一种以山楂为基质培育虫草菌种的方法技术

一种以山楂为基质培育虫草菌种的方法，是以山楂果和山楂枝叶为主要原料，以市售的蛹虫草菌种为菌源，将虫草菌种经过多个阶段的驯化培育，培育出适合在山楂基质良好生长的虫草菌种。通过实施本发明专利技术，用山楂、玉竹粉和玉米粉组成营养丰富、全面的培基质，虫草菌丝在这样的营养滋养下生长迅猛、菌丝粗壮，虫草子实体个体也生长粗壮，生物转化率高。通过实施本发明专利技术，将虫草试管菌种、虫草液体菌种、培育虫草子实体的工序上进行几个阶段的培训驯化，主要是从培养基质中的山楂内含物逐量增加和PH逐步降低来进行驯化，让虫草菌丝从逐步适应到完全适应在山楂培养基生长，最终让山楂培养基质中长出高品质、高产量的虫草子实体。

【技术实现步骤摘要】
一种以山楂为基质培育虫草菌种的方法
本专利技术属于一种菌种的制备
，具体涉及到一种以山楂为基质培育虫草菌种的方法。
技术介绍
山楂果，果实酸甜可口，能生津止渴，亦可入药，入药归脾、胃、肝经，有消食化积、活血散瘀的功效，可食用部分76％。据测定，山楂含有18种氨基酸，特别是维生素C的含量较高，达到89毫克/100克，比苹果高17倍，比梨高30倍。此外，每100g中含能量397kJ,水分73g、蛋白质0.5g、脂肪0.6g、膳食纤维3.1g、碳水化合物22g、胡萝卜素100μg、维生素A17μg、硫胺素0.02mg、核黄素0.02mg、尼克酸0.4mg、维生素C53mg、维生素E7.32mg、钾299mg、钠5.4mg、钙52mg、镁19mg、铁0.9mg,锰0.24mg、锌0.28mg、铜0.11mg、磷24mg、硒1.22μg，还含有山楂酸、黄酮、SOD等生物活性物质和营养成分，尚含解脂酶、鞣质等以及对大肠杆菌、绿脓杆菌、痢疾杆菌有抑制作用的成分。山楂中果胶含量居所有水果之首，达6.4％，而据最新研究，果胶有防辐射物质的作用，它能从体内带走一半的放射性元素(锶、钴、钯等)。果胶还有吸附和抗菌性质，可从肠子上去除细菌、毒素并束缚住水分，因此，可治泻肚。山楂中含有的牡荆素等化合物具有抗癌作用，常用山楂有利于防癌。山楂中还含有丰富的钙和胡萝卜素，钙含量居水果之首，胡萝卜素的含量仅次于枣和猕猴桃，最适于小儿食用。山楂可单味或与其他食物、药物配伍以提高其食疗作用。山楂由于山楂富含多种有机酸，能保持山楂中的维生素C，即使在加热的情况下，也不致被破坏，所以，制成山楂糕等制品后，维生素C仍能保存。山楂还富含胡萝卜素、钙、齐墩果酸、鸟素酸、山楂素等三萜类烯酸和黄酮类等有益成分(黄酮类多聚黄烷、三聚黄烷、鞣质等多种化学成分)，能舒张血管、加强和调节心肌，增大心室和心运动振幅及冠状动脉血流量，降低血清胆固醇和降低血压；此外，山楂对心脏活动功能障碍、血管性神经官能症、颤动性心律失常等症也有辅助治疗作用；山植还含有槲皮苷，它有扩张血管、促进气管纤毛运动、排痰平喘之功能，故山楂是防治心血管病的理想保健食品和有较好疗效的食品，可用于用于高血压、高血脂、冠心病等的防治，均有较好效果。山楂有重要的药用价值，自古以来，就成为健脾开胃、消食化滞、活血化痰的良药。山楂以果实作药用，性微温，味酸甘，入脾、胃、肝经，有消食健胃、活血化淤、收敛止痢之功能。