一种工程化线粒体及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及线粒体制剂技术领域，具体涉及一种工程化线粒体及其制备方法和应用。使用脂质体挤出器将修饰有DSPE‑PEG‑RGD的间充质干细胞制备为细胞匀浆，细胞匀浆经过差速离心获得工程化线粒体。工程化线粒体包括细胞膜外壳和包裹在细胞膜外壳内的线粒体，细胞膜外壳上嵌入有DSPE‑PEG‑RGD，含有线粒体膜蛋白及细胞膜蛋白，具有高的线粒体膜电位，在体内具有靶向功能。本技术方案可以解决现有技术中的线粒体治疗的靶向性以及活性不理想的技术问题，可以进一步适用于其他细胞来源的脂质膜包裹的线粒体及不同短肽修饰的脂质膜包裹的线粒体的制备。本法具有成本低、耗时短、操作简单、产量高的特点，采用本方法可获得结构完整、活性高、可抵抗恶劣病理微环境、具有靶向功能的工程化线粒体。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及线粒体制剂，具体涉及一种工程化线粒体及其制备方法和应用。

技术介绍

1、脑卒中是全世界致死致残的首位原因，其中缺血性，目前对它的治疗策略首先是通过溶栓或者取栓实现再灌注治疗，其次为促进神经重塑及功能康复。但目前的治疗效果差，大部分患者遗留严重功能障碍。缺血性卒中后的病理生理机制主要与细胞代谢异常相关，如线粒体受损、过度氧化应激、炎症、细胞凋亡等，严重阻碍卒中后神经系统的重塑。研究表明，内皮细胞中约85％以上的能量是靠糖酵解提供的，但线粒体的功能改变也与内皮细胞的增殖、迁移、细胞命运转变等密切相关。病理条件下，采用健康线粒体融合或替换原受损线粒体可挽救宿主细胞受损线粒体的功能，重编程宿主细胞的代谢，改变宿主细胞的命运。游离线粒体对缺血再灌注局部的病理微环境抵抗力差，而由膜包裹的线粒体对缺血再灌注局部的高ros、高钙微环境的抵抗力更强，线粒体活性更高。不带靶向功能的线粒体很少被地送到病灶区域，大部分被肺、肝、脾等脏器拦截，因此要想提高线粒体治疗的效果，需提高其活性及靶向性。如何有效提高线粒体治疗的靶向性以及活性，是现目前针对脑卒中治疗方法研究中的本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种工程化线粒体的制备方法，其特征在于：通过挤压法将修饰有靶向分子的间充质干细胞制备为细胞匀浆，细胞匀浆经过差速离心获得工程化线粒体。

2.根据权利要求1所述的一种工程化线粒体的制备方法，其特征在于：所述靶向分子为RGD；修饰有靶向分子的间充质干细胞的制备方法为：在间充质干细胞中加入终浓度为50μg/ml的DSPE-PEG-RGD，然后共孵育12-24h。

3.根据权利要求1所述的一种工程化线粒体的制备方法，其特征在于：挤压法通过脂质体挤出器实现。

4.根据权利要求1所述的一种工程化线粒体的制备方法，其特征在于：脂质体挤出器挤出孔径为3μm；脂质体...

【技术特征摘要】

1.一种工程化线粒体的制备方法，其特征在于：通过挤压法将修饰有靶向分子的间充质干细胞制备为细胞匀浆，细胞匀浆经过差速离心获得工程化线粒体。

2.根据权利要求1所述的一种工程化线粒体的制备方法，其特征在于：所述靶向分子为rgd；修饰有靶向分子的间充质干细胞的制备方法为：在间充质干细胞中加入终浓度为50μg/ml的dspe-peg-rgd，然后共孵育12-24h。

3.根据权利要求1所述的一种工程化线粒体的制备方法，其特征在于：挤压法通过脂质体挤出器实现。

4.根据权利要求1所述的一种工程化线粒体的制备方法，其特征在于：脂质体挤出器挤出孔径为3μm；脂质体挤出器的挤出次数为5次。

5.根据权利要求4所述的一种工程化线粒体的制备方法，其特征在于：差速离心的方法为...

【专利技术属性】
技术研发人员：曾文，张巧，许商成，王悦颖，
申请(专利权)人：中国人民解放军陆军军医大学，
类型：发明
国别省市：