一种Marizomib关键中间体的制备方法及其应用技术

本发明专利技术属于化学合成领域，具体涉及一种Marizomib关键中间体的制备方法及其应用。具体为一种Marizomib关键中间体的制备方法，通过选用天然的L‑丝氨酸作为起始原料，得到的官能团保护的丝氨酸片段与1,3‑二羰基环丙基化合物联接，从而制备得到Marizomib关键中间体(骨架结构)，不仅制备效率高、收率高，且更加安全、绿色环保。接着，利用制备的Marizomib关键中间体生产Marizomib，依次经过分子内关环反应及基团修饰、脱去保护基和结构修饰得到Marizomib。此外，整个合成过程，使用低毒性溶剂，避免使用毒性大、制备困难的试剂，且溶剂使用量少，目标产物回收率高，稳定性好。

Preparation and application of a key intermediate of marizomib

【技术实现步骤摘要】
一种Marizomib关键中间体的制备方法及其应用
本专利技术属于化学合成领域，具体涉及一种Marizomib关键中间体的制备方法及其应用。
技术介绍
SalinosporamideA(NPI-0052，Marizomib)是一种新型海生的蛋白酶体抑制剂，在人红细胞20S蛋白酶体中，抑制CT-L、C-L和T-L蛋白酶体活性，EC50为3.5nM、430nM和28nM，同时还对很多肿瘤细胞具有非常强的体外细胞毒性(IC50在10nM水平)，其结构与同是蛋白酶体抑制剂的Lactacystin和Omuralide具有很大的相似性，更多的Marizomib类似物被分离到并且很多都具有蛋白酶体抑制活性，如CinnabaramideA。蛋白酶体的主要作用是降解细胞不需要的或受到损伤的蛋白质，蛋白酶体降解途径对于许多细胞进程，包括细胞的增殖和凋亡都是必不可少的。因此，蛋白酶体成为药物研发中重要的生物靶点，蛋白酶体抑制剂作为潜在的抗癌药物被广泛研究，Marizomib具有高度官能化的吡咯烷酮骨架(γ-内酰胺环)，β-内酯环和环己烯基环等特征结构，并且还具有5个本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种Marizomib关键中间体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：/n(1)合成β酮酰氯：将乙酰乙酸乙酯与DMF混合并搅拌，加入粉状K

【技术特征摘要】
1.一种Marizomib关键中间体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)合成β酮酰氯：将乙酰乙酸乙酯与DMF混合并搅拌，加入粉状K2CO3继续搅拌充分，缓慢加入1,2-二溴乙烷，室温下反应12小时，对反应液进行抽滤，用乙酸乙酯对滤饼进行洗涤，接着合并滤液和乙酸乙酯，除去DMF，洗涤，干燥后得到浓缩产物，将浓缩产物加入到氢氧化钠乙醇溶液中回流12小时，浓缩反应液，除去乙醇，加水稀释，用乙酸乙酯萃取得到化合物1，再将化合物1溶于二氯甲烷中，冰水浴下搅拌，缓慢滴入草酰氯和DMF催化，继续搅拌，将反应液降至低温并浓缩得到化合物2，所述化合物2为β酮酰氯；



(2)合成N-PMB-O-TBS-L-丝氨酸甲酯：
S1：将L-丝氨酸与甲醇混合搅拌，冰水浴下缓慢滴入二氯亚砜，回流，在反应液中加入乙酸乙酯以析出晶体，抽滤，用乙酸乙酯洗涤，真空干燥得到化合物3；
S2：在化合物3中加入甲醇搅拌，冰水浴下滴加二异丙基乙基胺，再滴加茴香醛搅拌12小时，将硼氢化钠加入反应液中，继续搅拌并将反应液浓缩至干，加入乙酸乙酯溶解，洗涤，浓缩乙酸乙酯层，搅拌条件下加入正己烷，得到结晶产物，将所述结晶产物进行重结晶，加入乙酸乙酯搅拌溶解，加热至50℃，滴加正己烷，降至室温后得到化合物4；
S3：将化合物4和咪唑溶于二氯甲烷中，冰水浴下分批加入叔丁基二甲氧基氯硅烷,加完升至室温搅拌，抽滤，滤饼用二氯甲烷洗涤，合并有机相，依次用水、饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，再加入乙酸乙酯和正己烷，结晶得到化合物5，所述化合物5为N-PMB-O-TBS-L-丝氨酸甲酯；



