黄酮与二苯庚烷聚合物在制备PDE4抑制剂中的应用与药物组合物制造技术

本发明专利技术属于药物领域，涉及黄酮与二苯庚烷聚合物在制备PDE4抑制剂中的应用与药物组合物。所述黄酮与二苯庚烷聚合物具有式I所示结构。本发明专利技术的黄酮与二苯庚烷聚合物具有与阳性对照罗氟司特相当的PDE4抑制活性，可以大大降低临床前研究成本，节约资源，缩短研发周期。

Application of flavone and diphenylheptane polymer in the preparation of PDE4 inhibitor and pharmaceutical composition

【技术实现步骤摘要】
黄酮与二苯庚烷聚合物在制备PDE4抑制剂中的应用与药物组合物
本专利技术属于药物领域，更具体地，涉及黄酮与二苯庚烷聚合物在制备PDE4抑制剂中的应用，以及一种药物组合物。
技术介绍
PDE4是第二信使cAMP的特异性水解酶，广泛分布于平滑肌细胞、血管内皮细胞、上皮细胞、骨骼肌细胞以及各种炎症细胞内，其活性决定着细胞内第二信使cAMP的水平，与炎症的发展有密切关系。在嗜中性粒细胞中以PDE4表达占主导，为胞内降解cAMP唯一同工酶。其抑制剂能有有效抑制一些炎症和免疫细胞的功能，它不仅在哮喘、慢性阻塞性肺部疾病、银屑病的治疗中有效，而且在中枢神经系统疾病中的作用越来越受到关注。代表性PDE4抑制剂罗氟司特是治疗慢性阻塞性肺疾病伴支气管炎的一线药物，有可观的临床治疗前景。但是却有严重的恶心呕吐等胃肠道反应，限制和阻碍了该类药物的临床应用。因此，高效低毒PDE4抑制剂的发现仍然非常有必要。
技术实现思路
本专利技术的专利技术人在研究中发现了一种新的可作为PDE4抑制剂的化合物。本专利技术的目的是提供该化合物在制备PDE4抑制剂中的应用。具体地，本专利技术提供一种黄酮与二苯庚烷聚合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物在制备PDE4抑制剂中的应用，所述黄酮与二苯庚烷聚合物具有式I所示结构：具有式I所示结构的化合物称为officininA，该化合物是从植物高良姜中分离得到的一种黄酮与二苯庚烷的聚合物，为黄色固体，分子式为C35H32O8，分子量为580.6，m.p.177℃，[α]-2.38°(c0.16,MeOH)。碘显黄色，10％浓硫酸-香草醛喷雾加热显棕黄色，时间长加热后显淡绿色，FeCl3显墨绿色。该化合物结构独特，既具有黄酮结构又具有二苯庚烷结构。根据本专利技术，优选地，所述黄酮与二苯庚烷聚合物由包括以下步骤的方法制得：将高良姜药材粉碎，进行醇提，得到醇粗提物，然后回收乙醇，加水混悬，用石油醚和乙酸乙酯依次萃取，乙酸乙酯层回收溶剂，分离纯化，即得。进一步优选地，所述黄酮与二苯庚烷聚合物由包括以下步骤的方法制得：将高良姜药材粉碎，用80-90％乙醇回流提取1-3次，得到醇粗提物，然后回收乙醇至无醇味，加水混悬，用石油醚和乙酸乙酯依次萃取，乙酸乙酯层回收溶剂，分离纯化，即得。根据本专利技术一种实施方式，所述分离纯化的方法包括：采用100-200目硅胶，石油醚-乙酸乙酯(100:1–2:1)进行梯度洗脱，反复硅胶柱层析后，在石油醚-乙酸乙酯4-6：1比例得到该化合物，优选在石油醚-乙酸乙酯5：1比例得到该化合物。根据本专利技术另一种实施方式，所述分离纯化的方法包括：乙酸乙酯层回收溶剂后，采用大孔树脂D101，乙醇梯度洗脱，收集70-80％的乙醇洗脱液，优选收集75％的乙醇洗脱液，通过TLC监测并收集该化合物。本专利技术还提供一种药物组合物，该药物组合物含有活性组分以及一种或多种药学上可接受的载体，所述活性组分为具有式I所示结构的黄酮与二苯庚烷聚合物。如本文使用的，术语“药学上可接受的载体”指促进本专利技术的活性组分加工成可以药用的制剂的赋形剂和/或辅助剂。用于本专利技术的合适的赋形剂包括诸如糖类(例如，乳糖、蔗糖、甘露醇、山梨糖醇)的填充剂；纤维素衍生物；硫酸镁；磷酸钙(例如，磷酸三钙、磷酸氢钙)；诸如淀粉糊(例如，玉米淀粉、小麦淀粉、大米淀粉、马铃薯淀粉)、凝胶、黄芪胶或聚乙烯吡咯烷酮的粘合剂。可以用于本专利技术的合适辅助剂包括节流剂和润滑剂，例如滑石、硅石、硬脂酸或其衍生物(例如，硬脂酸镁)，和/或聚乙烯乙二醇。本专利技术的黄酮与二苯庚烷聚合物具有与阳性对照罗氟司特相当的PDE4抑制活性，可以大大降低临床前研究成本，节约资源，缩短研发周期。