本发明专利技术公开了二聚四氢Xanthone类化合物及其制备方法和应用。二聚四氢Xanthone类化合物，结构如式(I)表示。本发明专利技术从产紫青霉(Penicillium purpurogenum)SC0070发酵产物中分离得到四个新的二聚四氢Xanthone类化合物，抑菌试验表明这些化合物对金黄色葡萄球菌(MSSA)、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和痢疾志贺菌(Shigella dysenteria)有显著的抑制作用，体外抗肿瘤试验表明这些化合物对肿瘤细胞株人肺癌细胞A549、人宫颈癌细胞Hela、人肝癌细胞HepG具有显著的细胞毒活性，同时对正常细胞非洲绿猴肾细胞Vero具有选择性，该类化合物可以用于医药中作为抗菌剂、细胞增殖抑制剂或抗肿瘤药物。
Two poly four hydrogen Xanthone compounds and their preparation and Application
【技术实现步骤摘要】
二聚四氢Xanthone类化合物及其制备方法和应用
本专利技术属于生物医药领域，具体涉及采用产紫青霉(Penicilliumpurpurogenum)SC0070生产二聚四氢Xanthone类化合物的方法；本专利技术还涉及该类化合物在制备抗菌剂、细胞增殖抑制剂或抗肿瘤剂中的用途。
技术介绍
Xanthone类化合物又称苯并色原酮、二苯基-γ-吡喃酮或氧杂蒽酮，其基本母核具有一个线性排列的三环对称结构。其中，苯环氢化形成的四氢Xanthone类化合物，具有多个手性中心以及不同的二聚方式，从而四氢Xanthone二聚体呈现丰富的结构多样性和显著的生物活性。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一类真菌来源的二聚四氢Xanthone类化合物及其制备方法和应用。本专利技术在研究产紫青霉(Penicilliumpurpurogenum)SC0070代谢产物及其抗菌、抗肿瘤活性的过程中，通过柱层析、高效液相色谱层析等分离纯化方法，得到四个新的二聚四氢Xanthone类化合物，抑菌试验表明这些化合物对金黄色葡萄球菌(MSSA)、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和痢疾志贺菌(Shigelladysenteria)有显著的抑制作用，体外抗肿瘤试验表明这些化合物对肿瘤细胞株人肺癌细胞A549、人宫颈癌细胞Hela、人肝癌细胞HepG有显著的细胞毒活性，对正常细胞非洲绿猴肾细胞Vero具有选择性，从而实现了本专利技术的目的。本专利技术的第一个目的是提供一类新的二聚四氢Xanthone类化合物，其特征在于，结构如式(I)表示：本专利技术的第二个目的是提供上述二聚四氢Xanthone类化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：所述的二聚四氢Xanthone类化合物是从产紫青霉(Penicilliumpurpurogenum)SC0070的发酵培养物中分离得到的。优选，具体步骤如下：将产紫青霉(Penicilliumpurpurogenum)SC0070用小麦固体培养基发酵得到发酵产物，发酵培养物用乙醇浸提，乙醇提取物减压浓缩至浸膏状得浸膏，用水分散后，依次用氯仿、乙酸乙酯和正丁醇分步萃取，分别将氯仿和乙酸乙酯萃取部分浓缩后，分别用硅胶柱层析，以氯仿/甲醇为溶剂进行梯度洗脱100:0～70:30v/v，合并后的流分经纯化得到式(I)中化合物1、化合物2、化合物3和化合物4。所述的小麦固体培养基是：每50g小麦加入50mLYMG培养基得到，所述的YMG培养基，每1L水含有4g葡萄糖、10g麦芽提取物、4g酵母提取物。进一步优选，具体步骤如下：将发酵培养物用体积分数95％乙醇水溶液浸提，乙醇提取物减压浓缩至浸膏状得浸膏，用水分散后，依次用氯仿、乙酸乙酯和正丁醇分步萃取，得到氯仿萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；将氯仿萃取物用硅胶柱层析，以氯仿/甲醇为溶剂进行梯度洗脱100:0～70:30v/v，合并得到8个流份C1～C8，其中氯仿/甲醇90:10v/v洗脱部分流分C2通过C18反相硅胶柱层析，用甲醇/水混合溶剂作为洗脱剂，洗脱梯度：甲醇/水10:90～100:0，v/v，根据TLC分析结果，合并得到12个流份C2.1～C2.12，TLC分析展开剂：氯仿/甲醇95:5，Rf＝0.45的为流份C2.7，经重结晶得到化合物2；TLC分析展开剂：氯仿/甲醇90:10，Rf＝0.35的为流分C2.9，其用凝胶柱SephadexLH-20层析分离，以甲醇为洗脱溶剂，并进一步利用制备C18-HPLC，以体积分数41％甲醇/水为洗脱剂，流速5mL/min，纯化得到化合物3，tR＝43.6min；乙酸乙酯萃取物用硅胶柱层析，以氯仿/甲醇为溶剂进行梯度洗脱100:0～70:30v/v，合并得到11个流份E1～E11，氯仿/甲醇94:6v/v洗脱部分流分E4通过C18反相硅胶柱层析，用甲醇/水混合溶剂作为洗脱剂，洗脱梯度：甲醇/水10:90～100:0，v/v，根据TLC分析结果，合并得到9个流份E4.1～E4.9，其中TLC分析展开剂：氯仿/甲醇95:5，Rf＝0.55的流分E4.5依次采用凝胶柱SephadexLH-20层析，以甲醇为洗脱溶剂，制备薄层层析，展开剂氯仿/甲醇＝95/5v/v，Rf＝0.46的流份经重结晶得到化合物1；而TLC分析展开剂：氯仿/甲醇95:5，Rf＝0.40的流分E4.6依次通过凝胶柱SephadexLH-20层析，以甲醇为洗脱溶剂，和制备C18-HPLC，以体积分数41％甲醇/水为流动相，流速5mL/min，得到化合物4，其tR＝52.5min。