对肉积痰饮、痞满吞酸、泻痢肠风、腰痛疝气、产后儿枕痛、恶露不尽、小儿乳食停滞等，均有疗效。另外，山楂叶的产量和果实的产量是同等的，一株能产100斤山楂果实的山楂树株亦可产100斤的山楂叶子。可见，山楂叶的原料资源也十分丰富。目前山楂叶除了自然落地腐烂，就只是当作柴火焚烧，尚未对其进行有效的开发利用。2005年1月山西大学生命科学与技术学院的李晓玲、张小民等作者在《山西林业》发表了“山楂叶的营养及开发价值”一文中。对山楂叶的营养成分及作用功效做了比较详细的阐述，如下为该文的主要内容：①山楂叶的氨基酸组成：山楂叶中含有17种氨基酸，其中天冬氨酸、谷氨酸、丙氨酸、胱氨酸、异亮氨酸含量远高于山楂果实，各种氨基酸的总含量是山楂叶比山楂果高36.38％。同一山楂叶样品不同，其氨基酸的含量高低顺序大致为：谷＞亮、天脯、酪＞组、蛋＞胱。组成人体蛋白质的氨基酸共有20种，其中有8种在人体内不能合成，必须由食物供给，故称必须氨基酸。山楂果中有17种氨基酸，其中包括人体必须的8种氨基酸。一般树叶中氨基酸含量，幼叶高于成熟叶，新采集的高于较长时间存放的。氨基酸是组成人和动物肌体蛋白质及维持正常代谢不可缺少的营养成分，具有重要的生理作用。②山楂叶的微量元素：孙树英先生对山楂叶和山楂果的25种元素进行了测定，结果表明，山楂叶中所含的Ca、Mg、K、P以及山楂叶中所含的Fe、A1属于常量，其余元素均属于微量。山楂叶中多数元素的含量高于山楂果。Be、Bi、Pb、Cd、As、Hg的含量均甚微。山楂叶中的残留有害成分六六六、DDT、砷、铜和铅的含量均低于国家食品卫生标准值，对人体无毒害。最近有人分析总结了60个类型心血管疾病的死亡率，发现sr、Ca、Mg、Li、Si等可降低此类疾病的死亡率，其作用机制可能与上述元素在肠内与Na竞争吸收部位，从而减少Na的吸收及增加Na的排泄有关，而体内Na过多与高血压等心血管疾病有关。因此，我们认为，山楂果和山楂叶对高血压、冠心病、心绞痛等心血管疾病有治疗作用，除黄酮类成分外，还可能与Sr、Ca、Mg、K的高含量和Na的低含量有关。山楂叶中含有一定量的Mn(45.5mg/kg)。据报道，缺锰与动脉硬化有关。锰能改善动脉粥样硬化病人脂质的代谢，有去脂作用。因此，这可能是山楂果和山楂叶降血脂、防治动脉粥样硬化症的原因之一。山楂的叶子中含有相当量的P(2150mg/kg)、Fe(420mg/kg)和Zn(682mg/kg，这些元素都是人体所需要的。可见，山楂叶中有益元素的含量高于或接近于山楂果中的含量。此外，氨基酸的总含量也是山楂叶(10.30％)高于山楂果(2.40％)，同时还含有多种黄酮类成分，对心血管疾病具有显著疗效。现代研究表明，微量元素与人体的生命活动有着极其重要的生理和病理意义，对维持人体健康极为重要。山楂叶不仅资源丰富，而且是微量元素的天然宝库。我们认为，山楂叶和银杏叶相类似，也应加以开发利用。③山楂叶的Vc含量：成熟期山楂叶Vc含量为820mg～1224mg/1009，是果实的10倍左右(89mg/1009)。从5月到11月落叶前，其Vc含量呈上升趋势，落地的棕色叶片，其Vc含量极低。