源于草酸青霉的iso-Penicillixanthone A及在肺癌方面的应用制造技术

本发明专利技术涉及一种源于草酸青霉的iso‑Penicillixanthone A及在肺癌方面的应用。该化合物结构特征是：

ISO penicillixanthone a from Penicillium oxalate and its application in lung cancer

【技术实现步骤摘要】
源于草酸青霉的iso-PenicillixanthoneA及在肺癌方面的应用
本专利技术涉及一种源于草酸青霉的iso-PenicillixanthoneA及其在肺癌方面的应用，属于生物医药领域。
技术介绍
随着科技的发展，我们的医疗水平已提高许多，但是癌症的发病率呈现日益增长的趋势，是造成全球死亡的第二大原因。肺癌，也被称为支气管肺癌，是目前人类最常见的恶性肿瘤之一。近年来通过世界卫生组织调查的关于肺癌的资料我们发现，肺癌相比于其它恶性肿瘤，它的发生率和死亡率均属于最高位，它的死亡人数甚至超过了所有其他常见恶性肿瘤人数的总和，所以说它是目前危害人类生存和健康的最严重的一种疾病，是国内外关注的焦点问题。青霉蒽酮是一类由真菌次级代谢产生的蒽醌类有机化合物，自2002年青霉蒽酮A首次从Penicilliumthomii中发现至今，已经过去了十多年。该类化合物至今被报道了2个，分别是青霉蒽酮A、B且都是2-4’连接。该类化合物对肿瘤细胞抑制明显，是开发抗肿瘤药物或者肿瘤细胞增殖抑制剂的理想原料。但是对于他们对映体的抗肿瘤活性研究还是空白。本专利技术人研究得知，草酸青霉(Penicilliumoxalicum)IBPT-6，(已于2013年12月25日保藏在中国典型培养物保藏中心，地址：武汉，武汉大学，保藏编号是：CCTCCNO：M2013714)的发酵产物的粗提取物有很好的细胞增殖抑制活性，遂对其活性成分进行研究。研究发现所示青霉蒽酮类化合物具有抗人肺癌活性，目前尚未见该化合物对人肺癌细胞的增殖抑制活性的报道，因此市场上也尚未见有与此相关的药物。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种源于草酸青霉的iso-PenicillixanthoneA及其在肺癌方面的应用。为实现上述目的，采用以下技术方案：源于草酸青霉的iso-PenicillixanthoneA，该化合物具有抑制肺癌细胞增殖作用，具有抗人肺癌活性。其结构式为：。该化合物的制备方法，是通过发酵培养草酸青霉(Penicilliumoxalicum)IBPT-6，获取发酵菌丝体，然后从菌丝体中分离纯化出该化合物。具体步骤如下：1发酵生产培养微生物的常规方法，取草酸青霉(Penicilliumoxalicum)IBPT-6接种到平板固体培养基上在28℃培养箱中培养2-3d，然后接种到真菌培养基中，28℃静止培养30d后，经多层纱布过滤获得菌丝体和发酵液；所述真菌培养基成分：葡萄糖10.0g、麦芽糖20.0g、甘露醇20.0g、味精10.0g、酵母膏3.0g、NaCl15.0g、KH2PO40.5g、MgSO4·7H2O0.3g、超纯水定容至1L。2浸膏的获得用纱布将菌丝体和发酵液分离。菌丝体用丙酮溶液（含20%~30%水）连续超声破壁3次，过滤去除残渣，得到含丙酮和水的菌丝体的粗提物。减压浓缩去除丙酮，得到粗体物的水溶液，再以水溶液与乙酸乙酯体积比1:2加入乙酸乙酯萃取3次，得乙酸乙酯粗提液，浓缩蒸干获得菌丝体浸膏36.5g。3化合物的分离精制菌丝体浸膏通过100-200目硅胶拌样，以石油醚：二氯甲烷：甲醇为梯度洗脱液，进行减压硅胶色谱柱层析。经过简单的薄层色谱分析、合并、分离成组分A-E。组分C(12.7g)以二氯甲烷：甲醇=1:2为梯度洗脱剂，进行凝胶柱层析（SephadexLH-20），经过薄层色谱分析后合并得到四个亚组分C1-C4。