一种分离铁观音茶叶青滋香成分及其检测方法技术

本发明专利技术属于分离检测技术领域，公开了分离铁观音茶叶青滋香成分及其检测方法，包括：(1)将铁观音茶叶制作物进行水蒸气蒸馏，得到馏出液，干燥处理，得到干燥后的固体物质；(2)将该固体物质溶解于溶剂中，过滤后进行凝胶渗透色谱分离，流动相流速为1～8mL/min，每收集1～8分钟得到一个流分，共得到一百个以上的流分；(3)对各个流分进行香气评定，确定具有青滋香特征的流分；(4)合并具有青滋香特征的流分，采用气相色谱‑质谱检测合并的流分，结合谱图数据库和/或谱图文献定性出该流分中的铁观音茶叶青滋香成分；(5)通过内标定量法检测出铁观音茶叶青滋香成分含量。本发明专利技术方法能够对铁观音茶叶制作物中青滋香成分进行定性定量分析。

A method for the separation and determination of the aroma components in Tieguanyin tea

【技术实现步骤摘要】
一种分离铁观音茶叶青滋香成分及其检测方法
本专利技术属于分离检测
，具体涉及一种分离铁观音茶叶青滋香成分及其检测方法。
技术介绍
铁观音属于中国传统名茶中青茶的代表之一，铁观音茶叶加工工艺由采青、晒青、做青、杀青、包揉、烘干等工序组成，每一道工艺都赋予铁观音茶叶特殊的香气特征。铁观音具有清香、花香、果香等香气特征，同时又具有苦味、涩感等味觉特征，这些不同的感官特征来源于不同的成分组群。尽管国内外对茶叶香味物质进行了大量研究，但目前多集中于茶叶香气物质的定性分析(张峰,陈小明,范坚强,等.铁观音杀青物香料的开发及其在卷烟中的应用[J].香精香料化妆品,2016,12(6):16-20；马宇平,岳田利,毛多斌,等.“湖南毛尖”香味成分的超临界CO2萃取剂在烟草中的应用[J].烟草科技,2006,(6):30-34.)，随着所发现茶叶香气成分不断增加，如何将茶叶体系的成分分析结果和感官品质进行有效的关联，明确各种香味成分的感官贡献机制，对于茶叶提取物的生产、精制、应用、调控和仿制具有重要意义。茶叶和烟草作为消费品，其特征具有诸多相似之处，都是以特殊的香气满足消费者的需求。青滋香是烟草香韵的重要组成部分，有学者研究报道，云南和福建烤烟的香韵中以清甜香和青滋香最为显著(李章海，王能如，王东胜，等.烤烟香型的重要影响因子及香型指数模型的构建初探[J].安徽农业科学，2009，37(5)：2055-2057.)，而青滋香可以作为区分云南和福建烤烟香韵的一个重要指标(夏玉珍，王毅，牟定荣，等，福建和云南烤烟香韵风格特征差异及与化学成分的关系[J].烟草科技,2015,48(6):68-72.)；茶叶提取物含有明显的青滋香韵，代表成分有叶醇、芳樟醇等物质，通过感官介导的方式，将化学分析手段与感官评价技术相结合，构建福建特色茶叶提取物化学成分与感官特征之间的有效联系，不仅提高福建特色茶叶提取物在烟草工业应用的可控性和针对性，并且可方便卷烟产品的调配使用和香味仿制提供关键性支持。因此，目前需要一种铁观音茶叶青滋香成分分离及检测方法。
技术实现思路
专利技术人经过一系列对于铁观音茶叶进行分离和检测的研究，定性得到了铁观音茶叶中具有青滋香特征的化学成分，并定量检测出了铁观音茶叶中青滋香成分的含量。本专利技术提供了一种分离铁观音茶叶青滋香成分及其检测方法，所述方法包括以下步骤：(1)将铁观音茶叶制作物进行水蒸气蒸馏，得到铁观音茶叶制作物水蒸气馏出液，并将铁观音茶叶制作物水蒸气馏出液进行干燥处理，得到干燥后的固体物质；(2)将步骤(1)中所获得的固体物质溶解于溶剂中，过滤后进行凝胶渗透色谱分离，凝胶渗透色谱采用的流动相流速为1～8mL/min，例如2mL/min、3mL/min、4mL/min、5mL/min、6mL/min、7mL/min，每收集1～8分钟(例如2、3、4、5、6、7分钟)得到一个流分，共得到一百个以上的流分；(3)按照GB/T14454.2-2008“香料香气评定法”对步骤(2)中各个流分进行香气评定，确定具有青滋香特征的流分；(4)将具有青滋香特征的流分合并，并采用气相色谱-质谱(GC-MS)来检测合并的具有青滋香特征的流分，得到检测谱图，结合谱图数据库和/或谱图文献以定性出该流分中的铁观音茶叶青滋香成分；(5)通过内标定量法检测出铁观音茶叶青滋香成分的含量。