11月初Vc含量最高，这时正是山楂果的收获季节，为不影响山楂果的生长和产量，可在收果后采收叶子。维生素c可促进胶原蛋白的合成。胶原蛋白是构成结缔组织的重要蛋白质，从而加速伤口的愈合，防止小血管出血。同时，Vc可促进肾上腺皮质素合成、铁的吸收和抗体生成。Vc易与致癌物亚硝胺结合，有防癌的效应。缺乏Vc时，会引起毛细血管变脆，通透性增大，从而引起皮下、黏膜、肌肉、牙龈等处出血，以及骨折等。④山楂叶的VBl和VB2含量：山楂叶中含有VBl(0.04mg/100g)、VB2(0.08mg/100g)和尼克酸(0.06mg/1009)。VB1是维持神经系统正常活动的重要部分，也是糖代谢的辅酶之一。缺乏VB1，易患脚气、下肢沉重、手足皮肤麻木、心跳加快、心脏扩大、心力衰竭等病症。VB2能促使伤口和感染恢复，是维持眼睛健康的必要成分，在氧化作用中起辅酶的作用。VB2缺乏时，主要症状表现为唇炎、舌炎、口角炎、角膜炎、阴囊炎等。尼克酸在人体受伤、发热、呕吐、腹泻、肠道病和怀孕时供应能量，同时帮助皮肤维持正常的功能，并在许多生物反应中活化能源。⑤山楂叶黄酮含量：山楂叶中总黄酮含量为3.18％～9.17％，其中牡荆素的含量为8.705mg/g。牡荆素是黄酮类化合物中有效的天然生物活性成分之一，具有良好的抗癌作用。山楂叶含有芦丁、金丝桃苷、槲皮素、牡荆素等多种黄酮类化合物。药理及临床实验表明：山楂叶黄酮类化合本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种以山楂为基质培育虫草菌种的方法，其特征在于包括如下步骤：/n(1)第一阶段试管菌种培育：准备850-900毫升清水、100-150毫升新鲜山楂果汁、玉竹粉20-30克、玉米粉20-30克、葡萄糖20-30克、琼脂粉15-20克，将上述各种物料一并放入加热容器中，然后加热至各种物料完全溶解于水中得基质液，将基质液的PH调到7.5-8.5后分装于试管中，接着灭菌、摆斜面得斜面试管，在无菌环境下将蛹虫草菌种接入斜面试管中，并在15-20度及暗光环境下培养至虫草菌丝长满管，再将长满虫草菌丝的试管放置于在20-25度及见光环境下培养至虫草菌丝转成桔黄色得第一阶段试管菌种；/n(2)第一阶段液体菌种培育：准备750-800毫升清水、200-250毫升新鲜山楂果汁、玉竹粉50-60克、葡萄糖20-30克、蛋白胨5-6克，将上述各种物料一并放入加热容器中，然后加热至各种物料完全溶解于水中得营养液，将营养液的PH调到6.5-7.5后分装于液体菌种培养容器中并灭菌得到液体菌种培养基，在无菌环境下将步骤(1)中培养而得的第一阶段试管菌种接到液体菌种培养基中，最后在15-20度及暗光环境下通过深层发酵培养至液体菌种培养基长满菌球或菌丝得第一阶段液体菌种；/n(3)第一阶段子实体培育：准备650-700毫升清水、300-350毫升新鲜山楂果汁、玉竹粉50-60克、葡萄糖20-30克、蛋白胨5-6克，将上述各种物料一并放入加热容器中，然后加热至各种物料完全溶解于水中得营养液，并将营养液的PH调到6-7备用；取糯米50-70份、山楂果渣15-20