一种铝碳酸镁咀嚼片胆汁酸吸附的实验方法技术

本发明专利技术提供了一种铝碳酸镁咀嚼片胆汁酸吸附的实验方法，其特征是取铝碳酸镁咀嚼片，分别加入0.1mol/l盐酸溶液，该盐酸溶液含0.5mmol/l的胆汁酸盐，混匀，将以上所得的溶液于37±0.5℃下培养1小时，然后于2000rpm离心15分钟，取上清液过滤，即得；同时以不加铝碳酸镁同法进行操作作为对照品溶液，以加不含胆汁酸盐的0.1mol/l盐酸溶液铝碳酸镁样品作空白样品溶液，采取高效液相色谱方法测定后，以对照品溶液和供试品溶液上清液中未吸附的胆汁酸峰面积计算吸附率。该方法可以测定铝碳酸镁咀嚼片对胆汁酸盐的吸附情况，耐用性好，测定方便。

An experimental method for bile acid adsorption of magnesium aluminate chewable tablets

【技术实现步骤摘要】
一种铝碳酸镁咀嚼片胆汁酸吸附的实验方法
本专利技术涉及一种检测方法，更具的说涉及一种铝碳酸镁咀嚼片对胆汁酸盐吸附的测定方法。
技术介绍
铝碳酸镁咀嚼片主要用于治疗慢性胃炎，以及与胃酸有关的胃部不适症状，如胃痛、胃灼热感(烧心)、酸性嗳气、饱胀等。铝碳酸镁是抗酸、抗胆汁的胃黏膜保护剂，它会直接作用在病变部位，能够迅速改善和缓解胃部的疾病、迅速中和胃酸，保持较长时间，还能阻止胃蛋白酶对胃的损伤，保护胃黏膜，能够快速缓解胃部不适症状。胆汁酸是胆汁的重要成分，在脂肪代谢中起着重要作用。正常情况下，胃液中不含胆汁酸，胃酸也不会使胆汁酸发生改变。但现已发现，在胃溃疡发病机理中，胆汁酸由十二指肠回流至胃，引起胃黏膜损伤，而胆汁酸回流则促使胃发生癌变。目前USP、BP、EP、中国药典及国家药品标准均没有收录有关胆汁酸的检验方法，没有对铝碳酸镁咀嚼片胆汁酸吸附试验进行相关规定。为了保证铝碳酸镁咀嚼片研发和生产的质量，因此，研究获得一种铝碳酸镁咀嚼片胆汁酸吸附的实验方法。
技术实现思路
针对上述缺陷，本专利技术的目的是提供一种铝碳酸镁咀嚼片胆汁酸吸附的实验方法。本专利技术的铝碳酸镁咀嚼片胆汁酸吸附的实验方法，方法如下：前处理：取本品20片研细，过5号筛，精密称取平均片重的1/20，加至5ml的0.1mol/l盐酸溶液，该盐酸溶液含0.5mmol/l的胆汁酸盐，旋涡混均，将以上的所得溶液在37±0.5℃温度下培养1小时，培养过程中振摇混匀，然后于2000rpm离心15分钟；同时以不加铝碳酸镁同法进行操作作为对照品溶液；以对照品溶液和供试品溶液上清液中未吸附的胆汁酸峰面积计算吸附率。色谱方法：流动相：甲醇-乙腈-0.05mol/l磷酸盐缓冲液(40:40:50)，用磷酸调节pH至3.0，进样量：20ul，柱温：30℃，流速为：1.0ml/min，波长为：200nm，色谱柱为：以十八烷基键合硅胶为填充剂。计算公式：本专利技术的有益技术效果是：本专利技术采用高效液相色谱法，操作简便，专属性好，准确度高，可以有效控制铝碳酸镁咀嚼片胆汁酸吸附情况。附图说明图1中，数字标识1、2、3、4、5分别是20％、50％、80％、100％、200％混合对照。具体实施方式实施例1为了测定铝碳酸镁咀嚼片的胆汁酸吸附，本专利技术提供了一种铝碳酸镁咀嚼片胆汁酸吸附的实验方法。在该技术方案中，通过对介质及其介质体积的选择，胆汁酸盐种类及其浓度的确定，确定了实验的前处理方法。然后根据文献《铝碳酸镁咀嚼片体外吸附胆酸的比较研究(中国药学杂志2000年11月第35卷第11期ChinPharmJ,2000navember.Vol.35No11)》，对色谱条件进行优化，最终确定了铝碳酸镁咀嚼片胆汁酸吸附的实验方法。以下具体实施方式中，所使用的药品、试剂及仪器如表1、2、3所示：表1样品信息表2对照品信息名称批号规格含量来源牛磺胆酸钠L780Q191G98％百灵威甘氨胆酸钠1-CYJ-2-21G98％TRC牛磺鹅去氧胆酸钠29-GHZ-67-11G95％TRC去氧牛磺酸胆酸钠1-NYL-90-11G95％TRC甘氨鹅脱氧胆酸钠5-YFD-138-11G95％TRC表3主要仪器信息介质的选择：医学认为胃酸pH值约为0.9-1.2(约相当于0.1mol/l盐酸溶液的pH值)，而胃酸中的主要成分为盐酸，还含有胃蛋白酶，在药典中人工胃液即采用稀盐酸和胃蛋白酶配制而成；因此，胆汁酸吸附试验可选择0.1mol/l的盐酸、人工胃液。介质体积的选择：正常人胃酸量为20ml～100ml，平均为50ml，胃酸过多患者一般为100ml～150ml，因此，本试验选择介质体积为100ml。