一株具有高黏附能力及降血脂功效的戊糖片球菌PP04制造技术

本发明专利技术公开了一株戊糖片球菌

Pp04, a strain of pentoseudococcus with high adhesion and hypolipidemic effect

【技术实现步骤摘要】
一株具有高黏附能力及降血脂功效的戊糖片球菌PP04
本专利技术属于功能性食品
，具体涉及一株具有高黏附能力及降血脂功效的戊糖片球菌PP04。
技术介绍
随着社会经济水平的提高，我国的饮食结构逐渐趋向于高脂肪和高动物蛋白的西方饮食模式，使得高脂血症又称高脂蛋白血症（hyperlipoproteinemia）的发病率逐年升高，继而引发多种代谢性紊乱疾病，例如，肥胖、非酒精性脂肪性肝病、动脉粥样硬化、冠心病、高血压等。高脂血症指脂肪代谢过程中，血浆中的几种脂质水平比正常值偏高，主要表现为血清胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）比正常水平偏高。同时大量研究表明高脂饮食诱导肥胖的发生过程中会加快机体代谢速率，使得细胞内还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）氧化途径被激活，ROS增多，造成氧化应激，导致机体氧化还原平衡状态被破坏。脂肪组织中发生氧化应激会使脂肪细胞因子分泌失调，因此降低机体氧化应激程度成为治疗肥胖相关代谢性综合症的一个主要治疗靶点。目前针对高脂血症的治疗手段还很局限，主要的临床处理方法有两种，一是饮食干预，二是药物治疗。饮食干预指通过合理的膳食结构维持脂质代谢平衡，基本原则是低胆固醇、低脂、低糖、高膳食纤维。但该方法仅在短期内有效且难以长久坚持，治疗效果逐渐变差；药物治疗效果明显，但降血脂药物往往价格昂贵且副作用大。益生菌经人体摄入后在一定程度上能耐受胃液，胆汁和胰脏分泌物作用而黏附于肠道上皮细胞，以活菌形式定植于肠道中是其发挥益生作用的前提条件。目前研究表明，乳酸菌对肠道上皮细胞的黏附作用有助于其在肠道定植、增强乳酸菌与肠道细胞之间的信号交流、抑制病原菌在肠道的定植。黏附性的评价方法分为直接评价法和间接评价法。一方面利用Caco-2、HT-2和Hela细胞模型进行体外试验直接研究乳酸菌的黏附性。其中，Caco-2细胞为人结肠腺癌上皮细胞，形态和功能与正常的小肠上皮细胞非常接近，比如含有肠道上皮细胞绒毛以及相应的酶。另一方面利用细菌表面的物理化学性质如表面疏水性和自聚集能力可间接反映黏附性强弱，二者均与黏附能力呈正相关。从二十世纪七十年代时起，国外在动物模型中进行了对乳酸菌降血脂作用的诸多研究。Park发现用L.acidophilusATCC43121菌株饲喂高脂饮食诱导的高脂血症大鼠21天后，不仅血清中的TC水平显著性降低，而且LDL-C、IDL-C和VLDL-C含量都有所降低；DingWurong等发现植物乳杆菌Lp3干预喂养可显著降低高胆固醇饮食诱导的大鼠血清和肝脏中胆固醇及甘油三酯水平，并抑制了大鼠肝组织细胞中的脂质沉积。通过大量动物试验和临床试验已经发现，众多乳酸菌如部分植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌等都具有调节人体血清胆固醇水平的功效，主要表现为能显著降低实验动物血清及肝脏中TC和LDL-C等脂质水平，但鲜有报道以下调机体氧化应激程度为靶点研究乳酸菌的降血脂功能。乳酸菌作为价格低廉，安全性高的一类物质，通过服用乳酸菌制剂调节和控制脂质水平对于高血脂症的预防及辅助治疗具有很大的开发前景。
技术实现思路
本专利技术目的是提供一种具有较高肠道黏附及定植能力、能够缓解高脂血症、适合我国居民服用的戊糖片球菌PP04。一株戊糖片球菌PediococcuspentosaceusPP04，它的保藏编号为CCTCCNo:M2019082。一种发酵豆乳，它是由下述方法制备的：1）菌株的活化：将保藏编号为CCTCCNo:M2019082的戊糖片球菌PP04、嗜热链球菌及保加利亚乳杆菌接种于MRS液体培养基中，40~45℃培养12~18h，传代3次，收获菌体；将收获的戊糖片球菌PP04、嗜热链球菌及保加利亚乳杆菌按1~3%的接种量接种于脱脂乳培养基中，在40~45℃下传代2次；2）菌种的驯化：将戊糖片球菌PP04、嗜热链球菌及保加利亚乳杆菌按1~5%的接种量，分别接种于脱脂乳与豆乳的混合培养液中，40~45℃下驯化培养；3）发酵剂的制备：将驯化后戊糖片球菌PP04、保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌菌种按1~10%的接种量分别接种于豆乳中，40~45℃下培养，得到3种母发酵剂；4）发酵豆乳的制备：分别将步骤3）得到的戊糖片球菌PP04、保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌3种母发酵剂，以体积比1~1.5:0.5~1:1~1.5混合，按接种量为1~10%接种于豆乳中，添加质量百分比3~10%的蔗糖，40~45℃下发酵3~7h；所述的豆乳，是由下述方法制备的：大豆，水浸泡10~15h，碱水浸泡2~3h，磨浆，过滤除渣，加糖，煮沸，80~90℃下均质3~7min，杀菌，冷却；步骤3）所述的培养，是培养至豆乳凝乳结束；步骤4）所述的以体积比1:0.5:1混合，接种量为1~5%。一种益生菌固体饮料，它包括下列重量份数的组分：戊糖片球菌PP04冻干粉10份，低聚异麦芽糖5~10份，大豆低聚糖5~10份，果味粉5~15份；所述的戊糖片球菌PP04，它的保藏编号为CCTCCNo：M2019082；所述的果味粉为蓝莓粉或山楂粉。所述的戊糖片球菌PP04冻干粉，是由下述方法制备的：将戊糖片球菌PP04活化，扩大培养，在3000~5000r/min下离心8~15min、用水洗涤，离心弃上清，得到菌体；将菌体和冻干保护剂按体积比1~3:1混合，冷冻干燥，得到戊糖片球菌PP04冻干粉；所述的冻干保护剂，按质量百分比计包括下列组分：脱脂奶粉6%-10%、海藻糖4%-8%、菊粉6%-9%、余量为水。本专利技术提供了一株戊糖片球菌PediococcuspentosaceusPP04，它的保藏编号为CCTCCNo:M2019082；一种发酵豆乳，它是由下述方法制备的：1）菌株的活化；2）菌种的驯化：将戊糖片球菌PP04、嗜热链球菌及保加利亚乳杆菌按1~5%的接种量，分别接种于脱脂乳与豆乳的混合培养液中，40~45℃下驯化；3）发酵剂的制备：将驯化后菌种按1~10%的接种量分别接种于豆乳中，40~45℃下培养，得到3种母发酵剂；4）发酵豆乳的制备：将3种母发酵剂按一定比例混合，接种于豆乳中，添加蔗糖，在40~45℃条件下发酵3~7h；一种益生菌固体饮料，它包括下列重量份数的组分：戊糖片球菌PP04冻干粉10份，低聚异麦芽糖5~10份，大豆低聚糖5~10份，果味粉5~15份。本专利技术戊糖片球菌PP04对Caco-2细胞的黏附率为79.06%。附图说明图1戊糖片球菌PP0416SrDNA序列分析鉴定结果；图2戊糖片球菌PP04对高脂小鼠第八周体重的影响；图3戊糖片球菌PP04对高脂小鼠血清中TC(a)、TG(b)、LDL(c)、HDL(d)水平的影响；图4戊糖片球菌PP04对高脂小鼠肝脏中TC(a)、TG(b)、LDL(c)水平的影响；图5戊糖片球菌PP04对高脂小鼠血清中FFA水平的影响；图6戊糖片球菌PP04对高脂小鼠血清中SOD(a)和GSH-Px(b)本文档来自技高网...

