AQP1突变型基因、蛋白、细胞系及其应用制造技术

技术编号:33619163 阅读:40 留言:0更新日期:2022-06-02 00:39
本发明专利技术公开了鸡AQP1突变型基因,突变型蛋白、该基因突变细胞系及其在细胞悬浮培养中的应用。本发明专利技术还公开了AQP1突变型细胞系的制备方法。本发明专利技术通过敲除了鸡胚成纤维细胞系DF

【技术实现步骤摘要】
AQP1突变型基因、蛋白、细胞系及其应用


[0001]本专利技术属于生物制品领域,涉及细胞与病毒疫苗领域,具体涉及AQP1突变型基因、蛋白、细胞系及其应用。

技术介绍

[0002]目前,大多数用于生产疫苗的细胞采用转瓶贴壁培养、微载体贴壁培养和悬浮培养三种模式,效率依次递增,生产成本依次递减。对于大规模工业疫苗生产而言,悬浮培养优于微载体培养和转瓶培养:从生产成本的角度看,细胞密度更高、病毒滴度更高、单位疫苗生产成本更小;从过程控制的角度看,悬浮培养细胞集中在一个大的生物反应器中培养,发酵参数易监测易调节、自动化程度高、批间差小、外源污染易控制。因此,悬浮培养将是细胞培养法生产抗病毒疫苗的趋势。
[0003]使细胞适应悬浮培养的策略有很多,例如使用特殊设计的低血清或无血清培养基,使用细胞摇瓶或者通过基因调控等等。然而,传统的驯化手段只针对一部分具备悬浮生长潜力的细胞有效,对于大部分细胞仍然束手无策。目前国内外能够应用于工业疫苗生产的悬浮细胞种类仍然十分稀缺,仅有BHK21、MDCK、PER.C6、AGE1、HEK293、EB66和CAP本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.AQP1突变型基因,其特征在于,所述AQP1突变型基因在AQP1野生型基因上缺失了第92

214位核苷酸。2.根据权利要求1所述的AQP1突变型基因,其特征在于,所述AQP1突变型基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。3.编码权利要求1或2所述的AQP1突变型基因的突变型蛋白。4.根据权利要求3所述的突变型蛋白,其特征在于,所述突变型蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。5.表达盒、表达载体、细胞系或重组菌株,其含有权利要求1或2所述的AQP1突变型基因。6.AQP1突变型DF

1细胞系,其特征在于,其含有权利要求1或2所述的AQP1突变型基因。7.权利要求6所述的AQP1突变型DF

1细胞系的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:通过扩增测序获取了DF

1细胞的AQP1基因序列,在其第二外显子中蛋白编码起始密码子后设计sgRNA,应...

【专利技术属性】
技术研发人员:唐娜沈志强管宇徐倩倩苗立中王金良苑文娴高庆芳张倩
申请(专利权)人:山东绿都生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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