一种塞来昔布有关杂质的检测方法及其应用技术

本发明专利技术提供了一种塞来昔布有关杂质的检测方法及其应用，该检测方法采用反相高效液相色谱法，其色谱条件如下：色谱柱：C30硅烷键合全多孔硅胶色谱柱；流动相组成：A:(水相)：B(乙腈)；C(甲醇)；梯度洗脱；流动相流速：0.5‑1.5ml/min；检测波长：210‑280nm；柱温：20‑40℃；检测器：紫外检测器或二极管阵列检测器。本发明专利技术提供了一种新的高灵敏度的方法，不仅可以分离检测塞来昔布的3个同分异构体，而且同时能够分离检测杂质D、杂质F和杂质G，对他们进行质量进行监控，方法准确度高，灵敏度高，而且分离度好。

A detection method of celecoxib related impurities and its application

【技术实现步骤摘要】
一种塞来昔布有关杂质的检测方法及其应用
本专利技术属于药物分析
，具体涉及一种塞来昔布异构体杂质及工艺或降解杂质检测方法及其应用。
技术介绍
样品名称：塞来昔布英文名：Celecoxib化学名：4-[5-(4-甲基苯基)-3-(三氟甲基)-1H-1-吡唑-1-基]苯磺酰胺分子式：C17H14N3F3O2S分子量：381.38CAS登录号:169590-42-5结构式：外观：白色结晶性粉末间位异构体杂质(杂质A)：分子式：C17H14N3F3O2S分子量：381.38结构式：环合异构体杂质(杂质B)：分子式：C17H14N3F3O2S分子量：381.38结构式：邻位异构体杂质(杂质C)：分子式：C17H14N3F3O2S分子量：381.38结构式：杂质D：分子式：C15H17N3O2S分子量：303.38结构式：杂质F：分子式：C15H17N3O2S分子量：303.38结构式：杂质G：分子式：C11H9F3O2分子量：230.19结构式：塞来昔布(Celecoxib)又名西乐葆，是1,5-二芳基取代吡唑类化合物，化学名为4-[5-(4-甲基苯基)-3-(三氟甲基)-1H-1-吡唑-1-基]苯磺酰胺。塞来昔布是一种非甾体抗炎药，能特异性抑制环氧化酶-2(COX-2)的产生，具有解热、镇痛、抗炎等作用，临床上多用于骨关节炎、类风湿性关节炎、强直性脊椎炎及肿瘤的治疗。目前，塞来昔布尚未被我国药典收载。美国药典和欧洲药典方法一致，采用封尾的苯基填料色谱柱HPLC方法检测，该方法采用柱温60℃、流速1.5ml/min，对色谱柱的损耗较大；另外，在该方法中，杂质G的峰形很差，导致检出灵敏度大幅下降，不能很好地检出杂质G，所以在一定程度上限制了该方法的应用。塞来昔布与其同分异构体杂质区别仅是甲基在苯环上位置不同，差异较小，一般的反相液相色谱法无法分离。本专利技术提供了一种新的高灵敏度的方法，不仅可以分离检测塞来昔布的3个同分异构体，而且同时能够分离检测杂质D、杂质F和杂质G，对他们进行质量进行监控，方法准确度高，灵敏度高，而且分离度好。
技术实现思路
本专利技术的目的是针对现有技术的不足，提供一种能够针对性的、准确性的检测塞来昔布异构体及其杂质，即分离塞来昔布与杂质A、B、C、D、F和G的检测方法。本专利技术的再一个目的是提供一种塞来昔布有关杂质检测方法的应用。该检测方法采用反相高效液相色谱法，其色谱条件如下：色谱柱：C30硅烷键合全多孔硅胶色谱柱；粒径3～15μm；柱长50～250mm；流动相组成：A:(水相)：B(乙腈)；C(甲醇)；梯度洗脱流动相流速：0.5-1.5ml/min；检测波长：210-280nm；柱温：20-40℃；检测器：紫外检测器或二极管阵列检测器；所述流动相组成选自乙腈-甲醇-水；乙腈-甲醇-水-三乙胺；乙腈-甲醇-水-磷酸盐；甲醇-水；乙腈-水。进一步优选：色谱柱选自CenturySILC30柱；GLSciencesInertsilC30柱、WelchXB-C30柱和ThermoAcclaimTMC30柱等。梯度洗脱程序例为：时间/min025303140A/％35-8015-6010-5035-8035-80B/％65-085-090-065-065-0C/％65-085-090-065-065-0所述流动相流速：优选1.0ml/min。所述流动相优选pH值为2.0-8.0；优选4.0-8.0。所述流动相pH值调节剂为磷酸或氨水；优选为磷酸。所述色谱条件中检测波长优选为215nm。所述色谱条件中柱温优选为20-25℃。