本发明专利技术提供了在动物猪链球菌(S.suis)中引起免疫应答的猪链球菌菌株、包含所述菌株的组合物、针对猪链球菌的疫苗接种方法以及与这类方法和组合物一起使用的试剂盒。本发明专利技术进一步提供了基于全基因组测序和生物信息学的全面、明确的荚膜分型方法。即使菌株具有新型荚膜基因座时，这种荚膜分型方法也能够准确鉴定血清型，并且能够在配制疫苗(包括猪群特异性疫苗)时用于确定要包括的菌株。
Streptococcus suis vaccine against reproductive, reproductive and growing pig diseases and its preparation and Application
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】预防生殖、育龄和生长猪的疾病的猪链球菌疫苗及其制备和使用方法相关申请的交叉引用本申请要求于2017年8月31日提交的美国临时申请号62/552975的优先权，其全部内容通过引用并入本文。通过引用并入任何前述申请以及其中或在其审查进程期间引用的所有文件(“申请引用的文件”)和在所述申请引用的文件中引用或参考的所有文件，以及本文引用或参考的所有文件(“本文引用的文件”)，以及在本文引用的文件中引用或参考的所有文件，连同本文或在通过引用并入本文的任何文件中提及的任何产品的任何制造商的说明书、描述、产品规范和产品表在此通过引用并入本文，并可在本专利技术的实践中采用。在本申请中对任何此类文件的引用或鉴定并不承认此类文件可用作本专利技术的现有技术，并且不反映对此类引用的专利文件的有效性、专利性和/或可实施性的任何观点。通过GenBank登录号在本文中引用的所有序列均通过引用整体并入本文，并且所述序列如在本申请提交日的GenBank中所示。
本专利技术一般性涉及细菌疫苗，特别是那些为猪科动物提供安全且有效预防以针对由新鉴定的猪链球菌(Streptococcussuis)菌株引起的生殖、育龄和生长猪的疾病的细菌疫苗。本专利技术进一步涉及产生细菌的方法，以及鉴定与新型荚膜结构、cbpD基因以及可以赋予这些菌株独特的定植阴道的能力并提供针对其他菌株的竞争优势的替代分泌途径有关的核酸变异。因此，本专利技术涉及包含本专利技术所述的细菌(例如，活的、减毒的或杀死的细菌)的免疫原性或疫苗组合物。本专利技术进一步涉及用于制备和/或配制此类组合物的方法。本专利技术进一步涉及基于全基因组测序和生物信息学的全面、明确的荚膜分型方法。甚至是当菌株具有新型荚膜基因座时，这种荚膜分型方法也能够准确鉴定血清型，并且能够在配制疫苗(包括猪群(herd)特异性疫苗)时用于确定要包括的菌株。关于序列表的声明与本申请相关的序列表以文本格式代替纸质副本提供，并且在此通过引用并入本说明书。包含所述序列表的文本文件的名称是MER17-323ST25.txt。该文本文件大小为1565KB；创建于2018年8月30日；并且在递交说明书的同时通过EFS-Web以电子方式提交。
技术介绍
猪链球菌是主要定植于猪的革兰氏阳性球菌。虽然成年猪作为无症状携带者，但它能够引起仔猪的致命性脑膜炎、败血症关节炎和支气管肺炎。成年猪通常在其扁桃体隐窝和上呼吸道中携带猪链球菌(S.suis)作为共生体，但也已从胃肠道和生殖道中分离出细菌。几乎所有的成年猪都作为猪链球菌的储库，这种病原体影响着全世界的养猪业。猪链球菌也能在受感染的母猪中引起流产(GivensMD,MarleyMS:Infectiouscausesofembryonicandfetalmortality.Theriogenology,2008,70:270-285)。基于凝集试验，迄今已鉴定出35种不同的猪链球菌血清型(HigginsR,GottschalkM,BoudreauM,LebrunA,HenrichsenJ:Descriptionofsixnewcapsulartypes(29-34)ofStreptococcussuis.JVetDiagnInvest.,1995,7:405-406)；但是，最近的工作表明，有六种原始血清型是新的种(HillJE等人:Biochemicalanalysis,cpn60and16SrDNAsequencedataindicatethatStreptococcussuisserotypes32and34,isolatedfrompigs,areStreptococcusorisratti.VetMicrobiol.,2005,107:63-69；TienLHT等人:ReappraisalofthetaxonomyofStreptococcussuisserotypes20,22,26,and33basedonDNA-DNAhomologyandsodAandrecNphylogenies.VetMicrobiol.,2013,162:842-849)。猪链球菌是母猪生殖道的常住菌。但是，它也是一种机会致病菌，偶尔会从表现出阴道分泌物和子宫内膜炎症状的母猪中分离出来(TorremorrellM.Bacterial,rickettsial,protozoal,andfungalcausesofinfertilityandabortioninswine:InYoungquistRS,ThrelfallWR,编辑.Currenttherapyinlargeanimaltheriogenology.第2版,St.Louis:Elsevier；2007,794-801)。