同时检测鸡毒支原体和鸡滑液囊支原体的产品、方法与应用技术

技术编号:26646907 阅读:47 留言:0更新日期:2020-12-08 23:59
本申请公开了同时检测鸡毒支原体和鸡滑液囊支原体的产品、方法与应用。所述产品和方法以鸡毒支原体和鸡滑液囊支原体的共有的特异性蛋白质抗原优选为外膜蛋白WP_041352022.1为检测对象,在该蛋白的基因组DNA水平上设计并筛选出了PCR引物对S1,该PCR引物对具有特异性强、灵敏度高、无引物二聚体产生的优点,本申请提供了使用一对PCR引物即可同时检测两种病原的产品和方法,杜绝了多重PCR引物和产物间的相互干扰,提高了检出率,具有经济、简便、效率高的优点。

【技术实现步骤摘要】
同时检测鸡毒支原体和鸡滑液囊支原体的产品、方法与应用
本专利技术涉及动物病原检测领域,具体说是一种同时检测鸡毒支原体和鸡滑液囊支原体的产品、方法与应用。
技术介绍
鸡毒支原体和鸡滑液囊支原体是鸡的两种重要的致病性病原。目前环境中的感染压力较大,采集7-14日龄雏鸡的喉气管拭子,使用PCR方法能够检测雏鸡是否处于鸡毒支原体和鸡滑液囊支原体潜伏感染状态,以确定药物投放及疫苗免疫程序。现有技术中同时检测鸡毒支原体和鸡滑液囊支原体的方法一般为多重PCR,需要加入至少4条引物,引物的增多会造成引物二聚体,并干扰PCR的正常扩增,影响PCR检测的灵敏度和特异性。
技术实现思路
针对现有技术中存在的缺陷,本专利技术的目的在于提供一种同时检测鸡毒支原体和鸡滑液囊支原体的产品、方法与应用。本申请专利技术人发现,免疫鸡毒支原体与免疫鸡滑液囊支原体获得的血清,在平板凝集实验中存在一定程度的交叉凝集,根据这一特性,初步判定这两种病原在外膜蛋白和/或细胞质膜蛋白上存在部分相似或者相同的抗原。现有技术中尚未发现利用上述两种支原体的交叉凝集对这两本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种同时检测鸡毒支原体和鸡滑液囊支原体的产品,其特征在于,所述产品中包括针对鸡毒支原体和鸡滑液囊支原体的共有的特异性蛋白进行检测的试剂。/n

【技术特征摘要】
1.一种同时检测鸡毒支原体和鸡滑液囊支原体的产品,其特征在于,所述产品中包括针对鸡毒支原体和鸡滑液囊支原体的共有的特异性蛋白进行检测的试剂。


2.如权利要求1所述的产品,其特征在于,所述共有的特异性蛋白包括外膜蛋白、和/或细胞质膜蛋白,优选,外膜蛋白,
和/或,所述共有的特异性蛋白具有抗原性,优选的,所述抗原性的强度为抗原参数在0.5以上,
和/或,所述共有的特异性蛋白在鸡毒支原体和鸡滑液囊支原体中的同源性在99%、98%、97%、96%、95%、90%、85%、70%、60%、50%、40%、35%、30%以上,优选,85%以上,更优选,90%以上,更优选,95%以上。


3.如权利要求2所述的产品,其特征在于,所述共有的特异性蛋白包括外膜蛋白,所述外膜蛋白包括蛋白WP_041352022.1、WP_041352020.1、WP_041351882.1、WP_011283540.1、WP_020003021.1、WP_081420552.1、和WP_041352050.1,
优选,蛋白WP_041352022.1,更优选的,蛋白WP_041352022.1的氨基酸序列如SEQIDNo.4所示,更优选的,蛋白WP_041352022.1的基因序列如SEQIDNo.1所示。


4.如权利要求1-3中任一所述的产品,其特征在于,所述试剂选自所述共有的特异性蛋白的蛋白或抗原水平检测试剂、抗体水平检测试剂、基因组DNA水平检测试剂、RNA水平检测试剂中的任一种或任两种以上组合;
优选的,所述试剂选自酶联免疫检测试剂、Westernblot检测试剂、PCR检测试剂、RAPD检测试剂、AFLP检测试剂、LAMP检测试剂、SOE-PCR检测试剂中的任一种或任两种以上组合。


5.如权利要求4所述的产品,其特征在于,所述PCR检测试剂包括PCR引物对,所述PCR引物对的检测靶序列位于所述共有的特异性蛋白的基因序列上,
优选的,所述PCR引物对的检测靶序列位于蛋白WP_041352022.1,
更优选的,所述PCR引物对的检测靶序列位于SEQIDNo.1所示序列上,更优选的,所述PCR引物对的检测靶序列包括SEQIDNo.1的第3976-44...

【专利技术属性】
技术研发人员:李书光沈志强程立坤曲光刚王文秀杨立芳赵家磊
申请(专利权)人:山东绿都生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:山东;37

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