本发明专利技术涉及一种蜂王浆品质的评价方法，其通过测定蜂王浆中糠醛类物质５－羟甲基－２－糠醛的含量来评价蜂王浆的品质。该方法灵敏度高、分析方法简单，并且其用来测定糠醛类物质的方法可以高效、灵敏、准确地分离５－羟甲基－２－糠醛、５－甲基糠醛、２－糠醛、２－糠酸、３－糠酸、５－羟甲基－２－糠酸６种糠醛类物质，并能对蜂王浆中的５－羟甲基－２－糠醛进行准确定量。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及食品品质评价领域，具体地说，涉及一种通过测定蜂王浆中糠醛类物质5-羟甲基-2-糠醛的含量来评价蜂王浆品质的方法。
技术介绍
蜂王浆(Royal jelly)是由哺育蜂头部咽下腺(Hypopharyngeal gland)和上颚腺(Mandibulargland)共同分泌的，具有酸、湿、辣、 甜且略带特殊芳香气味的乳白色或谈黄色的浆状物。蜂王浆在蜜蜂的 级型分化中发挥着重要的作用，同样由蜂王产下的受精卵孵化成的小 幼虫，如果在整个幼虫期都被饲喂蜂王浆，只需16 d就能发育成生 殖器官完全的蜂王；如果只在幼虫期的前三天伺喂蜂王浆，随后改喂 蜂蜜和花粉，需要21d，并只能发育成生殖器官不完全的工蜂。蜂王浆的组分非常复杂，富含蛋白质、碳水化合物和脂类，还包 含许多可能发挥重要生理功能的微量组分。蜂王浆含有丰富的生物活 性物质，具有诸如抗疲劳、抗菌消炎、抗肿瘤、降血压、促生长等多 方面的营养保健作用，在保健食品、医药、化妆品等领域具有很高的 应用价值。由于一些活性成分对贮存温度和贮存时间敏感，蜂王浆对贮存条 件要求较高。若贮存不当(温度过高或贮存时间过长)，其物理性状、 化学成分及其品质会发生显著变化，致使其保健功效降低甚至丧失。 人工饲养蜜蜂幼虫实验表明，贮存不当的蜂王浆不能使蜜蜂幼虫正常发育。长期临床验证也表明，蜂王浆所经历的贮存条件是决定蜂王浆 品质的极其关键的因素。但是由于缺少相应的评价方法，质量监管部 门及加工、贸易企业迄今无法在蜂王浆生产和流通过程中进行有效的 监管和控制，难以对蜂王浆所经历的贮存条件和品质做出如实的评价，从而导致巿场上蜂王浆质量良莠不齐。
技术实现思路
为解决上述问题，本专利技术提供了，该方法通过测定蜂王浆中糠醛类物质5-羟甲基-2-糠醛的含量来评价蜂 王浆的品质。蜂王浆化学组成非常复杂，含有大量的单糖、蛋白质等物质且呈 酸性，满足了糠醛类物质形成的基本条件。在蜂王浆的贮存过程中(尤 其是在较高温度下或较长时间贮存时)，各组分之间不可避免地会发 生一些化学反应。美拉德反应是其中最主要的反应之一，这个反应与 单糖在酸性条件下降解和脂质过氧化都是引起蜂王浆贮存和加工过 程中发生褐变的重要原因。在引起褐变的同时，反应还会在蜂王浆中 积聚糠醛类物质，如2-糠醛(Furfural, F)和5-羟甲基糠醛 (5-hydroxymethylfurfUral， HMF )等。5-羟甲基-2-糠醛(5-HMF )是食品贮存过程中常见的 一种环状醛 类物质，它的产生通常有两条途径第一，在酸性条件下，食品中的 单糖降解为5-HMF;第二，食品中的糖类物质与游离胺基之间发生 美拉德反应形成5-HMF及其它糠醛类物质。在这个过程中，反应造 成了食品中部分氨基酸降解，并产生一些损害营养的物质，其中部分 可能还是有毒性的。本专利技术研究人员在不同贮存条件下对蜂王浆中5-羟甲基-2-糠醛 (5-HMF)、 5-甲基糠醛(5誦MF)、 2-糠醛(F)、 2-糠酸(2-OIC )、 3陽 糠酸(3-0IC)、 5-羟甲基-2-糠酸(5-HMFacid) 6种糠醛类物质的含 量进行了分析。结果表明，在新釆收的蜂王浆中没有检出这6种物质； 而在经过不同时间(0、 1、 3、 6、 9、 12个月)贮存后，4个温度梯 度(25。C、 16°C、 4°C、 -18°C )的样品中均检出了 5-HMF，其含量随 着贮存时间增加和温度升高而增加，变化幅度为25°C > 16°C >4°C 〉 -18°C;在12个月的试验期内，仅在25。C下贝i存的蜂王浆中检出了 F。根据5-HMF和F含量与贮存时间和温度的相关性，结合蜂王浆贮存 的实践经验， 一般以蜂王浆在4。