磺内酰胺-环己酮螺环衍生物1-3-51在制备治疗胃癌药物中的应用制造技术

本发明专利技术涉及磺内酰胺‑环己酮螺环衍生物1‑3‑51在制备治疗胃癌药物中的应用，所述药物显著抑制FOXM1的表达以及胃癌细胞的增殖、侵袭及迁移，干扰FOXM1后，其抑制增殖，侵袭及迁移能力降低。

【技术实现步骤摘要】
磺内酰胺-环己酮螺环衍生物1-3-51在制备治疗胃癌药物中的应用
本专利技术属于医药
，特别涉及磺内酰胺-环己酮螺环衍生物1-3-51在制备治疗胃癌药物中的应用。
技术介绍
胃癌(GastricCancerGC)是世界上常见消化系统恶性肿瘤之一，其高发病率和高死亡率已使其成为全世界特别是发展中国家人类公共卫生的一个重大问题，严重危害人体健康和浪费社会资源。目前50％的胃癌是在东亚确诊的，其中大部分病例发生在中国。而全球胃癌发病率和死亡率也在稳步上升，据2018年全球癌症统计，胃癌的发病率居世界第五位，死亡率居世界第三位，预计到2020年和2030年，胃癌将成为全球15大主要死因之一。尽管近年来胃癌的综合治疗取得一定的进展，但胃癌患者5年总体生存率仍很低，不到30％。究其原因，我国大多数胃癌患者初次诊断时已处于进展期，治疗方法有限，主要通过手术结合化疗方式，且有较高的复发率和转移率，胃癌细胞化疗耐药也是胃癌患者预后差的重要原因之一。因此，研究新型胃癌靶向治疗药物至关重要，对改善胃癌患者的治疗和预后有着十分重要的意义。叉头盒蛋白M1(ForkheadboxM1，FOXM1)是Forkhead超家族中的成员之一，是一类具有特定“翼状螺旋结构”DNA结合域的转录因子，包括FOXA、FOXC、FOXM、FOXO和FOXP等几个家族，Forkhead家族广泛参与了生命发生发展的过程，如胚胎发生、增殖、分化、凋亡、转化、肿瘤发生、寿命和代谢稳态，并且在细胞增殖和细胞周期进程中具有明确的作用，与肿瘤的发生也密切相关，其中FOXM1在2010年被评为年度分子。研究表明，FOXM1在多种肿瘤，如乳腺癌、肺癌、肝癌、骨肉瘤、鼻咽癌、喉癌、胃癌、卵巢癌等中普遍上调，肿瘤基因表达谱分析也证实FOXM1是人类恶性肿瘤中表达上调最频繁的基因之一。在胃癌中，FOXM1通路的活化及异常表达与胃癌患者的恶性生物学行为和不良预后密切相关，因此FOXM1被认为是预防和治疗人类癌症的一个潜在靶点。已有研究盐屋霉素A通过抑制FOXM1的表达进而抑制其下游靶基因Bcl-2和Mcl-1的表达以及caspase-3的裂解等来诱导细胞凋亡，硫链丝菌肽在2008年也首次被报道用作FOXM1的抑制剂，它可以干扰FOXM1与DNA结合从而干扰下游靶点的转录。同时研究表明盐屋霉素A还可以抑制母系胚胎亮氨酸拉链蛋白激酶(MELK)，硫链丝菌肽也可以靶向Peroxiredoxin3，但它们靶向FOXM1的特异性不高，临床应用受限。因此，寻找新型靶向FOXM1的小分子药物显得尤为重要。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种磺内酰胺-环己酮螺环衍生物1-3-51(下称化合物1-3-51)在制备治疗胃癌药物中的应用，该药物显著抑制FOXM1的表达以及胃癌细胞的增殖、侵袭及迁移，干扰FOXM1后，其抑制增殖，侵袭及迁移能力降低。本专利技术的技术方案是：磺内酰胺-环己酮螺环衍生物1-3-51在制备治疗胃癌药物中的应用。所述磺内酰胺-环己酮螺环衍生物的的分子式为C24H21NO3S2，结构式为：所述药物为叉头盒蛋白M1的抑制剂。所述药物抑制胃癌细胞中FOXM1的表达。所述药物抑制FOXM1下游靶基因CyclinD1、MMP9的表达。所述药物通过FOXM1抑制胃癌细胞BGC823、MKN45生长迁移和侵袭。所述药物采用腹腔注射方式给药。所述药物用量为0.5～5mg/日/公斤。申请人通过化学合成方法学的研究构建了许多结构新颖的分子骨架。其中，部分化合物的复杂分子结构具有类天然产物的特征，表现出潜在的“类药性”。在前期开展的合成方法学研究中，发展了一类高选择性的不对称[3+3]环化反应，构建了一系列磺内酰胺-环己酮螺环衍生物。