优化的二鸟苷酸环化酶基因、表达载体及其融合蛋白制造技术

本发明专利技术属于生物工程领域，提供了优化的二鸟苷酸环化酶基因、表达载体及其融合蛋白。将赤红球菌中的二鸟苷酸环化酶基因进行密码子优化，然后用化学法合成该基因，并构建了重组表达质粒pPGH‑dgc，然后转化入E.coli BL21(DE3)进行表达。重组菌经过16℃、0.1mM IPTG诱导后，超声波破碎细胞，经谷胱甘肽琼脂糖亲和层析纯化得到一个新的二鸟苷酸环化酶融合蛋白。

【技术实现步骤摘要】
优化的二鸟苷酸环化酶基因、表达载体及其融合蛋白
本专利技术属于生物工程领域，具体涉及经过密码子优化的赤红球菌二鸟苷酸环化酶基因、表达载体及其融合蛋白。
技术介绍
二鸟苷酸环化酶(diguanylatecyclases,DGCs)，也称二鸟苷酸激酶(diguanylatekinases，EC2.7.7.65)，在生物体内起着重要作用。通常二鸟苷酸环化酶含有典型的GGDEF(Gly-Gly-Asp-Glu-Phe)或GGEEF(Gly-Gly-Glu-Glu-Phe)催化结构域，也称之为活性位点或“A位点”，可与两个三磷酸鸟苷(GTP)结合并催化合成c-di-GMP。“GGDEF”结构域由GREGORY等人首次鉴定，是Caulobactercrescentus中参与细胞分化的响应调节因子PleD的保守区域。二鸟苷酸环化酶一般还包含一个抑制位点即I位点，具有典型的RXXD基序(X代表任意氨基酸)。产物c-di-GMP结合到DGC的I位点引起构象的变化，可避免GTP的过量消耗和限制c-di-GMP的合成。DGCs可以存在于细胞质中，也可以通过跨膜结构域本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种优化的二鸟苷酸环化酶基因，其特征在于：包含如序列表SEQ ID NO:1所示的碱基序列。/n

【技术特征摘要】
1.一种优化的二鸟苷酸环化酶基因，其特征在于：包含如序列表SEQIDNO:1所示的碱基序列。


2.一种重组载体，其特征在于：包含权利要求1所述的优化的二鸟苷酸环化酶基因。


3.根据权利要求2所述的重组载体，其特征在于：所述的重组载体为包含权利要求1所述的优化的二鸟苷酸环化酶基因的pPGH质粒。


4.一种融合蛋白，其特征在于：所述的融合蛋白的氨基酸序列如序列表SEQIDNO:2所示。


5.根据权利要求4所...

【专利技术属性】
技术研发人员：彭仁，匡素芳，
申请(专利权)人：江西师范大学，
类型：发明
国别省市：江西;36