一种汤料中杂环胺的检测方法技术

本发明专利技术公开了一种汤料中杂环胺的检测方法，涉及食品检测技术领域，解决了因样品在前处理过程中残留的干扰杂质较多，而导致检测结果容易产生偏差的问题。一种汤料中杂环胺的检测方法，其具体包括以下步骤：步骤一，搅拌均质；步骤二，超声抽真空；步骤三，洗脱抽真空；步骤四，活化淋洗；步骤五，吹干复溶；步骤六，色谱检测。本发明专利技术中的检测方法在实际应用过程中，能够对干扰杂质起到良好的去除效果，并使干扰杂质的含量不易是检测结果产生较大偏差，有利于保证检测结果的准确性，且检测速度快。

A method for the determination of heterocyclic amines in soup

【技术实现步骤摘要】
一种汤料中杂环胺的检测方法
本专利技术涉及食品检测
，更具体地说，它涉及一种汤料中杂环胺的检测方法。
技术介绍
杂环胺是富含蛋白质的食品在热加工过程中，由于组织中蛋白质、氨基酸、肌酸酐和肌酸发生热分解，由碳、氮、氢组成的一类具有致癌、致突变多环芳香族化合物。在公开号为CN107290452A的中国专利技术专利申请文件中公开了一种检测结合态杂环胺含量的方法，包括：对样品进行前处理；采用液相色谱质谱联用仪进行检测；所述液相色谱条件为，色谱柱是以嵌入极性基团的十八烷基硅烷键合硅胶为固定相的色谱柱；柱温为30～50℃；流动相中有机相包括乙腈，水相包括乙酸铵；流速为0.2～0.5mL/min；进样量为5～20μL；所述质谱条件为，离子源温度为100～120℃；脱溶剂气温度为350～450℃；毛细管电压为3.0～4.0kV；锥孔气流量为40～60L/h；脱溶剂气流量为600～800L/h；碰撞气流量为0.1～0.2mL/min；扫描范围为2～2000Da。所述对样品进行前处理，其是向样品粉末中添加氢氧化钠溶液，混匀后加入硅藻土搅拌，再加入乙酸乙酯超声萃取，收集滤渣；装入耐压瓶内，加入盐酸，混匀后水解，活化固相萃取柱后上样洗脱，氮吹后复溶，过滤，得到处理好的样品。上述申请文件中，提供的结合态杂环胺含量的方法，提供了17种杂环胺的定性与定量特征离子及优化的质谱参数，能够同时检测17种极性、非极性的杂环胺，且回收率十分优秀，整体速度较快，但其在对样品进行前处理的过程中，方法较为简单，并不能对样品中的干扰杂质起到良好的去除效果，而干扰杂质含量较高会导致检测结果偏差较大，不利于得到准确的测试结果，因此，需要提出一种新的方案来解决上述问题。
技术实现思路
针对现有技术中因样品在前处理过程中残留的干扰杂质较多，而导致检测结果容易产生偏差的问题，本专利技术的目的一在于提供一种汤料中杂环胺的检测方法，以解决上述技术问题，其能够对干扰杂质起到良好的去除效果，并使干扰杂质的含量不易是检测结果产生较大偏差。为实现上述目的一，本专利技术提供了如下技术方案：一种汤料中杂环胺的检测方法，具体包括以下步骤：步骤一，搅拌均质：取一定量的待测样品，加入4-6倍体积的氢氧化钠溶液，搅拌均质10-20min，得到混合物；步骤二，超声抽真空：将得到的混合物进行超声20-30min后，与2-3倍量的惰性固体物质吸附剂充分混合后填入固相萃取柱中，在﹣34-﹣32kPa压力下抽真空25-35s；步骤三，洗脱抽真空：紧接着用二氯甲烷进行洗脱，使洗脱液自然流下，待收集的洗脱液通过固相萃取柱，在﹣34-﹣32kPa压力下抽真空2-3min，得到洗脱液；步骤四，活化淋洗：将洗脱液预先通过用二氯甲烷活化后的固相萃取小柱，待洗脱液完全通过后依次用二氯甲烷、混合洗脱剂a、甲醇和去离子水淋洗，将杂质洗脱，再用混合洗脱剂b将杂环胺洗脱，收集得到洗脱液；步骤五，吹干复溶：将洗脱液用50-60℃的氮气吹5-10min，再用甲醇完全复溶，得到待测样品；步骤六，色谱检测：将待测样品用液相色谱定量检测汤料中杂环胺的含量。通过采用上述技术方案，杂环胺属于有机碱，加入氢氧化钠进行均质，得到稳定的混合物，然后加入惰性固体物质吸附剂进行超声萃取，能够去吃一些大颗粒的干扰杂质，而再用二氯甲烷进行洗脱，能够去除微小的酸性和中性杂质。然后在活化淋洗过程中，依次用二氯甲烷、混合洗脱剂a、甲醇和去离子水淋洗，将杂质洗脱，再用混合洗脱剂b将杂环胺洗脱，能够对干扰杂质起到良好的去除效果，并使干扰杂质的含量不易是检测结果产生较大偏差，进而使含有杂环胺的待测样品在色谱检测中能够得到稳定准确的检测结果，且检测过程用时较少，整体具有良好的应用效果。