胆汁酸盐种类的确定：按照化学结构划分，胆汁酸可分为游离型胆汁酸和结合型胆汁酸，游离型胆汁酸包括胆酸、脱氧胆酸、鹅脱氧胆酸；游离型胆汁酸不稳定，在酸和Ca2+存在时易沉淀出来，结合型胆酸主要是游离型胆酸分别与甘氨酸或牛磺酸结合的产物，包括甘氨胆酸、牛磺胆酸、甘氨鹅脱氧胆酸、牛磺鹅脱氧胆酸、甘氨脱氧胆酸、牛磺脱氧胆酸，结合型胆汁酸稳定，在酸和Ca2+存在时不易沉淀出来，是胆汁反流中对胃黏膜造成损害的主要物质，因此，选择结合型胆汁酸进行铝碳酸镁的吸附试验研究；根据医学分析及参考文献《胆汁中结合胆汁酸高压液相色谱定量分析(中华实验外科杂志1990年第7卷第4期)》，结合各胆酸盐的溶解情况，即甘氨类的胆酸盐0.1mol/l盐酸溶液或人工胃液中溶解性很差，特别是甘氨脱氧胆酸钠在0.1mol/l盐酸溶液或人工胃液中几乎不溶，因此本研究中不选择甘氨脱氧胆酸钠，而选择的结合型胆汁酸盐有：牛磺胆酸钠、甘氨胆酸钠、牛磺鹅脱氧胆酸钠、甘氨鹅脱氧胆酸钠、牛磺脱氧胆酸钠。铝碳酸镁用量的选择:本品0.5g规格的片用量为1～2片，在本试验色谱方法筛选时选择单次最小用量，即分别为1片量，在做0.5g规格的片研究时，对铝碳酸镁1片量进行实验。胆汁酸盐浓度的确定:参考国外文献《ACOMPARATIVEASSESSMENTOFANEWANTACIDFORMULATIONBASEDONMAGALDRATE(JournalofClinicalandHospitalPharmacy(1983)8,349-355)》，其中抗酸剂吸附胆汁酸盐试验中，选择胆汁酸盐的浓度为0.5mmol/l(分子量约为500)，即浓度为0.25mg/ml。因此本研究选用该浓度进行实验。前处理过程:初步确定本品的体外试验方法是：取本品适量(约含0.5g铝碳酸镁)加至100ml的0.1mol/l盐酸溶液，该盐酸溶液含0.5mmol/l的胆汁酸盐，将以上的所得溶液在37±0.5℃温度下培养1小时，培养过程中振摇混匀，然后于2000rpm离心15分钟；以相同方式分别配制牛磺胆酸钠、甘氨胆酸钠、牛磺鹅去氧胆酸钠、牛磺去氧胆酸钠、甘氨鹅脱氧胆酸钠五种胆汁酸盐的样品溶液。同时以不加铝碳酸镁同法进行操作作为对照品溶液；以对照品溶液和供试品溶液上清液中未吸附的胆汁酸峰面积计算吸附率。参照国外报道的抗酸剂吸附胆汁酸盐文献中的用量，我们在上述方法的基础上将铝碳酸镁和盐酸体积进行同比例减小20倍，即方法修正为：取本品适量(约含25mg铝碳酸镁)加至5ml的0.1mol/l盐酸溶液，该盐酸溶液含0.5mmol/l的胆汁酸盐，将以上的所得溶液在37±0.5℃温度下培养1小时，培养过程中振摇混匀，然后于2000rpm离心本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种铝碳酸镁咀嚼片胆汁酸吸附的实验方法，其特征在于：包括以下步骤：/n1)将铝碳酸镁咀嚼片研细，过筛，称取1/20，加至5ml的0.1mol/l盐酸和0.5m mol/l的胆汁酸盐旋涡混均，将以上的所得溶液在37±0.5℃温度下培养1小时，培养过程中振摇混匀，然后于2000rpm离心15分钟盐酸的溶液，将供试液旋涡混均，将以上的所得溶液在37±0.5℃温度下培养1小时，培养过程中振摇混匀，然后于2000rpm离心15分钟，制备得到供试液1；/n2)采用步骤1)相同的方法，将铝碳酸镁咀嚼片研细，过筛，称取1/20，加至5ml的0.1mol/l盐酸和0.5m mol/l的牛磺胆酸钠旋涡混均，制备得到供试液2；/n3)采用步骤1)相同的方法，将铝碳酸镁咀嚼片研细，过筛，称取1/20，加至5ml的0.1mol/l盐酸和0.5m mol/l的甘氨胆酸钠旋涡混均，制备得到供试液3；/n4)采用步骤1)相同的方法，将铝碳酸镁咀嚼片研细，过筛，称取1/20，加至5ml的0.1mol/l盐酸和0.5m mol/l的牛磺鹅去氧胆酸钠旋涡混均，制备得到供试液4；/n5)采用步骤1)相同的方法，将铝碳酸镁咀嚼片研细，过筛，称取1/20，加至5ml的0.1mol/l盐酸和0.5m mol/l的牛磺去氧胆酸钠旋涡混均，制备得到供试液5；/n6)采用步骤1)相同的方法，将铝碳酸镁咀嚼片研细，过筛，称取1/20，加至5ml的0.1mol/l盐酸和0.5m mol/l的甘氨鹅脱氧胆酸钠旋涡混均，制备得到供试液6；/n7)采用步骤1)相同的方法，将铝碳酸镁咀嚼片研细，过筛，称取1/20，加至5ml的0.1mol/l盐酸溶液旋涡混均，制备得到对照液；/n8)采用HPLC方检测以对照溶液和供试品液1、2、3、4、5、6的上清液中未吸附的胆汁酸峰面积计算吸附率。/n...