【技术保护点】
1. 一株戊糖片球菌

【技术特征摘要】
1.一株戊糖片球菌PediococcuspentosaceusPP04，它的保藏编号为CCTCCNo:M2019082。


2.一种发酵豆乳，它是由下述方法制备的：
1）菌株的活化：将保藏编号为CCTCCNo:M2019082的戊糖片球菌PP04、嗜热链球菌及保加利亚乳杆菌冻干粉分别接种于MRS液体培养基中，40~45℃培养12~18h，传代3次，收获菌体；将收获的戊糖片球菌PP04、嗜热链球菌及保加利亚乳杆菌按1~3%的接种量接种于脱脂乳培养基中，在40~45℃下传代2次；
2）菌种的驯化：将戊糖片球菌PP04、嗜热链球菌及保加利亚乳杆菌按1~5%的接种量，分别接种于脱脂乳与豆乳的混合培养液中，40~45℃下驯化；
3）发酵剂的制备：将驯化后戊糖片球菌PP04、保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌菌种按1~10%的接种量分别接种于豆乳中，40~45℃下培养，得到3种母发酵剂；
4）发酵豆乳的制备：分别将步骤3）得到的戊糖片球菌PP04、保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌3种母发酵剂，以体积比1~1.5：0.5~1：1~1.5混合，按接种量为1~10%接种于豆乳中，添加质量百分比3~10%的蔗糖，40~45℃下发酵3~7h。


3.根据权利要求2所述的一种发酵豆乳，其特征在于：所述的豆乳，是由下述方法制备的：大豆，水浸泡10~15h...

【专利技术属性】
技术研发人员：王玉华，王宇，李侠，孙海月，田园，朴春红，于寒松，刘俊梅，
申请(专利权)人：吉林农业大学，
类型：发明
国别省市：吉林;22