一种高效产丙酮酸的菌株Desemzia incerta及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种产丙酮酸的Desemzia incerta L243菌株及其应用，所述Desemzia incerta L243菌株于2019年10月8日保藏于广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC)，保藏编号为：GDMCC No：60802。本发明专利技术所述Desemzia incerta L243菌株可发酵产丙酮酸，其发酵液中的丙酮酸含量可达117mg/mL，可用于在医药工业中制备其它药剂，具有较大的应用前景。

A high efficient pyruvic acid producing strain desemzia inserta and its application

【技术实现步骤摘要】
一种高效产丙酮酸的菌株Desemziaincerta及其应用
本专利技术涉及微生物应用
，更具体地，涉及一种高效产丙酮酸的菌株Desemziaincerta及其应用。
技术介绍
丙酮酸是重要的有机合成中间体，其广泛应用于医药、化妆品、化学品生产等工业中，丙酮酸在医药工业上用于合成治疗高血压的新药血管紧张肽Ⅱ、系列蛋白酶抑制，剂、镇静剂、消炎镇痛药辛可芬、药物磷酸烯醇丙酮酸、4-甲唑甲酸、抗结核药异烟肼丙酮酸钙、解热药2-苯基喹啉-4-羧酸以及噻咪唑药物等。尤其是在减肥产品中的大量应用，引起生产和研究的热潮。丙酮酸的生产有化工法和生物技术法两种。相对于化工法生产的丙酮酸而言，生物技术法生产的丙酮酸具有低成本、高质量等优势。目前已知报道生物法生产丙酮酸的主要有菌株有光滑球拟酵母(Torulopsisglabrata)，解脂假丝酵母(Candidalipolytica)，裂褶菌(Schizophyllumcommune)，Agaricuscampestris，大肠杆菌(Escherichiacoli)，Enterococcuscasseliflavus，产气肠杆菌(Enterobacteraerogenes)，不动杆菌(Acinetobactersp.)，Debaryomycescoudertii等。目前还见有产丙酮酸的德库菌属(Desemzia)菌株的相关报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术中存在的上述缺陷和不足，提供一种高效产丙酮酸的DesemziaincertaL243菌株。本专利技术的另一目的在于提供所述DesemziaincertaL243菌株的应用。本专利技术的上述目的是通过以下技术方案给予实现的：本专利技术第一次从生物气溶胶中分离筛选到了一株产丙酮酸的DesemziaincertaL243菌株，所述菌株于2019年10月8日保藏于广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC)，保藏编号为：GDMCCNo：60802。所述DesemziaincertaL243菌株具有如下形态和生理、生化特性：a.菌体形态特征及生理生化特性：采用常规的细菌生理生化鉴定方法和电子显微镜观察，所述菌株L243为革兰氏阳性，杆状，氧化酶阴性，过氧化氢酶阳性，生长最佳pH6～8，最佳温度是37℃。b.菌落形态特征：所述菌株L243在营养琼脂培养基平板上培养24h后，菌落表面淡黄色，圆形，有小的凸起。进一步地，所述DesemziaincertaL243菌株的16SrDNA序列如SEQIDNO：1所示。本专利技术的DesemziaincertaL243菌株可发酵产丙酮酸，其发酵液中的丙酮酸含量可达117mg/mL。因此本专利技术请求保护所述的DesemziaincertaL243菌株在制备丙酮酸中的应用。优选地，为DesemziaincertaL243菌株发酵液在制备丙酮酸中的应用。具体地，将DesemziaincertaL243菌株接种至发酵培养液中，发酵产丙酮酸。优选地，所述发酵培养液配方为：10％葡萄糖，0.1％大豆蛋白胨，0.6％(NH4)2SO4，0.1％KH2PO4，0.05％MgSO4·7H2O和4％CaCO3，pH5.5。优选地，将对数生长期DesemziaincertaL243菌株接种至发酵培养液中，34～38℃(优选37℃)培养5～15h(10h)发酵产丙酮酸。与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：本专利技术提供了一种产丙酮酸的DesemziaincertaL243菌株，所述DesemziaincertaL243菌株于2019年10月8日保藏于广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC)，保藏编号为：GDMCCNo：60802。本专利技术所述DesemziaincertaL243菌株可高效产丙酮酸，其发酵液中的丙酮酸含量可达117mg/mL，可用于在医药工业中制备其它药剂，具有较大的应用前景。具体实施方式以下结合具体实施例来进一步说明本专利技术，但实施例并不对本专利技术做任何形式的限定。除非特别说明，本专利技术采用的试剂、方法和设备为本
