活性提高的磷酸转酮酶及在生产代谢物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了活性提高的磷酸转酮酶及在生产代谢物中的应用。本发明专利技术提供的突变体蛋白：将磷酸转酮酶进行如下突变得到的蛋白质：对应于序列3的第260位氨基酸残基由H突变为Y；对应于序列3的第260位氨基酸残基由H突变为Y，第2位氨基酸残基由T突变为A；对应于序列3的第260位氨基酸残基由H突变为Y，第6位氨基酸残基由I突变为T；对应于序列3的第260位氨基酸残基由H突变为Y，第2位氨基酸残基由T突变为A，第6位氨基酸残基由I突变为T。本发明专利技术还保护突变体蛋白在制备代谢物中的应用。与现有磷酸转酮酶相比，本发明专利技术提供的突变体蛋白的磷酸转酮酶酶活显著增加，进而显著提高目标代谢物的产量。

【技术实现步骤摘要】
活性提高的磷酸转酮酶及在生产代谢物中的应用本申请为申请号为“201910359888.0”、申请日为2019年04月30日，专利技术名称为“活性提高的磷酸转酮酶及在生产代谢物中的应用”的分案申请。
本专利技术属于基因工程领域，具体涉及活性提高的磷酸转酮酶，以及该磷酸转酮酶在生产代谢物中的应用，涉及的代谢物包括但不限于氨基酸(特别是源自乙酰辅酶A的氨基酸)、琥珀酸、柠檬酸等。
技术介绍
氨基酸、有机酸，是人类和动物营养中最重要的成分，在医药、健康、食品、化工、动物饲料和化妆品等行业中有着十分重要的地位。当前，氨基酸、有机酸主要采用微生物发酵法来生产，已知的可生产氨基酸的微生物包括埃希氏菌属(Escherichia)，棒杆菌属(Corynebavterium)、短杆菌属(Brevibacterium)等。近年来，随着基因工程技术的发展，利用基因工程手段对菌株进行遗传改造，已经获得了大量的高效的氨基酸、有机酸生产工程菌株。磷酸转酮酶(phosphoketolase，F/XPK)，包括6-磷酸果糖转酮酶(FPK)和5-磷酸木酮糖转酮酶(本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.突变体蛋白，为如下(d1)、(d2)、(d3)或(d4)：/n(d1)将磷酸转酮酶进行如下突变得到的蛋白质：对应于序列3的第260位氨基酸残基由H突变为Y；/n(d2)将磷酸转酮酶进行如下两个突变得到的蛋白质：对应于序列3的第260位氨基酸残基由H突变为Y；对应于序列3的第2位氨基酸残基由T突变为A；/n(d3)将磷酸转酮酶进行如下两个突变得到的蛋白质：对应于序列3的第260位氨基酸残基由H突变为Y；对应于序列3的第6位氨基酸残基由I突变为T；/n(d4)将磷酸转酮酶进行如下三个突变得到的蛋白质：对应于序列3的第260位氨基酸残基由H突变为Y；对应于序列3的第2位氨基酸残基由T突变为A；对...

【技术特征摘要】
1.突变体蛋白，为如下(d1)、(d2)、(d3)或(d4)：
(d1)将磷酸转酮酶进行如下突变得到的蛋白质：对应于序列3的第260位氨基酸残基由H突变为Y；
(d2)将磷酸转酮酶进行如下两个突变得到的蛋白质：对应于序列3的第260位氨基酸残基由H突变为Y；对应于序列3的第2位氨基酸残基由T突变为A；
(d3)将磷酸转酮酶进行如下两个突变得到的蛋白质：对应于序列3的第260位氨基酸残基由H突变为Y；对应于序列3的第6位氨基酸残基由I突变为T；
(d4)将磷酸转酮酶进行如下三个突变得到的蛋白质：对应于序列3的第260位氨基酸残基由H突变为Y；对应于序列3的第2位氨基酸残基由T突变为A；对应于序列3的第6位氨基酸残基由I突变为T。


2.一种融合蛋白，为将权利要求1所述突变体蛋白与蛋白标签融合得到的蛋白质。


3.编码权利要求1中所述突变体蛋白的多核苷酸或编码权利要求2所述融合蛋白的多核苷酸。


4.具有权利要求3所述多核苷酸的表达盒、重组载体、重组微生物或离体的重组细胞。


5.特定物质在制备代谢物中的应用；
所述特定物质为：权利要求1中所述的突变体蛋白，或，权利要求2中所述融合蛋白，或，权利要求3所述的多核苷酸，或，权利要求4所述表...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙际宾，李庆刚，郑平，周文娟，张晓立，德莱奥西班乔·泰沃，马延和，
申请(专利权)人：中国科学院天津工业生物技术研究所，
类型：发明
国别省市：天津;12