C下保存3个月即已视为不新鲜，那 么使得在16。C下保存3个月的蜂王浆即可以视为极不新鲜，因此将 蜂王浆的品质按新鲜度分为新鲜、不新鲜和极不新鲜三个等级；其中， 新鲜等级的蜂王浆其5-羟甲基-2-糠醛的含量小于或等于90昭/kg;不 新鲜等级的蜂王浆其5-羟甲基-2-糠醛的含量大于90 pg/kg小于150 ^g/kg;极不新鲜等级的蜂王浆其5-羟甲基-2-糠醛的含量大于或等于 150 pg/kg。本专利技术的蜂王浆品质的评价方法中，5-羟甲基-2-糠醛的含量测定 可通过液相色谱法或紫外分光光度法来测定。用于液相色谱法或紫外分光光度法的样品处理过程为蜂王浆经 纯水提取、乙酸锌和亚铁氰化钾溶液沉淀蛋白，其上清液经微孔滤膜 过滤后，供液相色谱仪或紫外分光光度仪测定。所述液相色谱法的色谱条件为流动相A为0.5%甲酸水溶液， 流动相B为甲醇。淋洗梯度为0-15min, B 2.0%; 15-20min, B 2.0 -5.0%; 20-35 min, B 5.0-35.0%。色谱柱为C^柱，检测波长285nm。本专利技术所提供的蜂王浆品质的评价方法，与现有技术相比，具有 如下优点1、 本专利技术中糠醛类物质的含量测定方法能高效、灵敏、准确地 分离5-羟甲基-2-糠醛、5-甲基糠醛、2-糠醛、2-糠酸、3-糠酸、5-羟 甲基-2-糠酸6种糠醛类物质，并能对蜂王浆中的5-羟甲基-2-糠醛进 行准确定量。2、 利用本专利技术方法来评价蜂王浆品质的高低，其灵敏度高，分 析方法简单。附图说明图1为6种糠醛类化合物标准样品的液相色谱其中a为波长270nm下的液相色谱图；b为波长285nm下的液相色谱图；c为波长243nm下的液相色谱c中1为5-HMF; 2为F; 3为5-HMFacid; 4为2-OIC; 5为3-OIC; 6为5-MF。图2为蜂王浆在16'C下lfc存0-12个月的5-羟甲基-2-糠醛含量变 化图。图3为蜂王浆在-18。C贮存12个月时的色谱图。 图4为蜂王浆在4。C]fc存12个月时的色谱图。 图5为蜂王浆在16'C贮存12个月时的色谱图。 图6为蜂王浆在25。C贮存12个月时的色谱图。具体实施例方式以下实施例进一步说明本专利技术的内容，但不应理解为对本专利技术 的限制。 实施例l将巿购的5-羟甲基-2-糠醛(Sigma公司)溶于甲醇，配制成浓度 为0.5 mg/kg的标准品溶液。分别称取新釆收的茶花蜂王浆(浙江)、荆条蜂王浆(北京)、洋 槐蜂王浆(山东)、油菜蜂王浆(青海)样品l.Og于10mL具盖塑料 离心管中，加入5mL去离子水，涡旋振荡5min，超声提取3min后， 在12000 rpm下离心10 min， 收集上清液；在残渣中再加入3mL去 离子水，重复上述提取离心步骤，弃去残渣，合并两次上清液。向上 清液中加入300g/L亚铁氰化钾溶液lmL,混勾后再加入150 g/L乙 酸锌溶液lmL，充分混匀，静止30min后在10000 rpm离心10min, 取上清液5mL至10mL容量瓶中，用去离子水定容至刻度。样液用 0.45pm滤膜过滤后，用液相色谱仪进行测定，HPLC的色谱条件为 色谱柱Symmetry 300 C18 (4.6x250 mm, 5—,柱温30。C、波长 285nm，流动相A为0.5%甲酸水溶液，流动相B为甲醇，淋洗梯度 为:0-15 min， B 2.0%; 15-20 min, B 2.0-5,0%; 20-35 min, B 5.本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种蜂王浆品质的评价方法，其通过测定蜂王浆中糠醛类物质５－羟甲基－２－糠醛的含量来评价蜂王浆的品质。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：吴黎明，胡福良，薛晓锋，赵静，李熠，周金慧，
申请(专利权)人：中国农业科学院蜜蜂研究所，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]
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