一种微生物来源灵菌红素类似物及其制备方法与应用技术

本发明专利技术提供一种微生物来源灵菌红素类似物及其制备方法与应用，属于生物技术领域。本发明专利技术从微生物代谢产物中分离纯化获得一种灵菌红素类似物，其分子式为C

The preparation and application of a kind of rhodopsin analogue from microorganism

【技术实现步骤摘要】
一种微生物来源灵菌红素类似物及其制备方法与应用
本专利技术属于生物
，具体涉及一种微生物来源灵菌红素类似物及其制备方法与应用。
技术介绍
灵菌红素是粘质沙雷氏菌（S.marcescens）的红色代谢产物，是一类具有多吡咯环的天然红色素的总称，其分子结构通常都有3个吡咯环组成的甲氧基吡咯骨架结构。不同的灵菌红素的化合物具有不同的生物学活性。根据烷基侧链的结构特点可以分为prodigiosin（PG）、undecylprodigiosin（UP）、cylononyl-prodiginine（CPrG）和metacycloprodigiosin（MP）等。该色素具有抗细菌、抗真菌、抗疟疾、免疫抑制、抗肿瘤等活性，在染色、抑制赤潮方面也受到关注，在抗肿瘤方面，因为其具有癌组织的高针对性和对正常细胞则表现的低毒害作用，而成为一种非常有潜力的抗癌物质。2007年美国GeminX制药公司开发的灵菌红素类抗癌专利药物GX15-070已经进入临床II期研究，该小分子药物有望成为新型诱导凋亡的药物。灵菌红素类似物或衍生物在医药工业中有广泛的应用前景，正成为抗肿瘤、免疫抑制类药物研究的热点。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种微生物来源灵菌红素类似物及其制备方法与应用。一种微生物来源灵菌红素类似物，其分子式为C22H27N3O；化学名为：[Z]-8-乙基-1-((3-甲氧基-1氢,1-氢-[2,2-二吡咯]-5-亚甲基）-3-甲基-1,4,5,6,7,8-六氢环庚烷并吡咯([Z]-8-ethyl-1-((3-methoxy-1H,1'H-[2,2'-bipyrrol]-5-yl)methylene)-3-methyl-1,4,5,6,7,8-hexahydrocyclohepta[c]pyrrole)；化学结构式如下：表1分子式C22H27N3O的灵菌红素类似物的核磁数据一种微生物来源灵菌红素类似物的制备方法，包括以下步骤：（1）HahellaceaeGen.nov.sp.菌株的活化；（2）用接种针挑取活化好的菌体接种到装有500mLLB液体培养基的1L锥形瓶中，在28℃，120r/min速度下摇床培养14d；（3）步骤（2）所得培养液离心，菌体冷冻干燥；（4）冷东干燥的菌体与二氯甲烷按1︰30（w/v）混合，混合物冰浴超声20min提取，离心取上清，重复上述提取过程3次，合并上清并减压旋转蒸发至干，获得灵菌红素类似物粗提物；（5）步骤（4）所得灵菌红素类似物粗提物经层析、高效液相色谱分离纯化，获得纯化的灵菌红素类似物。上述步骤（1）中所述HahellaceaeGen.nov.sp.菌株为：该菌株已于2019年04月17日保藏于中国海洋微生物菌种保藏管理中心，地址：厦门市大学路178号，自然资源部第三海洋研究所，邮编：361005，保藏中心登记入册编号：MCCC1K03745。上述一种微生物来源灵菌红素类似物在制备抗菌药物中的应用。上述一种微生物来源灵菌红素类似物在抗肿瘤药物中的应用。上述一种微生物来源灵菌红素类似物在抗疟疾中的应用。上述一种微生物来源灵菌红素类似物在制备染料中的应用。上述一种微生物来源灵菌红素类似物在抑制藻类生长中的应用。本专利技术的优点在于：本专利技术提供了一种微生物来源灵菌红素类似物及其制备方法与应用。本专利技术从微生物产物中分离纯化获得一种灵菌红素类似物，其分子式为C22H27N3O。本专利技术灵菌红素类似物的制备方法简便快捷，制备所得灵菌红素类似物具有抗肿瘤、抗菌、抗疟疾、在染料制备、抑制赤潮藻生长具有显著的作用效果。附图说明图1为本专利技术所述新化合物的高分辨质谱。图2为本专利技术所述新化合物的核磁共振氢谱(1HNMR)。图3为本专利技术所述新化合物的核磁共振碳谱(13CNMR)。