份、山楂枝叶粉碎物10-25份、蚕蛹粉3-5份，将糯米、山楂果渣、山楂枝叶粉碎物、蚕蛹粉混合起来得混合物料，再把营养液拌入混合物料中，把混合物料的含水量调整到55-60％得培养基质，把培养基质分装到培养容器中并灭菌，在无菌环境下将步骤(2)中培育得到的第一阶段液体菌种接到培养基质中，并将接好种的培养基质放置在温度是15-20度、湿度是70-75％及暗光环境下培养至虫草菌丝长满培养料，接着将长满虫草菌丝的培养基质放置于在温度是20-25度、湿度是80-90％及见光环境下培养至虫草菌丝转成桔黄色，最后在温度是20-25度、湿度是80-90％及见光环境下培养至虫草子实体长成；/n(4)第二阶段试管菌种培育：550-600毫升清水、400-450毫升新鲜山楂果汁、玉竹粉20-30克、葡萄糖20-30克、磷酸二氢钾2-3克、硫酸镁1-2克、蛋白胨5-6克、琼脂粉15-20克，将上述各种物料一并放入加热容器中，然后加热至各种物料完全溶解于水中得基质液，将基质液的PH调到5.5-6后分装于试管中，接着灭菌、摆斜面得斜面试管，在无菌环境下将步骤(3)中培育得到的第一阶段蛹虫草子实体分离到斜面试管中，并在15-20度及暗光环境下培养至虫草菌丝长满管，再将长满虫草菌丝的试管放置于在20-25度及见光环境下培养至虫草菌丝转成桔黄色得第二阶段试管菌种；/n(5)第二阶段液体菌种培育：450-500毫升清水、500-550毫升新鲜山楂果汁、玉竹粉50-60克、葡萄糖20-30克、蛋白胨5-6克，将上述各种物料一并放入加热容器中，然后加热至各种物料完全溶解于水中得营养液，将营养液的PH调到5-5.5后分装于液体菌种培养容器中并灭菌得液体菌种培养基，在无菌环境下将步骤(4)中培养而得的第二阶段试管菌种接到液体菌种培养基中，最后在15-20度及暗光环境下通过深层发酵培养至液体菌种培养基长满菌球或菌丝得第二阶段液体菌种；/n(6)第二阶段子实体培育：350-400毫升清水、600-650毫升新鲜山楂果汁、玉竹粉50-60克、葡萄糖20-30克、蛋白胨5-6克，将上述各种物料一并放入加热容器中，然后加热至各种物料完全溶解于水中得营养液，并将营养液的PH调到4.5-5备用；取山楂果渣50-70份、山楂枝叶粉碎物20-25份、糯米10-20份、蚕蛹粉3-5份，将山楂果渣、山楂枝叶粉碎物、糯米、蚕蛹粉混合起来得混合物料，再把营养液拌入混合物料中，把混合物料的含水量调整到55-60％得培养基质，把培养基质分装到培养容器中并灭菌，在无菌环境下将步骤(5)中培育得到的第二阶段液体菌种接到培养基质中，并将接好种的培养基质放置在温度是15-20度、湿度是70-75％及暗光环境下培养至虫草菌丝长满培养料，接着将长满虫草菌丝的培养基质放置于在温度是20-25度、湿度是80-90％及见光环境下培养至虫草菌丝转成桔黄色，最后在温度是20-25度、湿度是80-90％及见光环境下培养至虫草子实体长成；/n(7)第三阶段试管菌种培育：650-700毫升新鲜山楂果汁、300-350毫升清水、玉竹粉20-30克、葡萄糖20-30克、磷酸二氢钾2-3克、硫酸镁1-2克、蛋白胨5...

