预测磺脲类药物疗效的试剂盒制造技术

本发明专利技术提供了一种预测磺脲类药物疗效的试剂盒，含有下述组分：（１）红细胞裂解液；（２）白细胞裂解液；（３）蛋白沉淀液；（４）核酸储存液；（５）ＰＣＲ反应混合液（含ＭｇＣｌ２、ｄＮＴＰ、ＰＣＲ扩增引物和内标）；（６）ＤＮＡ聚合酶；（７）阳性质控；（８）阴性对照；（９）内切酶缓冲体系；（１０）限制性内切酶；（１１）ＰＣＲ用水；（１２）１０×电泳上样缓冲液：０．２５％溴酚兰，４０％（ｗ／ｖ）蔗糖水溶液。本发明专利技术通过提取生物样品中的基因组ＤＮＡ，经过聚合酶链式反应－限制性酶切片段多态性（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）分析方法，检测个体生物样品中磺脲类受体基因的多态性情况，预测磺脲类药物的疗效。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种预测磺脲类药物疗效的试剂盒，含有下述组分：（１）红细胞裂解液：ＮＨ↓［４］Ｃｌ，ＫＨＣＯ↓［３］，ＥＤＴＡ；（２）白细胞裂解液：蛋白酶Ｋ、ＲＮａｓｅＡ、ＮａＣｌ、Ｔｒｉｓ、ＥＤＴＡ、ＳＤＳ；（３）蛋白沉淀液：７．５Ｍ乙酸胺（ｐＨ７．４）；（４）核酸储存液：１Ｍ三羟甲基氨基甲烷－盐酸（Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ，ｐＨ８．０）；（５）２×ＰＣＲ反应混合液：１．０ｍｌ［１００ｍＭＴｒｉｓ－ＨＣｌ，１００ｍＭＫＣｌ，ｐＨ８．３（２０℃）］；５．０ｕＭＭｇＣｌ２；各０．４ｍＭｄＡＴＰ，ｄＣＴＰ，ｄＧＴＰ，ｄＴＴＰ，无菌双蒸水配制，ｐＨ７．０；磺脲类受体基因的多态性位点基因型检测引物；（６）ＴａｑＤＮＡ聚合酶（５Ｕ／ｕｌ）：保存缓冲液：２０ｍＭＴｒｉｓ－ＨＣｌ（ｐＨ８．０），１００ｍＭＫＣｌ，０．１ｍＭＥＤＴＡ，１ｍＭＤＴＴ，０．５％ＮＰ４０，０．５％（ｖ／ｖ）Ｔｗｅｅｎ２０，５０％甘油；（７）阳性质控：含有磺脲类受体基因的多态性位点杂合基因型个体全血标本，或者含有磺脲类受体基因的多态性位点杂合基因型的质粒；（８）阴性对照：经ＤＮＡａｓｅＩ处理的双蒸水；（９）内切酶缓冲体系（１０×）；（１０）限制性内切酶；（１１）ＰＣＲ用水；（１２）１０×电泳上样缓冲液：０．２５％溴酚兰，４０％（ｗ／ｖ）蔗糖水溶液。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：徐希平，任晓炜，冯雁，邢厚恂，王燕，蒋善群，王玉，戴成祥，
申请(专利权)人：北京华安佛医药研究中心有限公司，安徽省生物医学研究所，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]