一种UDP-葡萄糖基转移酶突变体、其应用及其制备莱鲍迪苷D的方法技术

提供了一种UDP‑葡萄糖基转移酶突变体、其应用及制备莱鲍迪苷D的方法，对野生型UDP‑葡萄糖基转移酶的基因序列进行定点突变，获得了包括SEQ ID NO：3在内的一系列突变体，这些突变体的酶活力和pH稳定性较野生型亲本得到提高。

A UDP glucosyltransferase mutant, its application and its preparation method of leibaodi glycoside D

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】一种UDP-葡萄糖基转移酶突变体、其应用及其制备莱鲍迪苷D的方法
本专利技术涉及生物酶
，特别涉及一种通过基因定点突变的方法人工获得的UDP-葡萄糖基转移酶突变体及其用于催化制备莱鲍迪苷D的方法。
技术介绍
葡萄糖基转移酶是在酶反应中只转移葡萄糖基的酶，该酶的作用机理是催化糖基供体的葡萄糖残基转移到糖基受体分子上，从而调节受体分子的活性。UDP-葡萄糖基转移酶(UDP-glucosyltransferase，简称UGT)是葡萄糖基转移酶中的一种，以UDP-葡萄糖作为糖基供体，几乎存在于所有有机体中。UDP-葡萄糖是二磷酸尿苷葡糖(uridinediphosphateglucose)的简称，又简称为UDP-葡糖或者UDPG，是由尿苷二磷酸和葡萄糖组成的维生素，可看作“活性葡萄糖”，广泛分布于植物、动物和微生物的细胞内，在蔗糖、淀粉、糖原及其他寡糖和多糖合成中作葡萄糖基的供体，是最常见的一种糖基供体。如今，随着天然甜味剂甜菊糖苷的广泛应用，以及生物催化技术的日益发展，UDP-葡萄糖基转移酶被越来越多地应用在甜菊糖苷的生物催化制备的领域本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种UDP-葡萄糖基转移酶突变体，其特征在于：所述突变体为如下(a)、(b)或(c)的蛋白质：/n(a)氨基酸序列如SEQ ID NO：3所示的蛋白质；/n(b)在如SEQ ID NO：3所示的氨基酸序列中经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸并且具有比氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示的UDP-葡萄糖基转移酶亲本更高的催化莱鲍迪苷A转化为莱鲍迪苷D的酶活力的由(a)衍生的蛋白质；/n(c)与(a)限定的蛋白质的氨基酸序列具有90％以上同源性并且具有比氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示的UDP-葡萄糖基转移酶亲本更高的催化莱鲍迪苷A转化为莱鲍迪苷D的酶活力的蛋白质。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】一种UDP-葡萄糖基转移酶突变体，其特征在于：所述突变体为如下(a)、(b)或(c)的蛋白质：
(a)氨基酸序列如SEQIDNO：3所示的蛋白质；
(b)在如SEQIDNO：3所示的氨基酸序列中经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸并且具有比氨基酸序列如SEQIDNO：2所示的UDP-葡萄糖基转移酶亲本更高的催化莱鲍迪苷A转化为莱鲍迪苷D的酶活力的由(a)衍生的蛋白质；
(c)与(a)限定的蛋白质的氨基酸序列具有90％以上同源性并且具有比氨基酸序列如SEQIDNO：2所示的UDP-葡萄糖基转移酶亲本更高的催化莱鲍迪苷A转化为莱鲍迪苷D的酶活力的蛋白质。


根据权利要求1所述的UDP-葡萄糖基转移酶突变体，其特征在于，与如SEQIDNO：2所示的UDP-葡萄糖基转移酶亲本的氨基酸序列相比，所述突变体在至少一个如下位点处有突变：第69位、第148位、第244位、第251位、第252位、第255位、第368位、第426位和第432位。


根据权利要求1所述的UDP-葡萄糖基转移酶突变体，其特征在于，与如SEQIDNO：2所示的UDP-葡萄糖基转移酶亲本的氨基酸序列相比，所述突变体具有至少一个如下突变：A69D、M148L、F244P、L251S、H252P、R255G、M368L、S426R、K432N。


根据权利要求1所述的UDP-葡萄糖基转移酶突变体，其特征在于：与如SEQIDNO：2所示的UDP-...

【专利技术属性】
技术研发人员：傅荣昭，刘文山，刘玉凤，李振伟，
申请(专利权)人：邦泰生物工程深圳有限公司，江西邦泰绿色生物合成生态产业园发展有限公司，江西安泽麦生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44