【技术特征摘要】
1.一种以山楂为基质培育虫草菌种的方法，其特征在于包括如下步骤：
(1)第一阶段试管菌种培育：准备850-900毫升清水、100-150毫升新鲜山楂果汁、玉竹粉20-30克、玉米粉20-30克、葡萄糖20-30克、琼脂粉15-20克，将上述各种物料一并放入加热容器中，然后加热至各种物料完全溶解于水中得基质液，将基质液的PH调到7.5-8.5后分装于试管中，接着灭菌、摆斜面得斜面试管，在无菌环境下将蛹虫草菌种接入斜面试管中，并在15-20度及暗光环境下培养至虫草菌丝长满管，再将长满虫草菌丝的试管放置于在20-25度及见光环境下培养至虫草菌丝转成桔黄色得第一阶段试管菌种；
(2)第一阶段液体菌种培育：准备750-800毫升清水、200-250毫升新鲜山楂果汁、玉竹粉50-60克、葡萄糖20-30克、蛋白胨5-6克，将上述各种物料一并放入加热容器中，然后加热至各种物料完全溶解于水中得营养液，将营养液的PH调到6.5-7.5后分装于液体菌种培养容器中并灭菌得到液体菌种培养基，在无菌环境下将步骤(1)中培养而得的第一阶段试管菌种接到液体菌种培养基中，最后在15-20度及暗光环境下通过深层发酵培养至液体菌种培养基长满菌球或菌丝得第一阶段液体菌种；
(3)第一阶段子实体培育：准备650-700毫升清水、300-350毫升新鲜山楂果汁、玉竹粉50-60克、葡萄糖20-30克、蛋白胨5-6克，将上述各种物料一并放入加热容器中，然后加热至各种物料完全溶解于水中得营养液，并将营养液的PH调到6-7备用；取糯米50-70份、山楂果渣15-20份、山楂枝叶粉碎物10-25份、蚕蛹粉3-5份，将糯米、山楂果渣、山楂枝叶粉碎物、蚕蛹粉混合起来得混合物料，再把营养液拌入混合物料中，把混合物料的含水量调整到55-60％得培养基质，把培养基质分装到培养容器中并灭菌，在无菌环境下将步骤(2)中培育得到的第一阶段液体菌种接到培养基质中，并将接好种的培养基质放置在温度是15-20度、湿度是70-75％及暗光环境下培养至虫草菌丝长满培养料，接着将长满虫草菌丝的培养基质放置于在温度是20-25度、湿度是80-90％及见光环境下培养至虫草菌丝转成桔黄色，最后在温度是20-25度、湿度是80-90％及见光环境下培养至虫草子实体长成；
(4)第二阶段试管菌种培育：550-600毫升清水、400-450毫升新鲜山楂果汁、玉竹粉20-30克、葡萄糖20-30克、磷酸二氢钾2-3克、硫酸镁1-2克、蛋白胨5-6克、琼脂粉15-20克，将上述各种物料一并放入加热容器中，然后加热至各种物料完全溶解于水中得基质液，将基质液的PH调到5.5-6后分装于试管中，接着灭菌、摆斜面得斜面试管，在无菌环境下将步骤(3)中培育得到的第一阶段蛹虫草子实体分离到斜面试管中，并在15-20度及暗光环境下培养至虫草菌丝长满管，再将长满虫草菌丝的试管放置于在20-25度及见光环境下培养至虫草菌丝转成桔黄色得第二阶段试管菌种；
(5)第二阶段液体菌种培育：450-500毫升清水、500-550毫升新鲜山楂果汁、玉竹粉50-60克、葡萄糖20-30克、蛋白胨5-6克，将上述各种物料一并放入加热容器中，然后加热至各种物料完全溶解于水中得营养液，将营养液的PH调到5-5.5后分装于液体菌种培养容器中并灭菌得液体菌种培养基，在无菌环境下将步骤(4)中培养而得的第二阶段试管菌种接到液体菌种培养基中，最后在15-20度及暗光环境下通过深层发酵培养至液体菌种培养基长满菌球或菌丝得第二阶段液体菌种；
(6)第二阶段子实体培育：350-400毫升清水、600-650毫升新鲜山楂果汁、玉竹粉50-60克、葡萄糖20-30克、蛋白胨5-6克，将上述各种物料一并放入加热容器中，然后加热至各种物料完全溶解于水中得营...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁忠茂，农彦，
申请(专利权)人：广西靖西梁鹏食品有限公司，
类型：发明
国别省市：广西;45