同时定量检测样品中肾上腺素类、吩噻嗪类和阿托品类药物含量的方法技术

本发明专利技术公开了一种同时定量检测样品中肾上腺素类、吩噻嗪类和阿托品类药物含量的方法，取待测样品溶液用高效液相色谱检测，其中，以庚烷磺酸钠溶液为流动相A，以甲醇为流动相B进行梯度洗脱。该方法中样品的制备操作简单，能够同时检测最多三类、八种化合物，且每个色谱峰之间的分离情况良好，适于检测食品、药物、血液制品等中肾上腺素受体激动剂类药物、吩噻嗪类药物和阿托品的含量。

Simultaneous quantitative determination of adrenaline, phenothiazine and atropine in samples

【技术实现步骤摘要】
同时定量检测样品中肾上腺素类、吩噻嗪类和阿托品类药物含量的方法
本专利技术涉及检测领域，特别是涉及一种同时对样品中肾上腺素受体激动剂类药物、吩噻嗪类药物和阿托品含量的定量检测方法。
技术介绍
肾上腺素受体激动剂类药物，如肾上腺素、重酒石酸去甲肾上腺素、间羟异丙肾上腺素、盐酸异丙肾上腺素、盐酸去氧肾上腺素等；多巴胺由于是去甲肾上腺素的前身，在体内会被代谢成去甲肾上腺素，因此与肾上腺素受体激动剂类药物一样，通过兴奋交感神经而发挥作用，其药理作用主要表现为兴奋心血管系统、松弛支气管平滑肌、促进新陈代谢等。吩噻嗪类药物，如盐酸异丙嗪、盐酸氯丙嗪，通过作用于多巴胺受体，具有较强的抑制中枢神经的作用，大剂量时可用于镇吐、强化麻醉等。阿托品是一种抗胆碱药物，主要解除平滑肌痉挛，量大可解除小血管痉挛，改善微循环，同时抑制腺体分泌，解除迷走神经对心脏的抑制，使心搏加快、瞳孔散大、眼压升高，兴奋呼吸中枢，解除呼吸抑制。鉴于这些药物的以上作用，有报道称，极个别不法商贩，会将上述三种药物溶解在生理盐水中，在屠宰前给活体动物注射含有上述三种药物的生理盐水，使动物拼命喝水且喝完水后不排出体外，屠宰后得到“注水肉”，且肉质颜色红亮、润泽。为了打击上述不法行为，保证动物源性食品的安全，需要对相关样品，例如市面上售卖的兽用注射液(如氯化钠注射液、葡萄糖注射液)等样品中以上成分的含量进行检测。目前对这三种成分的检测需要在不同实验条件下分别检测其含量。现有的检测方法见表1，其中方法一用来检测肾上腺素受体激动剂类药物(I.Papadoyannis,P.Arzoglou,S.Asvest,et.al.RapidSimutltaneousDeterminationForCatecholaminesByReversed-PhaseHigh-PerformanceLiquidChromatography[J].AnalyticalLetters,1998:545-554.)，采用反相色谱法(C18反相色谱柱，检测波长为280nm)对三种泛醇胺类物质进行了快速同时检测，流动相为甲醇-0.165M乙酸，出峰顺序依次为去甲肾上腺素(保留时间为3.7分钟)、肾上腺素(保留时间为4.5分钟)、多巴胺(保留时间为6.2分钟)。方法二、方法三、方法四、方法五、方法六、方法七、方法八的具体操作分别见《中华人民共和国药典》2015年版二部国家药典委员会编中国医药科技出版社第646页、第968页、第884页、第791页-第792页、第1336页-第1337页、第969页、第1089页-第1090页。表1现有检测方法列表由表1可见，方法四使用的是硫代硫酸钠滴定法，相比于HPLC法，该方法的专属性差、准确度低，容易受到其他化合物的干扰。其它方法由于是三类成分分别检测，不仅检测耗时长、效率低，容易漏检，无法对市场上的非法添加问题进行快速响应，因此不利于打击非法添加问题。因此，一种同时检测肾上腺素受体激动剂类药物、吩噻嗪类药物及阿托品的方法亟待研发。
技术实现思路
本专利技术的主要目的是针对现有技术中存在的技术缺陷，提供一种操作简便、结果准确可靠的能够同时定量检测样品中肾上腺素受体激动剂类药物、吩噻嗪类药物和阿托品含量的方法。为实现本专利技术的目的所采用的技术方案是：同时定量检测样品中肾上腺素类、吩噻嗪类和阿托品类药物含量的方法，取待测样品溶液用高效液相色谱检测，其中，以庚烷磺酸钠溶液为流动相A，以甲醇为流动相B进行梯度洗脱，得到待测样品溶液中各成分的峰面积，通过与各成分标准品的峰面积进行比较，得到各成分的含量，紫外检测波长为190-400nm；优选的，庚烷磺酸钠溶液的浓度为0.13wt％-0.17wt％。所述肾上腺素类药物包括但不限于肾上腺素、重酒石酸去甲肾上腺素、间羟异丙肾上腺素、盐酸异丙肾上腺素和盐酸去氧肾上腺素。所述吩噻嗪类药物包括但不限于盐酸异丙嗪和盐酸氯丙嗪。所述高效液相色谱中的色谱柱选用AgilentZORBAXSB-C18(4.6×250mmid.5μm)、ThermoHypersilGold(4.6×250mmid.5μm)、InertsilODS-3(4.6×250mmid.5μm)或WatersAtlantisT3C18(4.6×250mmid.5μm)。流动相A和流动相B在梯度洗脱0-10min内的体积比为：78:22。流动相A和流动相B在梯度洗脱10-25min内的体积比为：75:25。流动相A和流动相B在梯度洗脱25-40min内的体积比为：30:70。流动相A和流动相B在梯度洗脱40-45min内的体积比为：75:25。柱温为25±5℃、pH值为3.0±0.2。所述待测样品溶液包括但不限于例如氯化钠注射液、葡萄糖注射液、其他药物注射液，或送检样(如兽用药品或兽用食品)制成的溶液。本专利技术提供的同时对样品中肾上腺素受体激动剂类药物、吩噻嗪类药物和阿托品定量检测方法中样品的制备操作简单，能够同时检测最多三类、八种化合物，且每个色谱峰之间的分离情况良好，适于检测样品(包括兽用注射液、兽用食品、兽用药物等)中肾上腺素受体激动剂类药物、吩噻嗪类药物和阿托品的含量，评价所检测样品中是否非法添加了肾上腺素受体激动剂类药物、吩噻嗪类药物和阿托品。本专利技术方法得到的检测结果准确可信，还适用于大规模的样品中违禁药品的快速筛查。附图说明图1为实验一中制剂空白溶液的HPLC色谱图；图2为实验一中阳性供试品溶液的HPLC色谱图；图3为实验四中检测限考察溶液A的色谱和光谱图；图4为实验四中检测限考察溶液B的色谱和光谱图。具体实施方式本专利技术通过大量实验证明，高效液相色谱采用AgilentZORBAXSB-C184.6mm×250mm，5μm色谱柱，柱温为25℃，以0.15％庚烷磺酸钠溶液(用磷酸调节pH值至3.0)为流动相A，以甲醇为流动相B，梯度洗脱，成功将肾上腺素、重酒石酸去甲肾上腺素、间羟异丙肾上腺素、盐酸异丙肾上腺素、盐酸去氧肾上腺素、盐酸异丙嗪、盐酸氯丙嗪和阿托品分离测定；各成分之间色谱分离情况良好，分离度均大于1.8，方法的准确度较高，回收率均在90％-105％之间，8种非法添加物的检出限均为10mg/L。本专利技术的方法可以对上述非法添加物进行有效定量检测。以下结合附图和具体实施例，更具体地说明本专利技术的内容，并对本专利技术作进一步阐述，但这些实施例绝非对本专利技术有任何限制。本领域技术人员在本说明书的启示下对本专利技术实施例中所作的任何变动都将属于本专利技术权利要求书的范围内。实施例中所用方法如无特别说明均为常规方法。如无特别说明，各实施例中相同名称的材料或试剂内容相同。实施例1、同时定量检测样品中肾上腺素受体激动剂类药物、吩噻嗪类药物和阿托品的含量一、实验仪器和材料高效液相色谱：美国沃特世公司，Waters2695型，2489紫外检测器，EmpowerⅡ工作站；色本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.同时定量检测样品中肾上腺素类、吩噻嗪类和阿托品类药物含量的方法，其特征在于，取待测样品溶液用高效液相色谱检测，其中，以庚烷磺酸钠溶液为流动相A，以甲醇为流动相B进行梯度洗脱，得到待测样品溶液中各成分的峰面积，通过与各成分标准品的峰面积进行比较，得到各成分的含量，紫外检测波长为190-400nm；/n优选的，庚烷磺酸钠溶液的浓度为0.13wt％-0.17wt％。/n