在本专利技术的一些实施方案中，在步骤(1)中铁观音茶叶制作物包括铁观音茶叶加工制作过程中的采青物、晒青物、做青物、杀青物、包揉物、烘干物和成品茶；优选地，所述铁观音茶叶制作物选自铁观音茶叶做青物和铁观音茶叶杀青物；更优选地，所述杀青物包括纯露、精油、净油、提取物等形式。在本专利技术的一些实施方案中，在步骤(1)中水蒸气蒸馏包括水中蒸馏、水上蒸馏和直通水蒸气蒸馏，优选直通水蒸气蒸馏，更优选水蒸气蒸馏的冷凝温度为10℃～25℃，例如15℃～25℃、10℃～25℃、10℃～20℃。在本专利技术的一些实施方案中，在步骤(1)中干燥处理包括自然蒸发干燥、真空蒸发干燥和冷冻干燥处理；优选地，干燥处理为冷冻干燥处理；更优选地，冷冻干燥处理包括将铁观音茶叶制作物水蒸气馏出液置于冰箱中冷冻6～12小时(例如7、8、9、10、11小时)，和将冷冻后的所述馏出液进行干燥处理。在本专利技术的一些实施方案中，在本专利技术的一些实施方案中，在步骤(2)中固体物质和溶剂的配置浓度为0.05～1g/mL，例如0.05～0.8g/mL，例如0.05～0.6g/mL，例如0.05～0.4g/mL，包括例如0.1g/mL、0.2g/mL、0.3g/mL、0.4g/mL、0.5g/mL、0.6g/mL、0.7g/mL、0.8g/mL。在本专利技术的一些实施方案中，步骤(2)中溶剂选自乙醇、丙醇、异丙醇、丙二醇、水及其中任意多种的组合，优选为乙醇。在本专利技术的一些实施方案中，在步骤(2)中凝胶渗透色谱所用的填料包括SephadexG-10、SephadexG-15、Sepharose6B、SepharoseConA、SephadexG-25和SephadexLH-20，优选SephadexG-10、SephadexG-15和SephadexLH-20。在本专利技术的一些实施方案中，在步骤(2)中凝胶渗透色谱所用的流动相包括乙醇、丙醇、异丙醇、丙二醇、水及其中任意多种的组合，优选乙醇、水及其组合。在本专利技术的一些实施方案中，在步骤(2)中经过凝胶渗透色谱分离得到一百个以上的流分，例如约100～180个流分，例如约110～170个流分，例如约120～150个流分，例如约115～145个流分，例如117个、125个、133个、145个流分。在本专利技术的一些实施方案中，在步骤(3)中按照GB/T14454.2-2008“香料香气评定法”(例如其中的三角评析法)对通过凝胶渗透色谱分离得到的各个流分的嗅觉特征进行香气评定，确定具有青滋香特征的流分，每次评价时评香人员不少于5人。在本专利技术的一些实施方案中，在步骤(4)中铁观音茶叶青滋香成分为代表性的7种青滋香成分，它们包括叶醇、正己酸乙酯2-甲基丁酸丁酯、苯乙醛、水杨酸甲酯、二氢猕猴桃内酯。在本专利技术的一些实施方案中，在步骤(4)中气相色谱-质谱的条件在于如下(a)至(k)中的一项或多项：(a)色谱柱选自DB-5MS及其等效柱；优选地，色谱柱的规格为60m×0.25mm×0.25μm；(b)气相色谱采用的载气为氦气；(c)气相色谱的载气流量为0.5～10mL/min；(d)气相色谱的进样温度为280℃；(e)气相色谱的升温程序为：以3℃/分钟的速度，从50℃升至300℃，在300℃保持1分钟；(f)气相色谱采用不分流模式；(g)质谱的传输线温度为280℃；(h)质谱的EI离子源温度为230℃；(i)质谱的四级杆温度为150℃；(j)质谱的EI电离能为70eV；(k)质谱的扫描模式为选择本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种分离铁观音茶叶青滋香成分及其检测方法，所述方法包括以下步骤：/n(1)将铁观音茶叶制作物进行水蒸气蒸馏，得到铁观音茶叶制作物水蒸气馏出液，并将铁观音茶叶制作物水蒸气馏出液进行干燥处理，得到干燥后的固体物质；/n(2)将步骤(1)中所获得的固体物质溶解于溶剂中，过滤后进行凝胶渗透色谱分离，凝胶渗透色谱采用的流动相流速为1～8mL/min，每收集1～8分钟得到一个流分，共得到一百个以上的流分；/n(3)按照GB/T 14454.2-2008“香料香气评定法”对步骤(2)中各个流分进行香气评定，确定具有青滋香特征的流分；/n(4)将具有青滋香特征的流分合并，并采用气相色谱-质谱(GC-MS)来检测合并的具有青滋香特征的流分，得到检测谱图，结合谱图数据库和/或谱图文献以定性出该流分中的铁观音茶叶青滋香成分；/n(5)通过内标定量法检测出铁观音茶叶青滋香成分的含量。/n