图4为本专利技术所述新化合物的核磁共振DEPT135谱。图5为本专利技术所述新化合物的核磁共振HSQC谱。图6为本专利技术所述新化合物的核磁共振HMBC谱。具体实施方式为了使本专利技术所述的内容更加便于理解，下面结合具体实施方式对本专利技术所述的技术方案做进一步的说明，但是下述的实例仅仅是本专利技术其中的例子而已，并不代表本专利技术所限定的权利保护范围，本专利技术的权利保护范围以权利要求书为准。实施例一：菌株的培养将HahellaceaeGen.nov.sp.菌株在LB固体培养基上活化；用接种针挑取活化好的菌体接种到装有500mLLB液体培养基的1L锥形瓶中，在28℃，120r/min速度下摇床培养14d，共发酵约20L。实施例二：灵菌红素类似物的制备Spartinivicinusruber菌培养液离心去上清，菌体冷冻干燥。菌体按1︰30（w/v）加二氯甲烷，冰浴超声20min提取，离心取上清，重复上述提取过程3次，合并上清并减压旋转蒸发至干，获得灵菌红素类似物粗提物。灵菌红素类似物粗提物用乙酸乙酯溶解，在10×20cm的硅胶制备板上划线法点样并吹干。展开剂为丙酮︰石油醚1.5︰5展开，刮下色素条带，用乙酸乙酯洗脱，减压旋转蒸发至干，获得层析分离灵菌红素类似物。将层析分离的灵菌红素类似物用乙腈溶解，在分析型高效液相色谱（wates2545）上摸索制备条件，用制备型高效液相色谱（wates2695）纯化制备。纯化制备条件为19mm×15cm的Symmetry300TMC18Preo5μm制备柱，流动相A：水(0.08%三氟乙酸)25%；B：乙腈(0.08%三氟乙酸)75%，上样量1.5mL，流速10mL/min。第一次纯化制备的灵菌红素类似物减压旋转蒸发至干。与上述制备条件相同进行第二次纯化制备，获得纯化灵菌红素类似物化合物。实施例三：化合物结构解析实施例2制备所得灵菌红素类似物化合物为紫红色带有金属光泽的粉末，HRESIMS（APEX7.0TFTICRMS，ESI）和1HNMR，13CNMR，C-DEPT135，HMBC，HSQC（BRUKERAscend-400，100MHz，CDCl3）谱提示，(测定值C22H27N3O[M＋H]＋350.2223m/z,计算值349.2154)。1HNMR，13CNMR，C-DEPT135，HMBC，HSQC数据见表2所示，表2化合物的1HNMR，13CNMR，C-DEPT135，HMBC，HSQC数据(CDCl3)根据上述数据推断出该化合物的结构，该化合物为新化合物，命名为(Z)-8-ethyl-1-((3-methoxy-1H,1'H-[2,2'-bipyrrol]-5-yl)methylene)-3-methyl-1,4,5,6,7,8-hexahydrocyclohepta[c]pyrrole。实施例四：抑菌活性用稀释法测定对芽孢枯草杆菌（Bacillussubtilis）大肠杆菌（本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种微生物来源灵菌红素类似物，其特征在于：所述灵菌红素类似物的分子式为C

【技术特征摘要】
1.一种微生物来源灵菌红素类似物，其特征在于：所述灵菌红素类似物的分子式为C22H27N3O；化学名为：[Z]-8-乙基-1-((3-甲氧基-1氢,1-氢-[2,2-二吡咯]-5-亚甲基）-3-甲基-1,4,5,6,7,8-六氢环庚烷并吡咯，其化学结构式如下：

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2.一种微生物来源灵菌红素类似物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）HahellaceaeGen.nov.sp.菌株的活化；
（2）用接种针挑取活化好的菌体接种到装有500mLLB液体培养基的1L锥形瓶中，在28℃，120r/min速度下摇床培养14d；
（3）步骤（2）所得培养液离心，菌体冷冻干燥；
（4）冷东干燥的菌体与二氯甲烷按1︰30（w/v）混合，混...

【专利技术属性】
技术研发人员：董乐，黄兆斌，
申请(专利权)人：泉州师范学院，
类型：发明
国别省市：福建;35