进一步优选为，所述步骤一中，氢氧化钠溶液的浓度为1.6-2.4mol/L，且均质搅拌速度为30-60rpm，温度为30-40℃。通过采用上述技术方案，选用浓度为1.6-2.4mol/L的氢氧化钠溶液，可以使杂环胺去离子化程度增大，疏水性加强，并使杂环胺在有机溶剂中的溶解度增大，从而可提高杂环胺的回收率，保证检测结果的准确性。同时均质搅拌速度为30-60rpm，温度为30-40℃，可以保证操作过程的稳定，便于后续对干扰杂质进行去除。进一步优选为，所述步骤二中，惰性固体物质吸附剂选用硅藻土、玻璃微珠和聚四氟乙烯中的任意一种。通过采用上述技术方案，硅藻土、玻璃微珠和聚四氟乙烯均为良好的惰性固体吸附剂，不仅在使用过程中能够保持良好的稳定性，且能够对干扰杂质起到良好的吸附去除效果。进一步优选为，所述步骤四中，混合洗脱剂a由0.08-0.12mol/L的盐酸溶液和甲醇按体积比为1：(1.3-1.7)混合而得。通过采用上述技术方案，选用0.08-0.12mol/L的盐酸溶液和甲醇按体积比为1：(1.3-1.7)混合作为混合洗脱剂a，能够大大降低干扰物质的残留量，进而提高检测结果的准确性，有利于降低误差。进一步优选为，所述步骤四中，混合洗脱剂a由0.1mol/L的盐酸溶液和甲醇按体积比为1：1.5混合而得。通过采用上述技术方案，选用0.1mol/L的盐酸溶液和甲醇按体积比为1：1.5混合作为混合洗脱剂a，能够使混合洗脱剂a对干扰杂质起到最优的去除效果。进一步优选为，所述步骤四中，混合洗脱剂b由12-15％体积份数的氨水和甲醇按体积比为1：(5.5-5.9)混合而得。通过采用上述技术方案，选用12-15％体积份数的氨水和甲醇按体积比为1：(5.5-5.9)混合作为混合洗脱剂b，能够大大降低干扰物质的残留量，进而提高检测结果的准确性，有利于降低误差。进一步优选为，所述步骤四中，混合洗脱剂b由15％体积份数的氨水和甲醇按体积比为1:5.9混合而得。通过采用上述技术方案，选用15％体积份数的氨水和甲醇按体积比为1:5.9混合作为混合洗脱剂b，能够使混合洗脱剂b对干扰杂质起到最优的去除效果。进一步优选为，所述步骤四中，二氯甲烷、混合洗脱剂a、甲醇和去离子水的体积比为1：(3-5)：(1-3)：(0.8-1.4)。通过采用上述技术方案，选用上述体积比的二氯甲烷、混合洗脱剂a、甲醇和去离子水进行淋洗，能够对干扰杂质起到良好洗脱效果，保证检测结果的准确性。进一步优选为，所述步骤四中，二氯甲烷、混合洗脱剂a、甲醇和去离子水的体积比为1：4：2：1.1。通过采用上述技术方案，选用体积比为1：4：2：1.1的二氯甲烷、混合洗脱剂a、甲醇和去离子水，能够对干扰杂质起到最优的洗脱效果，有利于保证检测结果的准确性，大大降低误差值。综上所述，与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：(1)加入氢氧化钠进行均质，得到稳定的混合物，然后加入惰性固体物质吸附剂进行超声萃取，再用二氯甲烷进行洗脱，然后在活化淋洗过程中，依次用二氯甲烷、混合洗脱剂a、甲醇和去离子水淋洗，将杂质洗脱，再用混合洗脱剂b将杂环胺洗脱，能够对干扰杂质起到良好的去除效本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种汤料中杂环胺的检测方法，其特征在于，具体包括以下步骤：/n步骤一，搅拌均质：取一定量的待测样品，加入4-6倍体积的氢氧化钠溶液，搅拌均质10-20min，得到混合物；/n步骤二，超声抽真空：将得到的混合物进行超声20-30min后，与2-3倍量的惰性固体物质吸附剂充分混合后填入固相萃取柱中，在﹣34-﹣32kPa压力下抽真空25-35s；/n步骤三，洗脱抽真空：紧接着用二氯甲烷进行洗脱，使洗脱液自然流下，待收集的洗脱液通过固相萃取柱，在﹣34-﹣32kPa压力下抽真空2-3min，得到洗脱液；/n步骤四，活化淋洗：将洗脱液预先通过用二氯甲烷活化后的固相萃取小柱，待洗脱液完全通过后依次用二氯甲烷、混合洗脱剂a、甲醇和去离子水淋洗，将杂质洗脱，再用混合洗脱剂b将杂环胺洗脱，收集得到洗脱液；/n步骤五，吹干复溶：将洗脱液用50-60℃的氮气吹5-10min，再用甲醇完全复溶，得到待测样品；/n步骤六，色谱检测：将待测样品用液相色谱定量检测汤料中杂环胺的含量。/n

