一种用于检测人CD117蛋白的单克隆抗体、偶联蛋白、抗原表位肽以及杂交瘤细胞株制造技术

技术编号:23392981 阅读:39 留言:0更新日期:2020-02-22 07:04
本发明专利技术涉及一种用于检测人CD117蛋白的单克隆抗体、偶联蛋白、抗原表位肽以及杂交瘤细胞株,属于免疫学技术领域。本发明专利技术中选择以NRQKPVVDHSVRINS为核心的多肽序列作为抗原表位肽制备单克隆抗体,为提高抗原表位肽的免疫效果,在前述的核心序列N端或者C端增加至少1个同时不超过10个氨基酸,使其N端或者C端为含有巯基的氨基酸;将抗原表位肽上的巯基通过偶联剂与载体蛋白上的氨基偶联获得人CD117抗原,用其对于动物进行免疫,获得人CD117单克隆抗体。本发明专利技术中为国内生产人CD117抗体提供了一个新的途径,获得单克隆抗体具有较高的特异性和灵敏度,且价格便宜。

A monoclonal antibody, coupling protein, epitope peptide and hybridoma cell line for the detection of human CD117 protein

【技术实现步骤摘要】
一种用于检测人CD117蛋白的单克隆抗体、偶联蛋白、抗原表位肽以及杂交瘤细胞株
本专利技术涉及一种用于检测人CD117蛋白的单克隆抗体、偶联蛋白、抗原表位肽以及杂交瘤细胞株,属于免疫学

技术介绍
CD117蛋白是一种分子量为145kDa的糖基化磷蛋白,有1个跨膜区,氨基端位于细胞膜外侧,羧基端位于细胞质膜内侧。CD117蛋白具有5个免疫球蛋白样结构域和一个III型酪氨酸激酶生长因子结构域,在调节细胞存活和增殖、造血、干细胞维持、肥大细胞发育、迁移和功能以及黑色素生成等方面发挥重要作用。CD117蛋白在造血干细胞、黑色素细胞、肥大细胞、Cajal细胞、生殖细胞、皮肤基底细胞和乳腺导管上皮等正常组织细胞中表达,在胃肠道间质瘤(GIST)、肺小细胞癌和黑色素瘤、肥大细胞疾病、急性髓系白血病(AML)、和尤文氏肉瘤等异常组织中表达。在临床中常用于胃肠道间质瘤(85-95%阳性率)的诊断,也可与CD34联合使用。近年来,CD117蛋白作为GIST的特异性免疫组化标志物,可以用于靶点用药(格列卫)指导治疗GIST患者。目前本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于检测人CD117蛋白的单克隆抗体,其特征在于:是由人CD117单克隆抗体杂交瘤细胞株分泌获得;所述人CD117单克隆抗体杂交瘤细胞株是以人CD117偶联蛋白为抗原制备而成,所述人CD117偶联蛋白是由抗原表位肽与载体蛋白偶联制备而成;所述抗原表位肽的氨基酸序列为x-NRQKPVVDHSVRINS-y,所述x为0-10个氨基酸构成的辅助序列,所述y为0-10个氨基酸构成的辅助序列。/n

【技术特征摘要】
1.一种用于检测人CD117蛋白的单克隆抗体,其特征在于:是由人CD117单克隆抗体杂交瘤细胞株分泌获得;所述人CD117单克隆抗体杂交瘤细胞株是以人CD117偶联蛋白为抗原制备而成,所述人CD117偶联蛋白是由抗原表位肽与载体蛋白偶联制备而成;所述抗原表位肽的氨基酸序列为x-NRQKPVVDHSVRINS-y,所述x为0-10个氨基酸构成的辅助序列,所述y为0-10个氨基酸构成的辅助序列。


2.根据权利要求1所述的用于检测人CD117蛋白的单克隆抗体,其特征在于:所述x为1-10个氨基酸构成的辅助序列,该辅助序列的N端为含有巯基的氨基酸。


3.根据权利要求1所述的用于检测人CD117蛋白的单克隆抗体,其特征在于:所述y为1-10个氨基酸构成的辅助序列,该辅助序列的C端为含有巯基的氨基酸。


4.根据权利要求1所述的用于检测人CD117蛋白的单克隆抗体,其特征在于:所述抗原表位肽的氨基酸序列为CSPNRQKPVVDHSVRINS。


5.根据权利要求1-4任一项所述的用于检测人CD117蛋白的单克隆抗体,其特征在于:所述载体蛋白为血蓝蛋白、牛血清白蛋白、鸡卵白蛋白中的任一种。

【专利技术属性】
技术研发人员:王亚杰徐星星常秋霜洪赟智李森刘玲玲齐华
申请(专利权)人:河南赛诺特生物技术有限公司
类型:发明
国别省市:河南;41

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