亚组分C3(4.9g)通过半制备液相色谱(1010型ODS-A，10×250mm，5μm)：分离流速为5mL/min，流动相为55%乙腈含0.1%TFA，得到所示化合物(510mg，tR22.8min)。所述草酸青霉(Penicilliumoxalicum)IBPT-6，已于2013年12月25日保藏在中国典型培养物保藏中心，地址：武汉，武汉大学，保藏编号是：CCTCCNO：M2013714。本专利技术还包括了所述的化合物在制备抑制人肺癌细胞增殖药物中的应用，及该化合物在制备抗人肺癌药物中的应用。本专利技术的显著优点在于：研究所示该青霉蒽酮化合物具有显著的抑制人肺癌细胞增殖活性，目前尚未见该化合物对人肺癌细胞增殖抑制活性的报道，因此市场上也尚未见有与此相关的药物。具体实施方式在如下的实施例中所指的化合物的化学结构：实施例1该化合物的发酵生产及分离精制1发酵生产生产菌的发酵培养：按培养微生物的常规方法，取草酸青霉(Penicilliumoxalicum)IBPT-6(已于2013年12月25日保藏在中国典型培养物保藏中心，地址：武汉，武汉大学，保藏编号是：CCTCCNO：M2013714)适量，接种到平板固体培养基上在28℃培养箱中培养2-3d。取平板培养2-3d的草酸青霉(Penicilliumoxalicum)IBPT-6适量，接种到装有400mL培养液[培养液组成（克/升）：葡萄糖10.0、麦芽糖20.0、甘露醇20.0、味精10.0、酵母膏3.0、NaCl15.0、KH2PO40.5、MgSO4·7H2O0.3，超纯水定容至1L，28℃静止培养30d后，获得菌丝体和发酵液。2浸膏的获得用纱布将菌丝体和发酵液分离。菌丝体用丙酮溶液（含20%~30%水）连续超声破壁3次，过滤去除残渣，得到含丙酮和水的菌丝体的粗提物。减压浓缩去除丙酮，得到粗体物的水溶液，再以水溶液与乙酸乙酯体积比1:2加入乙酸乙酯萃取3次，得乙酸乙酯粗提液，减压浓缩至近干得菌丝体浸膏36.5g。3化合物的分离精制菌丝体浸膏通过100-200目硅胶拌样，以石油醚：二氯甲烷：甲醇为梯度洗脱液，进行减压硅胶色谱柱层析。经过简单的薄层色谱分析，合并，分离成组分A-E。组分C(12.7g)以二氯甲烷：甲醇=1:2为梯度洗脱剂，进行凝胶柱层析（SephadexLH-20），经过薄层色谱分析后合并得到四个亚组分C1-C4。亚组分C3(4.9g)通过半制备液相色谱(1010型ODS-A，10×250mm，5μm)：分离流速为5mL/min，流动相为55%乙腈含0.1%TFA，得到所示化合物(510mg，tR22.8min)。化合物：常温下为黄色粉末，[α]20D+105.6°(c1,pyridine);[α]20D+3.1°(c1,Me2CO);高分辨电喷雾质谱HRESI-MS在m/z：661.1550处给出分子离子峰[M+Na]+（calcdforC32H30NaO14，661.1533）；提示分子量为638，结合波谱信息推测分子式为C32H30O14。1H和13C-NMR数据见表1。表1化合物的1H和13C-NMR数据（500MHz1Hand126MHz13C,inDMSO-d6）实施例2体外抗肿瘤活性的测试1实验样品及实验方法被测样品溶液的配制：测试样品为上述实施1中分离精制的化合物纯品。精密称取适量样品，用DMSO配制成1本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.化合物

【技术特征摘要】
1.化合物，其特征在于：该化合物通过以下方法制备：发酵草酸青霉(Penicilliumoxalicum)IBPT-6，获取发酵物，然后从发酵物中分离纯化得到该化合物；其中所述草酸青霉(Penicilliumoxalicum)IBPT-6，已于2013年12月25...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈立，李钰莹，李欣欣，王思远，刘沁颖，程苗苗，张其清，
申请(专利权)人：福州大学，
类型：发明
国别省市：福建;35