一种测定利伐沙班及其杂质的分析方法技术

本发明专利技术涉及分析化学技术领域，具体涉及一种采用高效液相色谱法分离及准确测定利伐沙班杂质的分析方法。本发明专利技术基于高效液相色谱法，采用合适的色谱条件，保证各杂质之间的分离度，对于本发明专利技术条件下难以分离的杂质N和杂质K，采用双坡长的方式，结合两者在两个特定波长下的峰面积、相对于主峰的校正因子来对两个难以分离的杂质进行准确定量。难以分离的杂质进行准确定量。难以分离的杂质进行准确定量。

【技术实现步骤摘要】
一种测定利伐沙班及其杂质的分析方法


[0001]本专利技术涉及分析化学
，具体涉及一种采用高效液相色谱法分离及准确测定利伐沙班杂质的分析方法。

技术介绍

[0002]利伐沙班一种高选择性直接抑制因子Xa的口服抗凝药。利伐沙班于2014年在中国上市，商品名为利伐沙班化学名称为5
‑
氯
‑
N
‑
(((5S)
‑2‑
氧代
‑3‑
(4
‑
(3
‑
氧代吗啉
‑4‑
基)苯基)
‑
1,3
‑
恶唑啉
‑5‑
基)甲基)噻吩
‑2‑
甲酰胺，分子式为C
19
H
18
ClN3O5S，分子量为435.88，结构式如下：
[0003][0004]批准适应症主要有以下三种：1、用于择期髋关节或膝关节置换手术成年患者，以预防静脉血栓形成(VTE)；2、用于治疗成人深静脉血栓形成(DVT)和肺栓塞(PE)，在完成至少6个月初始治疗后DVT和/或PE复发风险持续存在的患者中，用于降低DVT和/或PE复发的风险；3、用于具有一种或多种危险因素(例如：充血性心力衰竭、高血压、年龄≥75岁、糖尿病、卒中或短暂性脑缺血发作病史)的非瓣膜性房颤成年患者，以降低卒中和体循环栓塞的风险。
[0005]利伐沙班在化学合成过程中，工艺过程中的中间体、工艺杂质、原料存放过程中产生的降解杂质及制剂工艺制备过程中也会引入相关杂质，因此对有机杂质的质量控制，对于产品本身的安全性极为重要。
[0006]利伐沙班生产过程中产的杂质较多，其中有的杂质性质相近，在液相条件下不易分离，因而对利伐沙班的质量控制带来困难。为了保证使各杂质之间的分离度，普遍采用缓冲盐溶液作为流动相，采用合适的色谱条件可以使利伐沙班及其各杂质之间的分离度较好。
[0007]中国专利申请CN106442831A公开了一种高效液相色谱同时检测利伐沙班片有关物质的方法，色谱条件为：色谱柱以十八烷基键合硅胶为填充剂，以乙腈
‑
缓冲盐(含磷酸盐和离子对试剂)为流动相进行梯度洗脱，以紫外检测器为检测器。
[0008]中国专利申请CN107941936A公开了一种分离测定利伐沙班及其杂质的方法及应用。用于分离测定利伐沙班及其杂质的试剂组合物为：稀释剂：乙腈
‑
酸的水溶液；流动相A：含有甲醇和乙腈的缓冲盐溶液；流动相B：缓冲盐溶液和乙腈的混合液。
[0009]中国专利申请CN108152412A公开了一种用液相色谱法分离测定利伐沙班及其有关物质的方法，该方法以十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，以含有缓冲盐、离子对试剂及磷酸的水溶液和有机相混合作为流动相，通过梯度洗脱分离测定。
[0010]中国专利申请CN109142601A公开了一种分离利伐沙班中间体及其杂质的方法。用于分离利伐沙班中间体Z2及其杂质的试剂组合物为：稀释剂：乙腈
‑
缓冲盐溶液；流动相A：含有乙腈的缓冲盐溶液；流动相B：乙腈。
[0011]中国专利申请CN110057942A公开了一种利伐沙班及其制剂的有关物质的检测方法，其是采用高效液相色谱法，选用色谱柱，以磷酸水溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，进行梯度洗脱，检测波长为250nm，完成有关物质的检测。
[0012]可以看出，在利伐沙班及其相关杂志的检测中，优选的流动相为缓冲盐溶液，但是缓冲盐溶液和高浓度有机相混合时有盐析的风险，而盐析可能导致色谱柱堵塞，且缓冲盐溶液的配制相对成本较高，操作要求严格。
[0013]而且，不同工艺也会引入不同的工艺杂质，因此需要一种操作简单、有效的利伐沙班及其杂质的测定方法。