在对这类产物进行普遍生物活性评价的过程中，申请人发现其中的代表化合物1-3-51可有效抑制胃癌细胞的增殖和侵袭迁移，促进凋亡，进一步的机制研究发现其显著抑制FOXM1的表达，提示1-3-51可能是一个新型FOXM1小分子抑制剂，为靶向FOXM1小分子抑制剂的设计提供一定的理论基础与思路。申请人采用CCK-8试剂盒检测1-3-51处理后的BGC823和MKN45细胞IC50；Westernblot检测胃癌细胞FOXM1表达；RT-qPCR检测胃癌细胞FOXM1及其下游分子CyclinD1和MMP9mRNA表达；流式细胞术测定周期情况；Transwell实验检测胃癌细胞迁移和侵袭能力；在胃癌细胞BGC823、MKN45中转染FOXM1shRNA质粒及其空载质粒，CCK8实验、Transwell实验分别检测胃癌细胞活性、迁移及侵袭等的变化。实验验证，本专利技术所述化合物1-3-51在胃癌细胞中可通过抑制FOXM1表达及其下游靶基因CyclinD1和MMP9等分子的表达，进而降低胃癌细胞增殖、迁移、侵袭能力，为靶向FOXM1的新型小分子抗癌药物提供新思路。附图说明图1为1-3-51在胃癌细胞中降低FOXM1蛋白及mRNA水平；其中，图1A：1-3-51的化学结构；图1B：1-3-51分别处理BGC823、MKN45细胞48h后采用CCK8测OD450值；图1C：不同浓度1-3-51处理BGC823、MKN45细胞后FOXM1蛋白及mRNA的表达情况；图1D：时间梯度1-3-51处理BGC823、MKN45细胞后FOXM1蛋白及mRNA的表达情况。图2为1-3-51在胃癌细胞中降低FOXM1下游靶基因CyclinD1、MMP9的mRNA水平的表达；其中，图2A：浓度梯度1-3-51处理BGC823、MKN45细胞后FOXM1下游靶基因CyclinD1及MMP9mRNA的表达情况；图2B：时间梯度1-3-51处理BGC823、MKN45细胞后FOXM1下游靶基因CyclinD1及MMP9mRNA的表达情况；图3为检测1-3-51对胃癌细胞生长周期、迁移及侵袭的影响；其中，图3A：与DMSO组比，流式细胞术测定细胞周期；图3B：与DMSO组比，Transwell实验检测细胞迁移及侵袭；图4为检测1-3-51对BGC823细胞中FOXM1部分敲除细胞增殖、迁移及侵袭的变化，其中，图4A：Westernblot检测BGC823细胞中FOXM1敲降后FOXM1蛋白表达变化；图4B：CCK-8实验检测1-3-51对BGC823FOXM1敲降前后细胞增殖能力变化；图4C：Transwell实验检测1-3-51BGC823FOXM1敲降前后细胞胞迁移及侵袭变化。具体实施方式本实施例所用试剂：人胃癌细胞株BGC823、MKN45购买自上海富衡生物；高糖DMEM培养基、RPMI1640培养基购自美国HyClone公司；胎牛血清购自美国Gibco公司；抗人FOXM1抗体购自美国CellSignalTechnology公司；抗人TUBULIN一抗，HRP标记的山羊抗兔、山羊抗鼠二抗，CCK8试剂盒、BCA蛋本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.磺内酰胺-环己酮螺环衍生物1-3-51在制备治疗胃癌药物中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.磺内酰胺-环己酮螺环衍生物1-3-51在制备治疗胃癌药物中的应用。


2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述磺内酰胺-环己酮螺环衍生物的分子式为C24H21NO3S2。


3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述药物为叉头盒蛋白M1的抑制剂。


4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述药物抑制胃癌细胞中FOXM1的表达。


5.根据权...

【专利技术属性】
技术研发人员：欧阳勤，古晶，王纳，高梦圆，陈应春，胡长江，杨仕明，
申请(专利权)人：中国人民解放军陆军军医大学，
类型：发明
国别省市：重庆;50