常规试剂、方法和设备。除非特别说明，以下实施例所用试剂和材料均为市购。实施例1DesemziaincertaL243菌株的分离和鉴定1、DesemziaincertaL243菌株的分离(1)培养基配置筛选培养基：硫酸铵0.5g，Na2S2O3·5H2O10.00g，蛋白胨1g，CaCl20.2g，KH2PO43g，微量元素溶液10mL，蒸馏水1000mL，pH7.0，121℃、20min灭菌。微量元素溶液(gL-1)：乙二酸四乙酸二钠(EDTA)0.22g，(NH4)6Mo7O24·4H2O0.11g，CoCl2·6H2O0.1g，MnCl2·4H2O0.425g，ZnCl20.05g，CuSO4·5H2O0.015g，Na2SeO4·2H2O0.01g，其配制方法是按照上述各成分的含量加入到1L水中，搅拌溶解，即得。(2)本专利技术的DesemziaincertaL243菌株是从南方医科大学的运动场的空气中分离、纯化而得。其分离纯化方法如下：使用安德森六级空气微生物采样器BY-300采集空气样品，采样前给主机充好电，用75％酒精擦拭撞击器并紫外30分钟。采样时，在选定的采样地点，用三脚架将撞击器支起，放置于距离地面1.5米的高度，用橡胶管连接好主机，校正流量，使采样流量稳定在28.3L/min。带好口罩和手套，一手打开培养盖一手迅速盖上撞击盘，将培养皿(里面含有筛选培养基)按顺序放入。打开撞击器进去口上盖，离开采样点2米之外，启动采用。采样时间为10分钟，3次重复。记录采样当天气象参数。采样结束后，迅速取出采样平皿扣上盖子，放入无菌箱中带回实验室。皿底朝上，于37℃恒温箱中培养24小时，检查菌落生长情况。从中挑取快速生长的菌落进行纯化，并使用硫化物氧化能力筛选，最后获得菌株L243。2、DesemziaincertaL243菌株的鉴定(1)菌株L243的形态和生理、生化特性鉴定：a.菌体形态特征及生理生化特性：采用常规的细菌生理生化鉴定方法和电子显微镜观察，所述菌株L243为革兰氏阳性，杆状，氧化酶阴性，过氧化氢酶阳性，生长最佳pH6～8，最佳温度是37℃。b.菌落形态特征：所述菌株L243在营养琼脂培养基平板上培养24h后，菌落表面淡黄色，圆形，有小的凸起。(2)DesemziaincertaL243的分子生物学鉴定：提取菌株菌株L243的16SrRNA并测序，其序列如SEQIDNO.1所示，将其与NCBI网站数据库进行BLAST分析，结果分析表明，其与菌株Desemziaincerta的模式菌种的相似性最高，其中与DesemziaincertaDSM20581T的序列相似性为99％。综合上述的生理生化特性、16SrRNA基因序列结果，鉴定菌株L243属于Desemzi本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种产丙酮酸的Desemzia incerta L243菌株，其特征在于，所述菌株于2019年10月8日保藏于广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC)，保藏编号为：GDMCC No：60802。/n

【技术特征摘要】
1.一种产丙酮酸的DesemziaincertaL243菌株，其特征在于，所述菌株于2019年10月8日保藏于广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC)，保藏编号为：GDMCCNo：60802。


2.根据权利要求1所述的DesemziaincertaL243菌株，其特征在于，所述菌株的16SrDNA序列如SEQIDNO：1所示。


3.权利要求1所述的DesemziaincertaL243菌株或其发酵液在制备丙酮酸中的应用。


4.根据权利要求3所述的应用，其特征在...

【专利技术属性】
技术研发人员：张国霞，陈佩，吴继国，叶菊风，蒋云霞，
申请(专利权)人：南方医科大学，
类型：发明
国别省市：广东;44