溶解供试品的溶剂为甲醇、乙腈、流动相，优选为流动相。供试品溶液的浓度为0.2-1.0mg/ml，优选为0.4mg/ml。单针进样量为1-40μl，优选为20μl。通过实验检测，SepaxGP-phenyl柱、WelchXtimateTMC18柱、WelchPFP柱、shieldRP18柱、KromasilNH2柱等色谱柱都不能实现塞来昔布与间位、邻位异构体及环合异构体很好的分离效果。进一步优选流动相梯度程序初始比例在A＝55-70％(v/v)、B＝0-45％(v/v)、C＝0-45％(v/v)。流动相梯度程序最终比例在A＝25-45％(v/v)、B＝0-75％(v/v)、C＝0-75％(v/v)。本专利技术提供的一种塞来昔布的异构体杂质及其它杂质的检测方法，实现了塞来昔布与异构体杂质及其它杂质的分离，具有较高的灵敏度和专属性，操作简便，分离度符合药典规定(即分离度大于1.50。分离度为相邻两峰的保留时间之差与平均峰宽的比值，也叫分辨率，表示相邻两峰的分离程度。R值越大，表明相邻两组分分离越好。一般说但R＜1时，两峰有部分重叠；R＝1时，分离度可达98％；当R＝1.5时，分离度可达99.7％。通常用R＝1.5作为相邻两组分已完全分离的标志。当R＝1时，称为4σ分离，两峰基本分离，裸露峰面积为95.4％，内侧峰基重叠约2％。R＝1.5时，称为6σ分离，裸露峰面积为99.7％。R≥1.5称为完全分离。《中国药典》规定R应大于1.5.分离度计算公式：2(tR2-tR1)/(W1+W2))，可用于塞来昔布的质量控制，具有现实意义。附图说明图1为实施例1的色谱图；图2为实施例2的色谱图；图3为实施例3的色谱图；图4为实施例4的色谱图；图5为实施例5的色谱图；图6为实施例6的色谱图；图7为实施例7的色谱图；图8为实施例8的色谱图；图9为实施例9的色谱图；图10为实施例10的色谱图。具体实施方式下面结合具体的实施方式对本专利技术进行进一步的详细描述，给出的实施例仅为了阐述本专利技术，而不是为了限制本专利技术的范围。实施例1仪器与检测条件Waterse2695高效液相色谱仪；自动进样器；SepaxGP-phenyl柱(5μm，4.6×250mm)；流动相：水相：20mM磷酸二氢钾(PH3.0)，有机相：甲醇，等度洗脱(水相:有机相＝50:50)；进样量为20μL；检测波长为215nm；流速为1.5mL/m本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种塞来昔布有关杂质的检测方法，其特征在于，所述杂质包括异构体杂质、工艺或降解杂质；该检测方法采用反相色谱法，其色谱条件如下：/n色谱柱：C30硅烷键合全多孔硅胶色谱柱；/n流动相组成：A为水相；B为乙腈；C为甲醇；所述组成A选自水；水-三乙胺；水-磷酸盐；/n梯度洗脱；/n流动相流速：0.5-1.5ml/min；/n检测波长：210-280nm；/n柱温：20-40℃；/n检测器：紫外检测器或二极管阵列检测器。/n

【技术特征摘要】
1.一种塞来昔布有关杂质的检测方法，其特征在于，所述杂质包括异构体杂质、工艺或降解杂质；该检测方法采用反相色谱法，其色谱条件如下：
色谱柱：C30硅烷键合全多孔硅胶色谱柱；
流动相组成：A为水相；B为乙腈；C为甲醇；所述组成A选自水；水-三乙胺；水-磷酸盐；
梯度洗脱；
流动相流速：0.5-1.5ml/min；
检测波长：210-280nm；
柱温：20-40℃；
检测器：紫外检测器或二极管阵列检测器。


2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，该检测方法色谱条件中梯度洗脱程序例为：












时间/min
0
25
30
31
40


A/％
35-80
15-60
10-50
35-80
35-80


B/％
65-0
85-0
90-0
65-0
65-0


C/％
65-0
85-0
90-0
65-0
65-0






。


3.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，该检测方法色...

【专利技术属性】
技术研发人员：靳朝东，余娜，赵丽娜，李银峰，梅林雨，邹孟瑶，
申请(专利权)人：天津药物研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：天津;12