本专利技术的其它特征和优点将在随后具体实施方式部分予以详细说明。具体实施方式下面将更详细地描述本专利技术的优选实施方式。虽然以下描述了本专利技术的优选实施方式，然而应该理解，可以以各种形式实现本专利技术而不应被这里阐述的实施方式所限制。实施例中未注明具体条件者，皆按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。实施例11、实验样品的处理PDE4来源于猪中性粒细胞，分离纯化的方法主要参考(陈武，姜代勋，杨柳等.猪中性粒细胞cAMP磷酸二酯酶的提取与活性检测[J].北京农学院学报，2003，18(4)：241-244)。officininA为实验室自制，参考ZhaoL,LiangJY,ZhangJY,etal.AnoveldiarylheptanoidbearingflavonolmoietyfromtherhizomesofAlpiniaofficinarumHance[J].ChineseChemicalLetters,2010,21(2):194-196。制备过程包括以下步骤：高良姜药材粉碎，85％乙醇回流提取2次。回收乙醇至无醇味，加水混悬，用石油醚和乙酸乙酯依次萃取。乙酸乙酯层回收溶剂，采用100-200目硅胶，石油醚-乙酸乙酯(100:1–2:1)进行梯度洗脱。反复硅胶柱层析后，在石油醚-乙酸乙酯约5：1比例得到该化合物。偶联碱性磷酸酶的孔雀绿定磷法，酶活性测定参考文献：TangHF,SongYH,ChenJC,etal.Upregulationofphosphodiesterase-4inthelungofallergicrats.[J].AmericanJournalofRespiratory&CriticalCareMedicine,2005,171(8):823。2、PDE4抑制活性测定反应总体积为1000μL，包括：800μL缓冲液体系20mmol/LTris-HCl(pH7.4，含0.1mmol/LEDTA，10mmol/LMgCl2)、50μL分离纯化后的PDE4，100μL小牛小肠碱性磷酸酶(含28％甘油)，50μLofficininA(终浓度分别为20μM、40μM、60μM，分别对应低剂量、中剂量、高剂量)，将反应混合物涡旋振荡混匀，在37℃反应20min。加入250μL高氯酸(40％)终止反应(终浓度为0.5M)，1300r/min离心10min去除变性蛋白。取700μL上清液加入130μL孔雀绿(1mmol/L)和70μL钼酸铵，振荡混匀，于37℃反应30min，然后用酶标仪在630nm测定吸光度，并优化稀释度使得吸光度不超过1250。测得的抑制率如表1所示。其中对照组为罗氟司特。表1试验结果组别低剂量组中剂量组高剂量组阳性对照组抑制率57.21％78.60％90.03％90.82％由表1可以看出，officininA低剂量组和中剂量组显示出一定的抑制作用，高剂量组的抑制率与阳性对照组罗氟司特相当，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.黄酮与二苯庚烷聚合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物在制备PDE4抑制剂中的应用，其特征在于，所述黄酮与二苯庚烷聚合物具有式I所示结构：/n

【技术特征摘要】
1.黄酮与二苯庚烷聚合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物在制备PDE4抑制剂中的应用，其特征在于，所述黄酮与二苯庚烷聚合物具有式I所示结构：





2.根据权利要求1所述的应用，其中，所述黄酮与二苯庚烷聚合物由包括以下步骤的方法制得：将高良姜药材粉碎，进行醇提，得到醇粗提物，然后回收乙醇，加水混悬，用石油醚和乙酸乙酯依次萃取，乙酸乙酯层回收溶剂，分离纯化，即得。


3.根据权利要求2所述的应用，其中，所述黄酮与二苯庚烷聚合物由包括以下步骤的方法制得：将高良姜药材粉碎，用80-90％乙醇回流提取1-3次，得到醇粗提物，然后回收乙醇至无醇味，加水混悬，用石油醚和乙酸乙酯依次萃取，乙酸乙酯层回收溶剂，分离纯化，即得。


4.根据权利要求2或3所述的应用...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵玲，吴淑慧，石光锐，
申请(专利权)人：武汉轻工大学，
类型：发明
国别省市：湖北;42