本专利技术的第三个目的是提供产紫青霉(Penicilliumpurpurogenum)SC0070在制备上述二聚四氢Xanthone类化合物中的应用。本专利技术的第四个目的是提供上述二聚四氢Xanthone类化合物或其盐在制备抗菌药物、细胞增殖抑制剂和/或抗肿瘤药物中的应用。所述的抗菌药物优选为抗金黄色葡萄球菌(MSSA)、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和/或痢疾志贺氏菌Shigelladysenteriae的药物；所述的抗肿瘤药物是抗人肺癌、人宫颈癌和/或人肝癌细胞的药物。本专利技术的第五个目的是提供一种抗菌药物或抗肿瘤药物，其特征在于，含有上述任一四氢Xanthone二聚体类化合物或其药用盐作为活性成分。所述的抗菌药物优选为抗金黄色葡萄球菌(MSSA)、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和/或痢疾志贺氏菌Shigelladysenteriae的药物；所述的抗肿瘤药物是抗人肺癌、人宫颈癌和/或人肝癌细胞的药物。本专利技术从产紫青霉(Penicilliumpurpurogenum)SC0070发酵产物中分离得到四个新的二聚四氢Xanthone类化合物，抑菌试验表明这些化合物对金黄色葡萄球菌(MSSA)、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和痢疾志贺菌(Shigelladysenteria)有显著的抑制作用，体外抗肿瘤试验表明这些化合物对肿瘤细胞株人肺癌细胞A549、人宫颈癌细胞Hela、人肝癌细胞HepG具有显著的细胞毒活性，同时对正常细胞非洲绿猴肾细胞Vero具有选择性，该类化合物可以用于医药中作为抗菌剂、细胞增殖抑制剂或抗肿瘤药物。本专利技术的产紫青霉(Penicilliumpurpurogenum)SC0070公开于文献：JinghuaXue,PingWu,LiangxiongXu,XiaoyiWei.Penicillitone,aPotentinVitroAnti-inflammatoryandCytotoxicRearrangedSterolwithanUnusualTetracycleCoreProducedbyPenicilliumpurpurogenum.Org.Lett.,2014,16(5),1518–1521中。该菌株本申请人也持有，保证自申请日起20年内向公众提供。具体实施方式以下实施例是对本专利技术的进一步说明，而不是对本专利技术的限制。本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.二聚四氢Xanthone类化合物，其特征在于，结构如式(I)表示：/n
【技术特征摘要】
1.二聚四氢Xanthone类化合物，其特征在于，结构如式(I)表示：
2.一种权利要求1所述的二聚四氢Xanthone类化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
所述的二聚四氢Xanthone类化合物是从产紫青霉(Penicilliumpurpurogenum)SC0070的发酵培养物中分离得到的。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，具体步骤如下：
将产紫青霉(Penicilliumpurpurogenum)SC0070用小麦固体培养基发酵得到发酵产物，发酵培养物用乙醇浸提，乙醇提取物减压浓缩至浸膏状得浸膏，用水分散后，依次用氯仿、乙酸乙酯和正丁醇分步萃取，分别将氯仿和乙酸乙酯萃取部分浓缩后，分别用硅胶柱层析，以氯仿/甲醇为溶剂进行梯度洗脱100:0～70:30v/v，合并后的流分经纯化得到式(I)中化合物1、化合物2、化合物3和化合物4。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述的小麦固体培养基是：每50g小麦加入50mLYMG培养基得到，所述的YMG培养基，每1L水含有4g葡萄糖、10g麦芽提取物、4g酵母提取物。
5.根据权利要求3或4所述的制备方法，其特征在于，具体步骤如下：
将发酵培养物用体积分数95％乙醇水溶液浸提，乙醇提取物减压浓缩至浸膏状得浸膏，用水分散后，依次用氯仿、乙酸乙酯和正丁醇分步萃取，得到氯仿萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；
将氯仿萃取物用硅胶柱层析，以氯仿/甲醇为溶剂进行梯度洗脱100:0～70:30v/v，合并得到8个流份C1～C8，其中氯仿/甲醇90:10v/v洗脱部分流分C2通过C18反相硅胶柱层析，用甲醇/水混合溶剂作为洗脱剂，洗脱梯度：甲醇/水10:90～100:0，v/v，根据TLC分析结果，合并得到12个流份C2.1～C2.12，TLC分析展开剂：氯仿/甲醇95:5，Rf＝0.45的为流份C2.7，经重结晶得到化合物2；TLC分析展开剂：氯仿/甲醇90:10，Rf＝0.35的为流分C2.9，其用凝胶柱SephadexLH-20层析分离，以甲醇为洗脱溶剂，并进一步利用制备C1...
【专利技术属性】
技术研发人员：薛璟花，李翰祥，吴萍，徐良雄，魏孝义，
申请(专利权)人：中国科学院华南植物园，
类型：发明
国别省市：广东;44
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。