修饰的巨细胞病毒蛋白和稳定的复合物制造技术

描述了突变型人巨细胞病毒(HCMV)五聚体复合物多肽、其制备方法及其在HCMV蛋白复合物和组合物中的用途。具体而言，描述了修饰的HCMV多肽用于稳定HCMV复合物或暴露五聚体表位的用途。

Modified cytomegalovirus protein and stable complex

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】修饰的巨细胞病毒蛋白和稳定的复合物序列表本申请含有电子提交的ASCII文本文件格式的序列表(名称：VB66226WO_SeqLstg_ST25.txt；大小：195,491个字节；和创建日期：2018年4月2日)，其在此通过引用以其整体并入。专利技术人或共同专利技术人的公开专利技术人、专利技术人们或从专利技术人获得主题的另一人已经公开了Chandramouli等人,2017ScienceImmunology2(12):eaan1457和ProteinDataBank(PDB)ID5VOB。专利
本专利技术处于针对人巨细胞病毒(HCMV)的疫苗接种的领域中，并且具体而言提供了突变型gH、gL、pUL128、pUL130和pUL131A多肽以及包含gH、gL、pUL128、pUL130和pUL131A多肽中的两种或更多种的稳定的HCMV复合物，其中两种多肽中的至少一种是突变体，以及其在免疫原性组合物或疫苗组合物中的用途。专利技术背景巨细胞病毒(CMV)是属于被称作疱疹病毒科或疱疹病毒的病毒科的病毒属。感染人的物种本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.HCMV gH多肽或其复合物形成片段，其包含一个或多个空腔填充突变、一个或多个疏水突变、一个或多个亲水突变、一个或多个二硫桥突变、一个或多个去糖基化突变或其中一者或多者的组合。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170419 US 62/487065;20170510 US 62/504059;2017061.HCMVgH多肽或其复合物形成片段，其包含一个或多个空腔填充突变、一个或多个疏水突变、一个或多个亲水突变、一个或多个二硫桥突变、一个或多个去糖基化突变或其中一者或多者的组合。


2.HCMVgH多肽或其复合物形成片段，其包含氨基酸序列，其中(a)所述序列与SEQIDNO:1具有至少90%同一性，且(b)：
(i)氨基酸残基A102、A372、A352和L2S7中的一个或多个被选自色氨酸(W)、苯丙氨酸(F)、酪氨酸(Y)和亮氨酸(L)的氨基酸取代；
(ii)氨基酸残基H252、K404、R255、E355、H480、S601和R405中的一个或多个被选自色氨酸(W)、苯丙氨酸(F)、甲硫氨酸(M)、半胱氨酸(C)、丙氨酸(A)、亮氨酸(L)、异亮氨酸(I)、缬氨酸(V)和脯氨酸(P)的氨基酸取代；
(iii)氨基酸残基G358和H327中的一个或多个被选自丝氨酸(S)、苏氨酸(T)、半胱氨酸(C)、酪氨酸(Y)、天冬酰胺(N)、谷氨酰胺(Q)、精氨酸(R)、谷氨酸(E)、赖氨酸(K)、组氨酸(H)和天冬氨酸(D)的氨基酸取代；
(iv)氨基酸残基V109和/或L11被半胱氨酸(C)取代；
(v)氨基酸残基N55、N62、N67、N192、N641和N700中的一个或多个被选自谷氨酰胺(Q)、丝氨酸(S)、苏氨酸(T)、丙氨酸(A)、谷氨酸(E)和天冬氨酸(D)的氨基酸取代；或
vi.)其组合。


3.HCMVgL多肽或其复合物形成片段，其包含一个或多个空腔填充突变、一个或多个疏水突变、一个或多个亲水突变、一个或多个二硫桥突变、一个或多个去糖基化突变或其组合。


