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【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于橙花叔醇制备领域,具体地,涉及一种酿酒酵母摇瓶发酵生产橙花叔醇的方法。
技术介绍
1、橙花叔醇分子式为c15h26o。无色至草黄色糖浆状油性液体状,具有弱的甜清柔美的橙花气息,带有像玫瑰、铃兰和苹果花的气息。香气持久。橙花叔醇来源于橙花精油、橙花叔醇绿花白千层、秘鲁香脂、香脂果豆木等植物,在cptg等级的依兰依兰、肉桂、罗勒、苦橙叶、生姜等精油中也有少量。橙花叔醇的气味像苹果和玫瑰的混合香气,微带一点点木质香味。所以,橙花叔醇可用于配制玫瑰型、紫丁香型等香精。持久性好,有一定的协调性能和定香作用。熏香橙花叔醇有很好的镇静情绪和使内心安定的特性。实验中发现,橙花叔醇有很强大的抗癌特性,遇到癌细胞时,可以启动细胞凋亡程序,让肿瘤自行凋亡。
2、酿酒酵母是传统的生物技术生物,也是第一个完成全部基因组测序的真核生物,代谢机制较为清楚。同时安全性高,被fda确认为安全生物。在过去的三十年中已经被设计来表达了多种重组蛋白,如胰岛素和胰高血糖素就是使用酿酒酵母作为宿主而工业生产出来的。
3、酿酒酵母常用的培养基有sc培养基、ypd培养基和sd培养基。
4、sc培养基可配置成sc-ura培养基,是合成和筛选培养基,用于筛选尿嘧啶营养缺陷型的酿酒酵母,是尿嘧啶营养缺陷型培养基。
5、ypd培养基是一种用于培养酵母的完全培养基,常用于酿酒酵母、毕赤酵母等酵母的培养。ypd培养基中酵母提取物提供b类维生素以及酵母生长所需的全部氨基酸。蛋白胨提供氮源和氨基酸,葡萄糖提供碳源。
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7、中国专利202210110119.9公开的解脂耶氏酵母工程菌sbt02-26的反式橙花叔醇的产量为930mg/l,但并没有对培养体系进行优化,并其所用ypd培养基成分复杂,成本高。目前橙花叔醇微生物合成,并没有考虑到培养基配置难度、培养基成本等,所以需要提供一种提高橙花叔醇摇瓶中发酵产量,降低发酵成本,为后期橙花叔醇大规模的生产提供基础的方法。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是克服现有技术的不足,提供一种酿酒酵母摇瓶发酵生产橙花叔醇的方法。
2、本专利技术的技术方案概述如下:
3、一种酿酒酵母摇瓶发酵生产橙花叔醇的方法,包括如下步骤:
4、(1)酿酒酵母种子培养;
5、(2)摇瓶发酵培养:将步骤(1)制备得到的种子液,按0.5%-2%比例接种于30ml摇瓶发酵培养基中,25-32℃、180-240rpm摇床培养,开始发酵;
6、(3)诱导与萃取:发酵到30h时,加终浓度为5-20g/l半乳糖为诱导剂;同时添加终体积浓度为5%-20%萃取剂,进行边发酵边萃取;
7、(4)补料:在边发酵边萃取到36h,60h,84h时,添加终浓度为5-20g/l无水乙醇;
8、(5)继续发酵;
9、所述摇瓶发酵培养基包括:葡萄糖10-30g/l、硫酸铵1-10g/l、磷酸二氢钾5-15g/l、七水硫酸镁3-8g/l、亮氨酸1-10g/l、微量金属溶液5-20ml/l、维生素溶液5-20ml/l,溶剂为蒸馏水。
10、萃取剂优选为肉豆蔻酸异丙酯、聚ɑ烯烃pao8、油酸甲酯或十二烷。
11、本专利技术的一种酿酒酵母摇瓶发酵生产橙花叔醇的方法采用摇瓶发酵培养基进行发酵,培养基成份简单清晰,原料成本低,大大提高了橙花叔醇在摇瓶发酵中的产量,使酿酒酵母工业化生产橙花叔醇得以实现。
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1.一种酿酒酵母摇瓶发酵生产橙花叔醇的方法,其特征在于,包括如下步骤:
2.根据权利要求1所述的方法,其特征是所述萃取剂为肉豆蔻酸异丙酯、聚ɑ烯烃PAO8、油酸甲酯或十二烷。
【技术特征摘要】
1.一种酿酒酵母摇瓶发酵生产橙花叔醇的方法,其特征在于,包括如下步骤:
2.根据权...
【专利技术属性】
技术研发人员:李伟国,郁庄,乔建军,鲁亮,罗春威,卢立夏,梁冬梅,
申请(专利权)人:天津大学浙江研究院绍兴,
类型:发明
国别省市:
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