一种重组氧化葡糖杆菌工程菌及其合成米格列醇中间体的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种重组氧化葡糖杆菌工程菌及其合成米格列醇中间体的应用，所述重组氧化葡糖杆菌工程菌是将透明颤菌血红蛋白基因vhb和山梨醇脱氢酶基因sldAB共同转入宿主菌构建而成；所述宿主菌为氧化葡糖杆菌。本发明专利技术中重组氧化葡糖杆菌生长速率及最终山梨醇脱氢酶活力均有提升，利用静息细胞生产6‑脱氧‑6‑氨基(N‑羟乙基)‑α‑L‑呋喃山梨糖显示出了较高的催化能力，单批次在24h内可催化合成96.1g/L的6NSL，相比于专利CN110016455A所构建的G.oxydans/pBBR‑sldAB，同样条件下6NSL的产量提高了9.5％。

【技术实现步骤摘要】
一种重组氧化葡糖杆菌工程菌及其合成米格列醇中间体的应用(一)
本专利技术涉及一种米格列醇中间体的制备，特别涉及一种双基因共表达的重组氧化葡糖杆菌工程菌及其应用，尤其是通过利用静息细胞催化生产米格列醇中间体6-脱氧-6-氨基(N-羟乙基)-α-L-呋喃山梨糖(6NSL)。(二)
技术介绍
米格列醇(Miglitol)是1-脱氧野尻霉素的N-羟乙基衍生物，是一种新型小肠α-葡萄糖苷酶抑制剂，是治疗II型糖尿病的主导药物之一。其化学名1-(2-羟乙基)-2-(羟甲基)-3,4,5-哌啶三醇；沸点：246.0℃，熔点：-20℃，其分子结构式下：目前合成米格列醇通常采用生物与化学组合法：以N-羟乙基葡萄糖胺(NHEG)为底物，利用氧化葡糖杆菌(Gluconobacteroxydans)生物催化为6-脱氧-6-氨基(N-羟乙基)-α-L-呋喃山梨糖(6NSL)，然后通过加氢还原得到米格列醇。该方法具有生产路线短，成本较低等明显优势。利用G.oxydans催化NHEG为6NSL的反应是米格列醇合成的关键步骤。而催化反应的完成需本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种重组氧化葡糖杆菌工程菌，其特征在于所述重组氧化葡糖杆菌工程菌是将透明颤菌血红蛋白基因vhb和山梨醇脱氢酶基因sldAB共同转入宿主菌构建而成；所述宿主菌为氧化葡糖杆菌。/n

【技术特征摘要】
1.一种重组氧化葡糖杆菌工程菌，其特征在于所述重组氧化葡糖杆菌工程菌是将透明颤菌血红蛋白基因vhb和山梨醇脱氢酶基因sldAB共同转入宿主菌构建而成；所述宿主菌为氧化葡糖杆菌。


2.如权利要求1所述重组氧化葡糖杆菌工程菌，其特征在于所述宿主菌为氧化葡糖杆菌(Gluconobacteroxydans)CCTCCNO.M208069。


3.如权利要求1所述重组氧化葡糖杆菌工程菌，其特征在于所述透明颤菌血红蛋白基因vhb核苷酸序列为SEQIDNO.1所示。


4.如权利要求1所述重组氧化葡糖杆菌工程菌，其特征在于所述山梨醇脱氢酶基因sldAB核苷酸序列为SEQIDNO.3所示。


5.如权利要求1所述重组氧化葡糖杆菌工程菌，其特征在于重组氧化葡糖杆菌工程菌的构建采用SEQIDNO.5所示核苷酸序列为gHp0169启动子，SEQIDNO.6所示核苷酸序列为终止子。


6.一种权利要求1所述重组氧化葡糖杆菌工程菌在催化N-羟乙基葡萄糖胺合成6-脱氧-6-氨基(N-羟乙基)-α-L-呋喃山梨糖中的应用。


7.如权利要求6所述的应用，其特征在于所述的应用为：以重组氧化葡糖杆菌工程菌经发酵培养获得的湿菌体为催化剂，以N-羟乙基葡萄糖胺为底物，以MgSO4为辅助底物，以水为反应介质，调节pH2-6，构成转化体系，在10-30℃、100-220rpm条件下反应完全后，获得含6-脱氧-6-氨基(N-羟乙基)-α-L-呋喃山梨糖的反应...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡忠策，刘东，柯霞，郑裕国，
申请(专利权)人：浙江工业大学，
类型：发明
国别省市：浙江;33