阻断异嗜性人IgM反应性的单克隆抗体及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种阻断异嗜性人IgM反应性的单克隆抗体VH的CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:1‑3所示的氨基酸序列，VL的CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:5‑7所示的氨基酸序列。并公开了其制备方法。本发明专利技术通过噬菌体展示的方法筛选出一种全新的高效封闭异嗜性人IgM反应性的抗体。一方面得到的抗体序列可读，可以通过亲和力成熟的方法再次提高结合力和稳定性，另一方面利用CHO细胞高密度悬浮培养生产重组抗体产量高、成本低、批间差小、尤其是与以往的封闭剂都需要使用大量小鼠生产腹水进行生产相比具有明显的动物福利优势。并且为后期开发复合Fc亚型的主被动混合型的高效封闭异嗜性人IgM反应性的抗体提供了序列基础。

【技术实现步骤摘要】
阻断异嗜性人IgM反应性的单克隆抗体及其制备方法
本专利技术涉及一种阻断异嗜性人IgM反应性的单克隆抗体及其制备方法，属于医学免疫领域。
技术介绍
异嗜性抗体(HA)是由已知的或未知的抗原物质刺激人体产生的一类具有足够滴度、能与多个物种的免疫球蛋白发生相对弱的结合的多重特异性的免疫球蛋白。异嗜性抗体的产生通常是由于人类直接接触到动物、污染的食品、未经高温消毒的鲜奶和免疫疗法或者接种来源于动物血清或组织的疫苗产品后产生。据研究证实，在健康人群中，约3％～15％体内含异嗜性抗体，这些异嗜性抗体经常引起测值的假阳性，严重干扰免疫检测试剂的结果。常见的异嗜性抗体有人自身类风湿因子(RF)和人抗小鼠抗体(HAMA)等。人自身类风湿因子(RF)可以与人自身的免疫球蛋白(IG)结合，同时也可以与动物免疫球蛋白交叉反应，从而引起RF干扰。RF因子分为IgM、IgA、IgG、IgD、IgE五型，其中70～80％为IgM型。人抗小鼠抗体(HAMA)可以特异性的结合小鼠抗体。目前免疫诊断试剂中的单克隆抗体基本都是小鼠来源，所以HAMA引起的干本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种阻断异嗜性人IgM反应性的单克隆抗体，其特征在于：VH的CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:1-3所示的氨基酸序列，VL的CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:5-7所示的氨基酸序列。/n

【技术特征摘要】
1.一种阻断异嗜性人IgM反应性的单克隆抗体，其特征在于：VH的CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQIDNO:1-3所示的氨基酸序列，VL的CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQIDNO:5-7所示的氨基酸序列。


2.根据权利要求1所述的阻断异嗜性人IgM反应性的单克隆抗体，其特征在于：所述VH具有SEQIDNO:4所示的氨基酸序列，所述VL具有SEQIDNO:8所示的氨基酸序列。


3.权利要求1或2所述的阻断异嗜性人IgM反应性的单克隆抗体的制备方法，其步骤包括：
(1)表达人IgMCH1抗原：构建表达人IgMCH1抗原的质粒，转染到大肠杆菌菌株中，选择阳性克隆，大量表达后回收菌体，超声裂解后通过镍柱纯化出Histag-人IgMCH1抗原；
(2)免疫小鼠：取小鼠，先免疫Histag-人IgMCH1抗原，再免疫天然人IgM，取全血并取脾脏；
(3)构建抗人IgMCH1的噬菌体抗体展示库：提取小鼠脾脏RNA，并用IgG恒定区C末端部分的反向特异性引物合成抗体cDN...

【专利技术属性】
技术研发人员：李哲，刘宏伟，周淼，
申请(专利权)人：捷和泰北京生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11