技术实现思路

[0014]本专利技术的目的是提供一种操作简单且可以准确定量检测利伐沙班及其杂质的分析方法。
[0015]一种测定利伐沙班及其杂质的分析方法，所述方法是使用高效液相色谱在双波长下对利伐沙班及其杂质进行检测。
[0016]进一步地，所述杂质包括下式中的至少一种，
[0017][0018]进一步地，所述双波长分别为245
‑
255nm和285
‑
295nm。
[0019]具体波长选择要求为，所述波长范围内，杂质N的吸光度数值相差在
±
0.5％范围内，优选地，杂质N在两波长下的吸光度相等，更优选地，选择双波长分别为250nm和289nm，此时杂质N在本专利技术条件下双波长的吸光度相等。
[0020]进一步地，所述高效液相色谱的色谱条件为采用C8柱，流动相由流动相A和流动相B组成，其中流动相A为甲酸水溶液
‑
乙腈，流动相B为乙腈，采用梯度洗脱。
[0021]进一步地，所述C8柱填料粒径为3.5
‑
5μm，优选为5μm；内径为3.0
‑
4.6mm，优选为4.6mm；柱长为100
‑
200mm优选为150mm。
[0022]进一步地，所述C8柱为Waters Sunfire C8，4.6mm
×
150mm，5μm。
[0023]进一步地，所述流动相A中，甲酸水溶液的体积分数为0.05
‑
0.10％，优选为0.08％甲酸水溶液，所述流动相B为100％乙腈。
[0024]进一步地，所述流动相中，按体积比计，流动相A：流动相B＝60
‑
90:40
‑
10；流速为0.8
‑
1.2mL/min，优选为1.0mL/min；进样量为5
‑
10μL，优选为10μL；柱温为35
‑
45℃，优选为40℃。
[0025]进一步地，所述梯度洗脱程序为
[0026]时间(分钟)流动相A(体积％)流动相B(体积％)09010207525306634406634459010509010
[0027]。
[0028]进一步地，所述高效液相色谱条件为，使用岛津LC
‑
20A
‑
DAD液相色谱仪，
[0029]色谱柱：Waters Sunfire C8(4.6mm
×
150mm，5μm)；
[0030]检测波长：250nm，289nm；
[0031]流速：1.0ml/min；
[0032]柱温：40℃；
[0033]流动相A：0.08％甲酸水溶液：乙腈＝90:10；流动相B：乙腈，进行梯度洗脱
[0034]时间(分钟)流动相A(体积％)流动相B(体积％)09010207525306634406634459010509010
[0035]一种基于上述检测方法对所述杂质N和杂质K的定量方法，
[0036]杂质K含量＝1.本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种测定利伐沙班及其杂质的分析方法，所述方法是使用高效液相色谱在双波长下对利伐沙班及其杂质进行检测，所述双波长分别为245
‑
255nm和285
‑
295nm。2.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，所述杂质包括下式中的至少一种，3.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，所述双波长分别250nm和289nm。4.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，所述高效液相色谱的色谱条件为采用C8柱，流动相由流动相A和流动相B组成，其中流动相A为甲酸水溶液
‑
乙腈，流动相B为乙腈，采用梯度洗脱。5.根据权利要求4述的分析方法，其特征在于，所述所述C8柱填料粒径为3.5
‑
5μm，优选为5μm；内径为3.0
‑
4.6mm，优选为4.6mm；柱长为100
‑
200mm优选为150mm。6.根据权利要求5所述的分析方法，其特征在于，所述C8柱为Waters Sunfire C8，4.6mm
×
150mm，5μm。7.根据权利要求4所述的分析方法，其特征在于，所述流动相A中，甲酸水溶液的体积分数为0.05
‑
0.10％，优选为0.08％甲酸水溶液；所述流动相B为100％乙腈；流动相A：流动相B＝60
‑
90:40
‑
10；流速为0.8
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1.2mL/min，优选为1.0mL/min；进样量为5
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10μL，优选为10μL；柱温为35
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45℃，优选为40℃。8.根据权利要求4所述的分析方法，其特征在于，所述梯度洗脱程序为时间(分钟)流动相A(体积％)流动相B(体积％)09010
2075253066344066344...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨勇，赵颖，
申请(专利权)人：上海普康药业有限公司，
类型：发明
国别省市：