一种谷氨酰胺转氨酶及其编码基因、表达载体及重组菌制造技术

本发明专利技术公开了一种谷氨酰胺转氨酶及其编码基因、表达载体及重组菌，属于基因工程技术领域。本发明专利技术通过密码子优化技术进行基因改造，以毕赤酵母为宿主，选择分泌型表达载体，转入改造后与枯草芽孢杆菌来源基因同源性为70.6％的谷氨酰胺转氨酶基因，直接分泌表达目的蛋白，得到高拷贝数的重组工程菌，该重组工程菌最适pH偏好性向酸性发生偏移，由pH7变为6，在50℃下水浴30min后相对酶活由71.4％增加为89.7％，这促进了谷氨酰胺转氨酶未来的工业化生产和在各领域的广泛应用。

【技术实现步骤摘要】
一种谷氨酰胺转氨酶及其编码基因、表达载体及重组菌
本专利技术涉及一种谷氨酰胺转氨酶及其编码基因、表达载体及重组菌，属于基因工程

技术介绍
谷氨酰胺转氨酶(TGase)是一种催化酰基转移的酶，其可催化肽链中谷氨酰胺残基的γ-羧酰胺基(酰基供体)与酰基受体之间进行酰基转移，形成异肽键。谷氨酰胺转氨酶具有植物、动物、微生物等不同来源，其中微生物来源的TGase酶多存在于链霉菌属(Streptomycesspp.)和芽孢杆菌属(Bacillusspp.)。微生物发酵生产的谷氨酰胺转氨酶相较于其它来源可以直接从发酵液中分离得到，生产周期短，成本优势显著，具有研究价值与潜力。不同微生物来源及表达方法的谷氨酰胺转氨酶具有不同酶学性质。谷氨酰胺转氨酶在食品、医药、生物技术等领域前景广阔。通过该酶独特、安全的交联作用，连接不同蛋白质中的限制性氨基酸，产生优势互补的作用，提高蛋白质的营养价值。在生物
，由于谷氨酰胺转氨酶对蛋白质的特殊交联作用，可以应用于生化检测。蛋白质可以通过谷氨酰胺转氨酶的作用与氨基化的DNA连接，进行特异性修饰。糖基化本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种谷氨酰胺转氨酶，其特征在于，所述的谷氨酰胺转氨酶的氨基酸序列如SEQ IDNO.1所示。/n

【技术特征摘要】
1.一种谷氨酰胺转氨酶，其特征在于，所述的谷氨酰胺转氨酶的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。


2.一种权利要求1所述的谷氨酰胺转氨酶的编码基因。


3.根据权利要求2所述的编码基因，其特征在于，所述的编码基因的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示。


4.一种携带权利要求2所述的编码基因的表达载体。


5.根据权利要求4所述的表达载体，其特征在于，所述的表达载体采用的质粒为pPIC9K。


6.一种表达权利要求1所述的谷氨酰胺转氨酶的重组菌。


7.根据权利要求6所述的重组菌，其特征在于，所述的重组菌是以毕赤酵母GS115为宿主。

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【专利技术属性】
技术研发人员：史劲松，龚劲松，商玉婷，许正宏，钱建瑛，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32