【技术特征摘要】
1.同时定量检测样品中肾上腺素类、吩噻嗪类和阿托品类药物含量的方法，其特征在于，取待测样品溶液用高效液相色谱检测，其中，以庚烷磺酸钠溶液为流动相A，以甲醇为流动相B进行梯度洗脱，得到待测样品溶液中各成分的峰面积，通过与各成分标准品的峰面积进行比较，得到各成分的含量，紫外检测波长为190-400nm；
优选的，庚烷磺酸钠溶液的浓度为0.13wt％-0.17wt％。


2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述肾上腺素类药物包括但不限于肾上腺素、重酒石酸去甲肾上腺素、间羟异丙肾上腺素、盐酸异丙肾上腺素和盐酸去氧肾上腺素。


3.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述吩噻嗪类药物包括但不限于盐酸异丙嗪和盐酸氯丙嗪。


4.根据权利要求1-3任一所述方法，其特征在于，所述高效液相色谱中的色谱柱选用AgilentZORBAXSB-C18(4.6×250mmid.5μm)、ThermoHypersilGold(4.6×250mmid.5μm)、InertsilODS-3(4.6×250...

【专利技术属性】
技术研发人员：于晓辉，汪霞，杨星，董玲玲，马秋冉，韩宁宁，顾进华，
申请(专利权)人：中国兽医药品监察所，
类型：发明
国别省市：北京;11