一种大肠杆菌发酵培养基及发酵培养方法和应用技术

本发明专利技术提供一种大肠杆菌发酵培养基及发酵培养方法和应用，所述发酵培养基包括如下组分：植物源蛋白胨20～50g/L、碳源20～50g/L、磷酸盐10～25g/L、钠盐5～10g/L和镁盐0.1～1g/L。同时，本发明专利技术还提供一种大肠杆菌的发酵培养方法，利用所述发酵培养基进行发酵，克服了使用植物源蛋白胨时出现的高密度低表达的情况，能够实现大肠杆菌的高密度培养，且蛋白表达量较高；并且植物源蛋白胨价格低廉，无潜在的病毒污染风险，因此，所述发酵培养基在疫苗、抗体和干扰素等生物制药领域具有广泛的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一种大肠杆菌发酵培养基及发酵培养方法和应用
本专利技术属于发酵
，具体涉及一种大肠杆菌发酵培养基及发酵培养方法，尤其涉及一种大肠杆菌高密度发酵培养基及利用该培养基进行高密度发酵的培养方法和应用。
技术介绍
发酵工程是指采用工程技术手段，利用生物(主要是微生物)和有活性的离体酶的某些功能，为人类生产有用的生物产品，或直接用微生物参与控制某些工业生产过程的一种技术。人们熟知的利用酵母菌发酵制造啤酒、果酒、工业酒精，乳酸菌发酵制造奶酪和酸牛奶，利用真菌大规模生产青霉素等都是这方面的例子。随着科学技术的进步，发酵技术也有了很大的发展，并且已经进入能够人为控制和改造微生物，使这些微生物为人类生产产品的现代发酵工程阶段。现代发酵工程作为现代生物技术的一个重要组成部分，具有广阔的应用前景。例如，用基因工程的方法有目的地改造原有的菌种并且提高其产量；利用微生物发酵生产药品，如人的胰岛素、干扰素和生长激素等。近几年，人们对高密度发酵进行研究并取得了较大的进展。实现高密度、高产率和高密度培养是目前发酵工业的目标和方向。对于大肠杆菌，尤其是重组大肠杆菌本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种大肠杆菌发酵培养基，其特征在于，所述大肠杆菌发酵培养基包括如下组分：/n

【技术特征摘要】
1.一种大肠杆菌发酵培养基，其特征在于，所述大肠杆菌发酵培养基包括如下组分：





2.根据权利要求1所述的大肠杆菌发酵培养基，其特征在于，所述植物源蛋白胨包括玉米干浆粉、玉米浸粉、马铃薯浸粉、豆粕提取物、大豆蛋白胨、小麦蛋白胨或棉籽蛋白胨中的任意一种或至少两种的组合，优选为玉米干浆粉；
优选地，所述碳源包括甘油和/或葡萄糖，优选为葡萄糖；
优选地，所述磷酸盐包括磷酸氢二钾和/或磷酸二氢钾；
优选地，所述钠盐包括氯化钠；
优选地，所述镁盐包括硫酸镁，优选为七水硫酸镁。


3.根据权利要求1或2所述的大肠杆菌发酵培养基，其特征在于，所述大肠杆菌发酵培养基由如下组分组成：





4.一种大肠杆菌的发酵培养方法，其特征在于，所述发酵培养方法中使用如权利要求1～3任一项所述的大肠杆菌发酵培养基作为发酵培养基。


5.根据权利要求4所述的发酵培养方法，其特征在于，所述发酵培养方法包括如下步骤：
(1)将大肠杆菌活化后接种于一级种子培养基中，振荡培养得到一级种子液；
(2)将所述一级种子液转接至二级种子培养基中，振荡培养得到二级种子液；
(3)将所述二级种子液转接至发酵培养基中，发酵，所述发酵过程中调节pH并加入补料培养基，继续培养；
优选地，所述一级种子培养基包括LB培养基；
优选地，所述二级种子培养基包括：玉米浆干粉10～30g/L、磷酸氢二钾10～25g/L、氯化钠5～10g/L、七水硫酸镁0.1～1g/L和甘油5～20g/L；
优选地，所述补料培养基包括甘油200～500g/L和七水硫酸镁1～10g/L；
优选地，所述补料培养基还包括玉米浆干粉1～200g/L。


6.根据权利要求5所述的发酵培养方法，其特征在于，步骤(1)所述大肠杆菌包括表达烟酰胺磷酸核糖转移酶和/或烟酰胺单核苷酸腺苷转移酶的重组大肠杆菌；
优选地，步骤(1)所述活化的温度为30～37℃，时间为16～24h；
优选地，步骤(1)所述振荡培养的温度为30～37℃，时间为6～12h；...

【专利技术属性】
技术研发人员：李斌，徐飞，邵凡涛，祝俊，马晶晶，何九乐，
申请(专利权)人：江苏诚信药业有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32