4.HCMVgL多肽或其复合物形成片段，其包含氨基酸序列，其中(a)所述序列与SEQIDNO:5具有至少90%同一性，且(b)：
(i)氨基酸残基H177、G224、G140、G145、D146、G218、L119、C233和P272中的一个或多个被选自色氨酸(W)、苯丙氨酸(F)、酪氨酸(Y)和亮氨酸(L)的氨基酸取代；
(ii)氨基酸残基H267、H236、H245、G161和C233中的一个或多个被选自色氨酸(W)、苯丙氨酸(F)、甲硫氨酸(M)、半胱氨酸(C)、丙氨酸(A)、亮氨酸(L)、异亮氨酸(I)、缬氨酸(V)和脯氨酸(P)的氨基酸取代；
(iii)氨基酸残基G161、D163、G224、G218、R166、G140、R160和A150中的一个或多个被半胱氨酸(C)取代；
(iv)氨基酸残基N74被选自谷氨酰胺(Q)、丝氨酸(S)、苏氨酸(T)、丙氨酸(A)、谷氨酸(E)和天冬氨酸(D)的氨基酸取代；或
v.)其组合。


5.HCMVpUL128多肽或其复合物形成片段，其包含一个或多个空腔填充突变、一个或多个疏水突变、一个或多个亲水突变、一个或多个二硫桥突变或其中一者或多者的组合。


6.HCMVpUL128多肽或其复合物形成片段，其包含氨基酸序列，其中(a)所述序列与SEQIDNO:13具有至少90%同一性，且(b)：
(i)氨基酸残基G123、V77、L103和Q119中的一个或多个被选自色氨酸(W)、苯丙氨酸(F)、酪氨酸(Y)和亮氨酸(L)的氨基酸取代；
(ii)氨基酸残基G145、H90和G112中的一个或多个被选自色氨酸(W)、苯丙氨酸(F)、甲硫氨酸(M)、半胱氨酸(C)、丙氨酸(A)、亮氨酸(L)、异亮氨酸(I)、缬氨酸(V)和脯氨酸(P)的氨基酸取代；
(iii)氨基酸残基R142、N99、Y98、A124、G126、L159、D45、V88、M48、G107、R51、D106和S83中的一个或多个被半胱氨酸(C)取代；或
(iv)其组合。


7.HCMVpUL130多肽或其复合物形成片段，其包含一个或多个空腔填充突变、一个或多个疏水突变、一个或多个亲水突变、一个或多个二硫桥突变、一个或多个去糖基化突变或其中一者或多者的组合。


8.HCMVpUL130多肽或其复合物形成片段，其包含氨基酸序列，其中(a)所述序列与SEQIDNO:17具有至少90%同一性，且(b)：
(i)氨基酸残基D165和H209中的一个或多个被选自色氨酸(W)、苯丙氨酸(F)、酪氨酸(Y)和亮氨酸(L)的氨基酸取代；
(ii)氨基酸残基G116、G135、H150和H209中的一个或多个被选自色氨酸(W)、苯丙氨酸(F)、甲硫氨酸(M)、半胱氨酸(C)、丙氨酸(A)、亮氨酸(L)、异亮氨酸(I)、缬氨酸(V)和脯氨酸(P)的氨基酸取代；
(iii)氨基酸残基G116、H150、P64、S178、P62、E95、Y204、N211、I213、Y56和T167中的一个或多个被半胱氨酸(C)取代；
(iv)氨基酸残基N85、N118和N201中的一个或多个被选自谷氨酰胺(Q)、丝氨酸(S)、苏氨酸(T)、丙氨酸(A)、谷氨酸(E)和天冬氨酸(D)的氨基酸取代；或
v.)其组合。


9.HCMVpUL131A多肽或其复合物形成片段，其包含...

【专利技术属性】
技术研发人员：E马利托，S钱德拉莫利，A卡菲，M博顿利，
申请(专利权)人：葛兰素史密丝克莱恩生物有限公司，
类型：发明
国别省市：比利时;BE