对链球菌感染的第一次描述是由奥地利外科医生TheodorBillroth于1874年完成的(Billroth,1874；Billroth,1877)。FriedrichJuliusRosenbach于1884年对链球菌属(Streptococcus)的名称进行了进一步改进，他检查了从化脓性病变中分离出的细菌，并开始对种进行命名(Evans，1936)。HugoSchottmuller在1903年引入血琼脂平板是将区分链球菌(streptococci)向前推进的重要一步(Schottmuller,1903；Becker,1916)。1933年，Lancefield使用各种链球菌之间的表面抗原差异，将它们进一步细分为由字母A到X指定的组(2008)。来自人类疾病的菌株分为A组；来自牛和乳制品来源的菌株分为B组；来自各种动物来源的菌株分为C组；等等。为了进行流行病学研究，伦敦的FredGriffith于1934年引入了通过载玻片凝集法确定T抗原的方法(Griffith，1934)(Kohler，1974)。的“presentstateofspecieswithinthegenusStreptococcusandEnterococcus”(2007)的最新描述，以及Richards等人的“phylogenomicanalysisofgenomeevolutioninthegenusStreptococcus”(Richards等人，2014)提供了链球菌属的重要新概述。完整的引文可以在www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK333430上找到。关于链球菌的动物菌株，在分类方面的进展要小得多。根据荚膜多糖的抗原差异，有35种已知的猪链球菌血清型。一些研究人员认为只有29种独特的血清型，不包括20、22、26、33、32和34号(图7)。血清型2(ST2)在北美和欧洲最为普遍，其次是血清型3和1/2。上述两种已知的鉴定方法各自仅鉴定35种已知种的一部分(图6)。因此，在畜牧业中长期以来都希望获得更全面的血清分型。本文所述的新衍生的方法满足了这一需求。全细胞和许多猪链球菌蛋白已经作为潜在的疫苗候选物进行了研究。用野生型菌苗进行的免疫完全保护免受同源血清型的攻击，而未包封在荚膜内的突变体则未能提供本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.猪链球菌(S.suis)的纯化的多核苷酸，其在动物中引发免疫原性应答，其中所述多核苷酸包含：/na)与具有SEQ ID NO：1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29或31所示序列的多核苷酸具有至少80％序列同一性的氨基酸序列；或者/nb)具有SEQ ID NO：2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30或32所示序列的多肽的保守变体。/n
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170831 US 62/552,9751.猪链球菌(S.suis)的纯化的多核苷酸，其在动物中引发免疫原性应答，其中所述多核苷酸包含：
a)与具有SEQIDNO：1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29或31所示序列的多核苷酸具有至少80％序列同一性的氨基酸序列；或者
b)具有SEQIDNO：2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30或32所示序列的多肽的保守变体。
2.疫苗或免疫原性组合物，其包含根据权利要求1所述的氨基酸序列或多肽或其组合。
3.根据权利要求2所述的疫苗或免疫原性组合物，其能够在猪科动物中提供针对猪链球菌引起的生殖、育龄和生长猪的疾病的安全且有效的免疫应答。
4.根据权利要求3所述的疫苗或免疫原性组合物，其具有编码SEQIDNO：4、8、12或其组合所示序列的多肽的保守变体的多核苷酸。
5.根据权利要求4所述的疫苗或免疫原性组合物，其进一步包含药学上或兽医学上可接受的媒介物、稀释剂或赋形剂。
6.根据权利要求5所述的疫苗或免疫原性组合物，其进一步包含佐剂。
7.根据权利要求6所述的疫苗或免疫原性组合物，其中所述佐剂是灭活细菌、灭活病毒、灭活细菌级分、细菌脂多糖、细菌毒素或其衍生物或组合。
8.根据权利要求3所述的疫苗或免疫原性组合物，其针对强毒猪链球菌的攻击在猪科动物中提供保护性免疫应答。
9.一种给猪科动物接种疫苗的方法，其包括至少一次施用权利要求1-8中任一项所述的疫苗或免疫原性组合物。
10.根据权利要求9所述的方法，其中所述猪科动物是产仔前大约3周至大约6周的母猪。
11.根据权利要求10所述的方法，其中与未接种疫苗的母猪相比，所得到的母猪的生殖、育龄和生长猪的疾病减少。
12.预防或治疗家猪的生殖、育龄和生长猪的疾病的方法，其包括向所述家猪施用权利要求2或3所述的疫苗。
13.猪链球菌荚膜分型的方法，其包括：
【专利技术属性】
技术研发人员：P·劳伦斯，
申请(专利权)人：勃林格殷格翰动物保健美国公司，
类型：发明
国别省市：美国;US
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