一种从水栀子中提取京尼平苷化合物的方法及其应用技术

本发明专利技术涉及从水栀子中提取京尼平苷化合物的方法及其应用，有效解决开发水栀子京尼平苷的新用途和高血压的用药问题，将水栀子经体积浓度95%的乙醇回流提取2次，提取液悬浮于水中，分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇各进行5次分离，分离得到的乙酸乙酯部位上CC硅胶色谱柱，用二氯甲烷‑甲醇混合液梯度洗脱，得到馏分A1～A8；馏分A6经MCI凝胶CHP‑20CC，用含水甲醇梯度洗脱，得到亚组分A6‑1~A6‑5；亚组分A6‑1通过硅胶CC，用二氯甲烷‑甲醇混合物梯度洗脱，得到京尼平苷。本发明专利技术原料丰富，制备方法易操作，产品质量好，纯度高，可有效用于制备降血压药物，实现京尼平苷化合物在制备治疗高血压药物中的应用，开拓了水栀子的药物价值和商业价值。

A method of extracting Geniposide from Gardenia jasminoides Ellis and its application

【技术实现步骤摘要】
一种从水栀子中提取京尼平苷化合物的方法及其应用
本专利技术涉及医药，特别是一种从水栀子中提取京尼平苷化合物的方法及其应用。
技术介绍
随着人们生活水平的逐渐提高以及生活节奏的加快，每年高血压患者的人数不断增加，并且出现低龄化。《中国心血管病报告2017》显示我国高血压患病人数约为2.7亿，高血压是最常见的慢性病，也是心脑血管疾病最主要的危险因素。目前的医疗水平还不能进行根治，患者只能采取药物控制。药物的治疗效果较为显著，可以降低重要器官发生并发症的几率，提升生活质量。高血压的发生常伴有肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)的过度激活。RAAS激活后，肾素能够催化血管紧张素原为血管紧张素I，在血管紧张素转换酶(ACE)的催化下，生成血管紧张素II(AngII)，AngII能够直接收缩血管，升高血压，还可以刺激醛固酮(ALD)的生成，促进水钠的重吸收，导致水钠潴留，进一步升高血压。水栀子中含有大量的京尼平苷。有报道京尼平苷具有抗炎、免疫调节、降糖的作用。但对水栀子京尼平苷及其降压作用未见报道。
技术实现思路
针对上述情况，为克服现有技术之缺陷，本专利技术之目的就是提供一种从水栀子中提取京尼平苷化合物的方法及其应用，可有效解决开发水栀子京尼平苷的新用途和高血压的用药问题。本专利技术解决的技术方案是，一种从水栀子中提取的京尼平苷化合物，分子式为C17H24O10，分子结构式为：该京尼平苷化合物是，将水栀子经体积浓度95％的乙醇回流提取2次，每次1h，水栀子与乙醇的重量体积比为1︰7-8，重量体积是指固体以g计，液体以mL计；合并2次提取液，再悬浮于乙醇体积量1/10的水中，分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇各进行5次分离，每次石油醚、乙酸乙酯、正丁醇的用量均为乙醇量的1/10，分别得到石油醚提取部位、乙酸乙酯提取部位、正丁醇提取部位；乙酸乙酯部位采用上CC硅胶色谱柱12×130cm，用95％乙醇体积量1/8的二氯甲烷-甲醇混合液梯度洗脱，梯度依次为100:0、100:1、50:1、25:1、12:1、6:1、0：1，得到8个馏分A1～A8；馏分A6经MCI凝胶CHP-20CC，依次用95％乙醇体积量3/80的含水甲醇梯度洗脱，其中甲醇体积浓度依次为10％、20％、30％、40％、50％，得到5个亚组分A6-1～A6-5；亚组分A6-1通过硅胶CC，用95％乙醇体积量1/40的的二氯甲烷-甲醇混合物梯度洗脱，得到京尼平苷，所述二氯甲烷-甲醇的梯度体积比为4:1、2：1、1:1、0:1。本专利技术从水栀子中提取的京尼平苷化合物具有降血压之功效，可有效用于制备降血压药物。本专利技术原料丰富，制备方法易操作，产品质量好，纯度高，可有效用于制备降血压药物，实现京尼平苷化合物在制备治疗高血压药物中的应用，开拓了水栀子的药物价值和商业价值，经济和社会效益显著。附图说明图1为本专利技术化合物的分子结构式图。图2为本专利技术水栀子总提物中京尼平苷的含量曲线图。具体实施方式以下结合实施例对本专利技术的具体实施方式作详细说明。本专利技术一种从水栀子中提取的京尼平苷化合物在具体实施时，将水栀子10.6kg经体积浓度95％的乙醇80L回流提取2次，每次1h，合并2次提取液，再悬浮于8L的水中，分别每次用石油醚8L、乙酸乙酯8L、正丁醇8L各进行5次分离，分别得到石油醚提取部位391.8g、乙酸乙酯提取部位829.5g、正丁醇提取部位724.2g；乙酸乙酯部位采用上CC硅胶色谱柱12×130cm，用10L二氯甲烷-甲醇混合液梯度洗脱，比例依次为100:0、100:1、50:1、25:1、12:1、6:1、0：1，得到8个馏分A1～A8；馏分A689.3g经MCI凝胶CHP-20CC，依次用3L的含水甲醇洗脱，其中甲醇比例依次为10％、20％、30％、40％、50％，得到5个亚组分A6-1～A6-5；亚组分A6-129.2g通过硅胶CC，用2L的二氯甲烷-甲醇混合物梯度洗脱，得到京尼平苷11.5g，纯度98％以上，有效用于制备降血压药物，所述二氯甲烷-甲醇的梯度体积比为4:1、2：1、1:1、0:1。本专利技术经测试和实验确定为水栀子京尼平苷，具有降血压之功效，有效用于制备降血压药物，有关资料如下：1、水栀子京尼平苷的测定：对从水栀子中提取的化合物用HR-ESI-MS(m/z411.1265[MNa])测定，为京尼平苷，分子量式C17H24O10，分子量411.1262，分子结构式见图1，经1H-NMR和13CNMR确证，数据如表1。采用高效液相色谱法(HPLC)测定了京尼平苷的含量，在98％以上。表1京尼平苷1H-NMR以及13CNMR数据京尼平苷的含量分析利用高效液相色谱对95％乙醇提取物以及各分部位进行了分析。采用HSC18(25cm×4.6mm，5μm；Waters，Milford，MA，USA)进行室温分离。二元梯度洗脱体系由水(溶剂A)和甲醇(溶剂B)组成。分离采用以下梯度程序：0～15min(10％B-30％B)，15～25min(30％B-40％B)，25-30min(40％B-60％B)。柱温在室温下保持不变，流速为0.8mL/min。对京尼平苷化合物反复多次含量分析测定，均取得了相同或相近似的结果，平均含量(纯度)95％。京尼平苷化合物的活性实验。1实验材料1.1实验动物8周龄的SPF级自发性高血压大鼠(SHR)，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，动物许可证号：SCXK(京)2016-0011。饲养于清洁级动物实验室内，饮水饮食自由，于18-22℃饲养，昼夜各12h光照。1.2药物布美他尼(BM170801，桂林南药股份有限公司)；水栀子采自河南省南阳市唐河县，经河南中医药大学陈随清教授鉴定为茜草科植物水栀子的干燥成熟果实。1.3试剂与仪器AB204-N型万分之一精密分析天平(MettlerToledo，Sweden)；iMARK型酶标仪(Bio-Rad，USA)；AB204-N型的万分之一的电子天平(梅特勒，德国)；移液器，Centrifuge-5804R小型高速低温冷冻离心机(Eppendorf，德国)；超纯水(611VFSartorius，Gottingen，Germany)；Renin(肾素)(E-EL-R0030C)、AngII(血管紧张素II)(E-EL-R1430C)、ACE(血管紧张素转化酶)(E-EL-R2401C)、ALD(醛固酮)(E-EL-R0070C)Elisa试剂盒(ElabscienceBiotechnologyCo，Ltd.China)；水合氯醛(天津光复精细化工有限公司)；0.9％氯化钠水溶液(河南科伦药业有限公司)；独立通风装置，大鼠代谢笼装置(江苏苏州冯氏实验动物有限公司)；无创血压检测装置(成都泰盟软件有限公司)；-80℃超低温冰箱(海尔集团)，-20℃低温冰箱(中科美菱集团)。2实验方法2.本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种从水栀子中提取的京尼平苷化合物，其特征在于，该京尼平苷化合物分子式为C