(3)偶联反应：将化合物2溶于二氯甲烷中，加入吡啶，回流，再缓慢滴加入化合物5进行偶联反应，原料转化完全后加入二氯甲烷稀释，依次用盐酸、饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩后柱层析纯化，得到化合物6和化合物7混合物；



(4)转化：向所述混合物中加入乙酸乙酯和甲醇混合液，加入硅胶，搅拌，使得化合物6转化为化合物7，层析纯化，得到所述Marizomib关键中间体7。


2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)合成β酮酰氯具体包括：
将17.4mL乙酰乙酸乙酯与70mLDMF混合并搅拌，加入41.4g粉状K2CO3继续搅拌充分约10分钟后，缓慢加入17.2mL1,2-二溴乙烷，约半小时加完，室温下反应12小时，对反应液进行抽滤，用100ml乙酸乙酯对滤饼进行洗涤2次；
接着，合并滤液和乙酸乙酯，用水洗涤除去DMF，再用饱和食盐水洗涤1次，无水硫酸钠干燥得到浓缩产物；
然后，取24.87g浓缩产物，加到100mL含4.4g氢氧化钠的50％乙醇溶液中，90℃回流12小时；浓缩反应液，除去乙醇，加水稀释，用乙酸乙酯萃取，倒掉乙酸乙酯相；水相用浓盐酸调节至pH＝1，再用乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩得到化合物1；再将化合物1溶于30mL二氯甲烷中，冰水浴下搅拌，缓慢滴入4mL草酰氯，加入1滴DMF催化，搅拌15分钟后升至室温继续搅拌3小时，将反应液降温至≤30℃并浓缩得到β酮酰氯。


3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述用乙酸乙酯萃取得到化合物1具体包括：水相用浓盐酸调节至pH＝1，用乙酸乙酯萃取，用饱和食盐水对乙酸乙酯相进行洗涤，接着用无水硫酸钠进行干燥，浓缩得到化合物1。


4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)合成N-PMB-O-TBS-L-丝氨酸甲酯具体包括：
S101：将12.2gL-丝氨酸与50mL甲醇混合搅拌，冰水浴下缓慢滴入23.5mL二氯亚砜，滴毕，65℃回流6小时，在反应液中加入乙酸乙酯以析出晶体，抽滤，用10ml冰冻乙酸乙酯洗涤，真空干燥得到化合物3；
S102：在化合物3中加入50mL甲醇搅拌，冰水浴下滴加21mL二异丙基乙基胺，再滴加14.2mL茴香醛搅拌12小时，将7.35g硼氢化钠分批加入反应液中，继续搅拌1h后将反应液浓缩至干，用固体质量比1：4的乙酸乙酯溶解，用饱和食盐水洗涤2次，浓缩乙酸乙酯层至原体积的三分之一，搅拌条件下加入两倍体积的正己烷，得到结晶产物，将所述结晶产物进行重结晶，加入固体质量比1：2的乙酸乙酯搅拌溶解，加热到50℃，按照体积比1：1滴加正己烷，缓慢降至室温后得到化合物4；
S103：取23.95g化合物4和10.2g咪唑溶于200mL二氯甲烷中，冰水浴下分批加入15.8g叔丁基二甲氧基氯硅烷,加完升至室温搅拌2小时后抽滤，滤饼用二氯甲烷洗涤，合并有机相，依次用水、饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，再用质量比1：3的乙酸乙酯溶解，加热至50℃，搅拌条件下按照1：2的体积比滴加乙酸乙酯和正己烷，继续搅拌至室温，结晶得到N-PMB-O-TBS-L-丝氨酸甲酯。

【专利技术属性】
技术研发人员：庄鸿，乐占线，陈秀明，罗立津，黄楷，
申请(专利权)人：福建省微生物研究所，
类型：发明
国别省市：福建;35