【技术特征摘要】
1.一种分离铁观音茶叶青滋香成分及其检测方法，所述方法包括以下步骤：
(1)将铁观音茶叶制作物进行水蒸气蒸馏，得到铁观音茶叶制作物水蒸气馏出液，并将铁观音茶叶制作物水蒸气馏出液进行干燥处理，得到干燥后的固体物质；
(2)将步骤(1)中所获得的固体物质溶解于溶剂中，过滤后进行凝胶渗透色谱分离，凝胶渗透色谱采用的流动相流速为1～8mL/min，每收集1～8分钟得到一个流分，共得到一百个以上的流分；
(3)按照GB/T14454.2-2008“香料香气评定法”对步骤(2)中各个流分进行香气评定，确定具有青滋香特征的流分；
(4)将具有青滋香特征的流分合并，并采用气相色谱-质谱(GC-MS)来检测合并的具有青滋香特征的流分，得到检测谱图，结合谱图数据库和/或谱图文献以定性出该流分中的铁观音茶叶青滋香成分；
(5)通过内标定量法检测出铁观音茶叶青滋香成分的含量。


2.根据权利要求1所述的方法，其中在步骤(1)中所述铁观音茶叶制作物包括铁观音茶叶加工制作过程中的采青物、晒青物、做青物、杀青物、包揉物、烘干物和成品茶；
优选地，所述铁观音茶叶制作物选自铁观音茶叶做青物和铁观音茶叶杀青物；
更优选地，所述杀青物包括纯露、精油、净油、提取物等形式。


3.根据权利要求1或2所述的方法，其中在步骤(1)中所述水蒸气蒸馏包括水中蒸馏、水上蒸馏和直通水蒸气蒸馏，优选直通水蒸气蒸馏，更优选水蒸气蒸馏的冷凝温度为10～25℃。


4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其中在步骤(1)中所述干燥处理包括自然蒸发干燥、真空蒸发干燥和冷冻干燥处理；
优选地，所述干燥处理为冷冻干燥处理，
更优选地，所述冷冻干燥处理包括将铁观音茶叶制作物水蒸气馏出液置于冰箱中冷冻6～12小时，和将冷冻后的所述馏出液进行干燥处理。


5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中在步骤(2)中所述固体物质和溶剂的配置浓度为0.05～1g/mL，其中所述溶剂选自乙醇、丙醇、异丙醇、丙二醇、水及其中任意多种的组合，优选为乙醇。


6.根据权利要求1-5中任一项所述的方法，其中在步骤(2)中所述凝胶渗透色谱所用的填料包括SephadexG-10、SephadexG-15、Sepharose6B、SepharoseConA、SephadexG-25和SephadexLH-20，优选SephadexG-10、SephadexG-15和SephadexLH-20。


7.根据权利要求1-6中任一项所述的方法，其中在步骤(2)中所述凝胶渗透色谱所用的流动相包括乙醇、丙醇、异丙醇、丙二醇、水及其中任意多种的组合，优选乙醇、水及其组合。


8.根据权利要求1-7中任一项所述的方法，其中在步骤(4)中气相色谱-质谱的条件在于如下(a)至(k)中的一项或多项：<...

【专利技术属性】
技术研发人员：伊勇涛，谢金栋，张峰，杨金英，操晓亮，李斌，茅中一，陈小明，
申请(专利权)人：福建中烟工业有限责任公司，厦门烟草工业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：福建;35