通本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种醇脱氢酶突变体，其特征在于，是将如SEQ ID No.2所示氨基酸序列的95位谷氨酸、97位谷氨酸、154位甲硫氨酸、189位缬氨酸、191位天冬氨酸、194位甲硫氨酸、195苯丙氨酸、199位酪氨酸、208位苯丙氨酸中的一个或多个氨基酸残基替换为其他氨基酸残基所形成的新氨基酸序列对应的蛋白质，同时，所述衍生蛋白质具有高于SEQ ID No.2所示氨基酸序列组成的蛋白质的催化性能和稳定性。/n

【技术特征摘要】
1.一种醇脱氢酶突变体，其特征在于，是将如SEQIDNo.2所示氨基酸序列的95位谷氨酸、97位谷氨酸、154位甲硫氨酸、189位缬氨酸、191位天冬氨酸、194位甲硫氨酸、195苯丙氨酸、199位酪氨酸、208位苯丙氨酸中的一个或多个氨基酸残基替换为其他氨基酸残基所形成的新氨基酸序列对应的蛋白质，同时，所述衍生蛋白质具有高于SEQIDNo.2所示氨基酸序列组成的蛋白质的催化性能和稳定性。


2.如权利要求1所述的醇脱氢酶突变体，其特征在于，其是由下述任一氨基酸序列组成的蛋白质：
(1)将如SEQIDNo.2所示氨基酸序列的第95位谷氨酸替换为缬氨酸；
(2)将如SEQIDNo.2所示氨基酸序列的第95位谷氨酸替换为苯丙氨酸；
(3)将如SEQIDNo.1所示氨基酸序列的第97位谷氨酸替换为甲硫氨酸；
(4)将如SEQIDNo.2所示氨基酸序列的第154位甲硫氨酸替换为组氨酸；
(5)将如SEQIDNo.2所示氨基酸序列的第189位缬氨酸替换为色氨酸；
(6)将如SEQIDNo.2所示氨基酸序列的第189位缬氨酸替换为异亮氨酸；
(7)将如SEQIDNo.2所示氨基酸序列的第191位天冬氨酸替换为缬氨酸；
(8)将如SEQIDNo.2所示氨基酸序列的第194位甲硫氨酸替换为赖氨酸；
(9)将如SEQIDNo.2所示氨基酸序列的第194位甲硫氨酸替换为天冬酰胺；
(10)将如SEQIDNo.2所示氨基酸序列的第195位苯丙氨酸替换为色氨酸；
(11)将如SEQIDNo.2所示氨基酸序列的第195位苯丙氨酸替换为甲硫氨酸；
(12)将如SEQIDNo.2所示氨基酸序列的第199位酪氨酸替换为缬氨酸；
(13)将如SEQIDNo.2所示氨基酸序列的第199位酪氨酸替换为组氨酸；
(14)将如SEQIDNo.2所示氨基酸序列的第95位谷氨酸替换为缬氨酸，第208位苯丙氨酸替换为组氨酸；
(15)将如SEQIDNo.2所示氨基酸序列的第97位谷氨酸替换为甲硫氨酸，第154位甲硫氨酸替换为组氨...

【专利技术属性】
技术研发人员：李春秀，占静茹，寿超，陈琦，许建和，潘江，钱小龙，
申请(专利权)人：华东理工大学，苏州百福安酶技术有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31