一种产5-氨基乙酰丙酸的巴氏葡萄球菌工程菌株及其构建方法技术

本发明专利技术公开了一种产5‑氨基乙酰丙酸的巴氏葡萄球菌工程菌株，其与作为出发菌的巴氏葡萄球菌相比，5‑氨基乙酰丙酸的产量提高。本发明专利技术还提供产5‑氨基乙酰丙酸的巴氏葡萄球菌工程菌株的构建方法，以及其在制备5‑氨基乙酰丙酸中的应用。本发明专利技术构建的产5‑氨基乙酰丙酸的巴氏葡萄球菌工程菌株生产5‑氨基乙酰丙酸的产量最高达到96.84mg/L，具有较大的经济价值。

【技术实现步骤摘要】
一种产5-氨基乙酰丙酸的巴氏葡萄球菌工程菌株及其构建方法
本专利技术涉及一种产5-氨基乙酰丙酸的巴氏葡萄球菌工程菌株及其构建方法，属于生物技术和代谢工程领域。
技术介绍
5-氨基乙酰丙酸(5-aminolevulinicacid，ALA)是生物体合成叶绿素、血红素和维生素B12等四吡咯类化合物的必需前体，对植物光合作用和细胞能量代谢具有重要作用。5-氨基乙酰丙酸可广泛用于农业和医药领域。在农业领域，5-氨基乙酰丙酸作为新型的植物生长调节剂、绿色除草剂和无毒杀虫剂等发挥着重要作用。在临床医学中，5-氨基乙酰丙酸作为一种疗效极高、副作用极小的光动力学药物，应用于多种癌症的诊断和治疗。目前5-氨基乙酰丙酸的生产仍依赖于化学合成，不但成本高、产率低，而且污染环境，大大限制了5-氨基乙酰丙酸的可持续生产。随着现代生物技术的快速发展，越来越多的高附加值化合物开始利用微生物发酵技术实现经济、高效、可持续的发展模式。微生物发酵生产5-氨基乙酰丙酸具有原材料低廉、产品生物活性高和环保可持续等优势，已成为5-氨基乙酰丙酸生产发展的必然趋势。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种产5-氨基乙酰丙酸的巴氏葡萄球菌工程菌株，其特征在于：所述产5-氨基乙酰丙酸的巴氏葡萄球菌工程菌株通过提高作为出发菌的巴氏葡萄球菌中的谷氨酰tRNA还原酶/谷氨酰-1-半醛氨基转移酶/异柠檬酸脱氢酶/磷酸果糖激酶中任一种的表达量或含量或活性得到，其与作为出发菌的巴氏葡萄球菌相比，5-氨基乙酰丙酸的产量提高。/n

【技术特征摘要】
1.一种产5-氨基乙酰丙酸的巴氏葡萄球菌工程菌株，其特征在于：所述产5-氨基乙酰丙酸的巴氏葡萄球菌工程菌株通过提高作为出发菌的巴氏葡萄球菌中的谷氨酰tRNA还原酶/谷氨酰-1-半醛氨基转移酶/异柠檬酸脱氢酶/磷酸果糖激酶中任一种的表达量或含量或活性得到，其与作为出发菌的巴氏葡萄球菌相比，5-氨基乙酰丙酸的产量提高。


2.根据权利要求1所述的产5-氨基乙酰丙酸的巴氏葡萄球菌工程菌株，其特征在于：所述产5-氨基乙酰丙酸的巴氏葡萄球菌工程菌株按照权利要求3-7中任一所述的方法构建。


3.产5-氨基乙酰丙酸的巴氏葡萄球菌工程菌株的构建方法，其特征在于：包括A1或A2：
A1提高作为出发菌的巴氏葡萄球菌中谷氨酰tRNA还原酶/谷氨酰-1-半醛氨基转移酶/异柠檬酸脱氢酶/磷酸果糖激酶中任一种的编码基因的表达量；
A2在作为出发菌的所述巴氏葡萄球菌中导入谷氨酰tRNA还原酶/谷氨酰-1-半醛氨基转移酶/异柠檬酸脱氢酶/磷酸果糖激酶中任一种的编码基因。


4.根据权利要求3所述的构建方法，其特征在于：所述出发菌为PK8，所述PK8在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的登记入册编号为CGMCCNo.16178。


5.根据权利要求3或4所述的方法，其特征在于：所述产5-氨基乙酰丙酸的巴氏葡萄球菌工程菌株通过重组载体将含有谷氨酰tRNA还原酶/谷氨酰-1-半醛氨基转移酶/异柠檬酸脱氢酶/磷酸果糖激酶中任一种的编码基因的重组表达载体导入所述出发菌中实现。


6.根据权利要求3-5中任一所述的方法，其特征在于：所述谷氨酰tRNA还原酶为氨基酸序列是序列表中序列7的蛋白质；
所述谷氨酰-1-半醛氨基转移酶为氨基酸序列是序列表中序列8或序列9的蛋白质；
所述异柠檬酸脱氢酶为氨基酸序列是序列表中序列10的蛋白质；
所述磷酸果糖激酶为氨基酸序列是序列表中序列11的蛋白质。

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【专利技术属性】
技术研发人员：袁红莉，苏安平，罗莹，杨金水，
申请(专利权)人：中国农业大学，
类型：发明
国别省市：北京;11