【技术特征摘要】
1.一种从水栀子中提取的京尼平苷化合物，其特征在于，该京尼平苷化合物分子式为C17H24O10，分子结构式为：



制备方法是，将水栀子经体积浓度95％的乙醇回流提取2次，每次1h，水栀子与乙醇的重量体积比为1︰7-8，重量体积是指固体以g计，液体以mL计；合并2次提取液，再悬浮于乙醇体积量1/10的水中，分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇各进行5次分离，每次石油醚、乙酸乙酯、正丁醇的用量均为乙醇量的1/10，分别得到石油醚提取部位、乙酸乙酯提取部位、正丁醇提取部位；乙酸乙酯部位采用上CC硅胶色谱柱12×130cm，用95％乙醇体积量1/8的二氯甲烷-甲醇混合液梯度洗脱，梯度依次为100:0、100:1、50:1、25:1、12:1、6:1、0：1，得到8个馏分A1～A8；馏分A6经MCI凝胶CHP-20CC，依次用95％乙醇体积量3/80的含水甲醇梯度洗脱，其中甲醇体积浓度依次为10％、20％、30％、40％、50％，得到5个亚组分A6-1～A6-5；亚组分A6-1通过硅胶CC，用95％乙醇体积量1/40的的二氯甲烷-甲醇混合物梯度洗脱，得到京尼平苷，所述二氯甲烷-甲醇的梯度体积...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑晓珂，傅阳，袁培培，克迎迎，曹彦刚，张奇，侯颖，冯卫生，
申请(专利权)人：河南中医药大学，
类型：发明
国别省市：河南;41