【技术特征摘要】
1.一种汤料中杂环胺的检测方法，其特征在于，具体包括以下步骤：
步骤一，搅拌均质：取一定量的待测样品，加入4-6倍体积的氢氧化钠溶液，搅拌均质10-20min，得到混合物；
步骤二，超声抽真空：将得到的混合物进行超声20-30min后，与2-3倍量的惰性固体物质吸附剂充分混合后填入固相萃取柱中，在﹣34-﹣32kPa压力下抽真空25-35s；
步骤三，洗脱抽真空：紧接着用二氯甲烷进行洗脱，使洗脱液自然流下，待收集的洗脱液通过固相萃取柱，在﹣34-﹣32kPa压力下抽真空2-3min，得到洗脱液；
步骤四，活化淋洗：将洗脱液预先通过用二氯甲烷活化后的固相萃取小柱，待洗脱液完全通过后依次用二氯甲烷、混合洗脱剂a、甲醇和去离子水淋洗，将杂质洗脱，再用混合洗脱剂b将杂环胺洗脱，收集得到洗脱液；
步骤五，吹干复溶：将洗脱液用50-60℃的氮气吹5-10min，再用甲醇完全复溶，得到待测样品；
步骤六，色谱检测：将待测样品用液相色谱定量检测汤料中杂环胺的含量。


2.根据权利要求1所述的汤料中杂环胺的检测方法，其特征在于，所述步骤一中，氢氧化钠溶液的浓度为1.6-2.4mol/L，且均质搅拌速度为30-60rpm，温度为30-40℃。


3.根据权利要求1所述的汤料中杂环胺的检测方法，其特...

【专利技术属性】
技术研发人员：戈吴超，袁军，
申请(专利权)人：安徽云燕食品科技有限公司，
类型：发明
国别省市：安徽;34