一种新的多肽——人受体蛋白-酪氨酸激酶HEK8蛋白17.82和编码这种多肽的多核苷酸制造技术

本发明专利技术公开了一种新的多肽－人受体蛋白－酪氨酸激酶ＨＥＫ８蛋白１７．８２，编码此多肽的多核苷酸和经ＤＮＡ重组技术产生这种多肽的方法。本发明专利技术还公开了此多肽用于治疗多种疾病的方法，如恶性肿瘤，血液病，发育紊乱症，ＨＩＶ感染，免疫性疾病和各类炎症等。本发明专利技术还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明专利技术还公开了编码这种新的人受体蛋白－酪氨酸激酶ＨＥＫ８蛋白１７．８２的多核苷酸的用途。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，具体地说，本专利技术描述了一种新的多肽——人受体蛋白-酪氨酸激酶HEK8蛋白17.82，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本专利技术还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。是一个结构相关的蛋白家族，该家族成员介导细胞对保外信号的反应。这些受体由三个主要的功能域作为特征一个包含具催化活性序列的胞内域，一个单一的疏水性跨膜域以及一个结构决定配体结合特异性的糖基化胞外域。信号传导是由结合生长或分化因子到其相关受体的胞外域而被启动。配体的结合促进受体的二聚化，然后能够诱导受体的自磷酸化。溶解或是膜结合蛋白配体都具有这一特性。该进程是参与磷酸化不同胞质底物并通过细胞在生物反应中达到顶点的起始步骤。对受体PTK激活最具特征性的反应是细胞生长，此外分化以及细胞存活也是由酪氨酸激酶受体/配体反应介导的。迄今为止已发现数十种不同的PTK受体基因并可划分为十几个亚家族。其中类EPH受体就是其中一个亚家族。EPH基因在细胞生长中起作用，它的过度表达将引发有些类型的癌症(van der Geer P,Hunter T and Lindberg RA.(1994),Annual Review of Cell Biology,10,251-337)。人EPH-受体亚家族成员被称为HEKs(人类EPH激酶)，该家族成员以及它们的受体对于各种组织的增殖，分化与维持十分重要。结构上，EPH亚家族成员以在胞外域中的一个类Ig环，一个富含半胱氨酸区域以及两个Ⅲ型纤连蛋白重复为特征。该家族催化域中的氨基酸序列比其他任何受体PTKs都与胞质PTKs的SRC亚家族更为密切相关。在受体PTKs中，EPH亚家族的催化域与表皮生长因子受体亚家族的最为相似的。PTKs中最为保守的序列的是WTAPEAI；此外，EPH亚家族中最为保守的序列是VCKVSDFG。HEK8基因编码的蛋白是人EPH-受体亚家族的新成员，它除了具有上述HEKs家族的特性之外，其催化域还与鼠的Sek与鸡的Cek8催化域相同。HEK8基因在脑中有高水平表达，此外亦在肾，肺，心脏，肌肉，胎盘以及胰脏中表达。HEK8基因发生缺失或突变将会引发与各种组织肾，肺，心脏，肌肉，胎盘以及胰脏的增殖，分化与维持相关的疾病，它的过度表达还会引发有些种类的癌症(Gary M Fox,Paige L Holst,Oncogene(1995)10,897-905)。通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本专利技术的多肽的表达谱与人受体蛋白-酪氨酸激酶HEK8蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本专利技术被命名为人受体蛋白-酪氨酸激酶HEK8蛋白17.82。由于如上所述人受体蛋白-酪氨酸激酶HEK8蛋白17.82蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人受体蛋白-酪氨酸激酶HEK8蛋白17.82蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人受体蛋白-酪氨酸激酶HEK8蛋白17.82蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。本专利技术的一个目的是提供分离的新的多肽——人受体蛋白-酪氨酸激酶HEK8蛋白17.82以及其片段、类似物和衍生物。本专利技术的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人受体蛋白-酪氨酸激酶HEK8蛋白17.82的多核苷酸的重组载体。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人受体蛋白-酪氨酸激酶HEK8蛋白17.82的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。本专利技术的另一个目的是提供生产人受体蛋白-酪氨酸激酶HEK8蛋白17.82的方法。本专利技术的另一个目的是提供针对本专利技术的多肽——人受体蛋白-酪氨酸激酶HEK8蛋白17.82的抗体。本专利技术的另一个目的是提供了针对本专利技术多肽——人受体蛋白-酪氨酸激酶HEK8蛋白17.82的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。本专利技术的另一个目的是提供诊断治疗与人受体蛋白-酪氨酸激酶HEK8蛋白17.82异常相关的疾病的方法。本专利技术涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。本专利技术还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种(a)具有SEQ ID NO:1中57-545位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-2309位的序列。本专利技术另外涉及一种含有本专利技术多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本专利技术多肽的方法。本专利技术还涉及一种能与本专利技术多肽特异性结合的抗体。本专利技术还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制人受体蛋白-酪氨酸激酶HEK8蛋白17.82蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本专利技术的多肽。本专利技术还涉及用该方法获得的化合物。本专利技术还涉及一种体外检测与人受体蛋白-酪氨酸激酶HEK8蛋白17.82蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物样品中所述多肽或其编码多核苷酸序列中的突变，或者检测生物样品中本专利技术多肽的量或生物活性。本专利技术也涉及一种药物组合物，它含有本专利技术多肽或其模拟物、激活剂、拮抗剂或抑制剂以及药学上可接受的载体。本专利技术还涉及本专利技术的多肽和/或多核苷酸在制备用于治疗癌症、发育性疾病或免疫性疾病或其它由于人受体蛋白-酪氨酸激酶HEK8蛋白17.82表达异常所引起疾病的药物的用途。本专利技术的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。本说明书和权利要求书中使用的下列术语除非特别说明具有如下的含义“核酸序列”是指寡核苷酸、核苷酸或多核苷酸及其片段或部分，也可以指基因组或合成的DNA或RNA，它们可以是单链或双链的，代表有义链或反义链。类似地，术语“氨基酸序列”是指寡肽、肽、多肽或蛋白质序列及其片段或部分。当本专利技术中的“氨基酸序列”涉及一种天然存在的蛋白质分子的氨基酸序列时，这种“多肽”或“蛋白质”不意味着将氨基酸序列限制为与所述蛋白质分子相关的完整的天然氨基酸。蛋白质或多核苷酸“变体”是指一种具有一个或多个氨基酸或核苷酸改变的氨基酸序列或编码它的多核苷酸序列。所述改变可包括氨基酸序列或核苷酸序列中氨基酸或核苷酸的缺失、插入或替换。变体可具有“保守性”改变，其中替换的氨基酸具有与原氨基酸相类似的结构或化学性质本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多肽－人受体蛋白－酪氨酸激酶ＨＥＫ８蛋白１７．８２，其特征在于它包含有：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、类似物或衍生物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：毛裕民，谢毅，
申请(专利权)人：上海博德基因开发有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]