【技术特征摘要】
1.一种铝碳酸镁咀嚼片胆汁酸吸附的实验方法，其特征在于：包括以下步骤：
1)将铝碳酸镁咀嚼片研细，过筛，称取1/20，加至5ml的0.1mol/l盐酸和0.5mmol/l的胆汁酸盐旋涡混均，将以上的所得溶液在37±0.5℃温度下培养1小时，培养过程中振摇混匀，然后于2000rpm离心15分钟盐酸的溶液，将供试液旋涡混均，将以上的所得溶液在37±0.5℃温度下培养1小时，培养过程中振摇混匀，然后于2000rpm离心15分钟，制备得到供试液1；
2)采用步骤1)相同的方法，将铝碳酸镁咀嚼片研细，过筛，称取1/20，加至5ml的0.1mol/l盐酸和0.5mmol/l的牛磺胆酸钠旋涡混均，制备得到供试液2；
3)采用步骤1)相同的方法，将铝碳酸镁咀嚼片研细，过筛，称取1/20，加至5ml的0.1mol/l盐酸和0.5mmol/l的甘氨胆酸钠旋涡混均，制备得到供试液3；
4)采用步骤1)相同的方法，将铝碳酸镁咀嚼片研细，过筛，称取1/20，加至5ml的0.1mol/l盐酸和0.5mmol/l的牛磺鹅去氧胆酸钠旋涡混均，制备得到供试液4；...

【专利技术属性】
技术研发人员：莫雅婷，王祖焕，江燕，
申请(专利权)人：重庆健能医药开发有限公司，
类型：发明
国别省市：重庆;50